The effect of Curcuma longa extracted (curcumin) on the quality of cryopreserved boar semen

The aim of this study was to determine the optimal concentration of curcumin needed for cryopreservation of boar semen. Semen samples (n = 9) were collected from nine Duroc boars which having proven fertility were used for routine artificial insemination. Semen samples were collected and divided into six groups (groups A‐F) according to various concentrations of curcumin in freezing extender (i.e. 0, 0.125, 0.25, 0.50, 0.75 and 1.0 mmol/L, respectively). The semen was frozen by traditional liquid nitrogen vapor method and stored at ?196°C in the liquid nitrogen tank. After storage, frozen semen samples were thawed at 50°C for 12 s and evaluated for progressive motility, viability and acrosome integrity. The present results indicated that the addition of curcumin at 0.25 (group C) or 0.50 mmol/L curcumin (group D) yielded the higher percentage of progressive motility (33.3 and 36.1%, respectively) (P < 0.001). A significantly higher percentage of acrosome integrity was found in groups B (29.7%), C (31.1%) and D (30.2%) than in the other groups (P < 0.01). However, there was no significant difference in percentage of viability among groups. In conclusion, addition to the freezing extender of curcumin during cryopreservation at a concentration of 0.25 or 0.50 mmol/L is the optimal concentration of curcumin for improving the quality (i.e. increased progressive motility and acrosome integrity) of cryopreserved boar semen.     

咖啡酸苯乙酯通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解猪精液常温保存氧化应激的作用机制

【目的】探究咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年（1—2岁）、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集,将质检合格的样品混池待用。试验设计如下：首先,在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L^-1浓度的CAPE,将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡,随即转入17 ℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪（CASA）测定1—5 d精子运动学参数（总活率与渐进性活力）,筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L^-1。其次,将0.06 g·L^-1 CAPE与400 μmol·L^-1的H₂O₂建立氧化胁迫模型,在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力,荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性,抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶（catalase,CAT）与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性,在第5 天利用实时荧光定量 PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因（AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT）及凋亡基因BAX的mRNA表达水平,蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】（1）浓度筛选试验中,0.06 g·L^-1的CAPE在保存第3 天显著提高精子的总活率并维持至第5天（P<0.05）,不仅如此,精子的渐进性活力在第1 天显著高于其他处理组（P<0.05）。（2）氧化胁迫试验中,H₂O₂处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H₂O₂混合组（P<0.001）,而空白组与CAPE+H₂O₂混合组的总活率、顶体完整性、CAT与SOD活性不存在显著差异（P>0.05）。与CAPE+H₂O₂混合组相比,H₂O₂处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低（P<0.05）,BAX的表达水平显著升高（P<0.05）,而空白组与CAPE+H₂O₂混合组的AMPK、SOD1、CAT与BAX不存在显著差异（P>0.05）。在蛋白表达水平中,CAPE+H₂O₂混合组与H₂O₂组相比,AMPK、p-AMPK 与p-AMPK/AMPK比率显著提升（P <0.05）。【结论】在常温基础稀释液中添加0.06 g·L^-1CAPE可通过促进磷酸化AMPK的表达,诱导AMPK/FOXO3a信号下游抗氧化分子的转录,继而缓解H₂O₂介导的氧化危害对精液品质产生的影响,延长精液的保存时间,但CAPE保护精子氧化损伤更为深入的分子机制仍需作进一步探究。     

家禽MHC概况及其在抗病育种中的应用

主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物中发现的编码免疫球蛋白样受体（immunoglobulinlike receptors）的高度多态的基因群，其表达产物分布于各种细胞的表面，称为MHC分子。MHC是Snell等（1956）在研究小鼠的移植排斥反应时发现的，家禽中的MHC分子首先是有一种血型被识别的，随之被命名为B复合体（B complex），Schierman和Nordskog（1961）定义家禽的B基因座就是主要组织相容性复合体。     

不同冻融处理对猪精子顶体膜蛋白表达的影响

为探究不同冷冻解冻方法对猪精子损伤的影响,采用2种常用的冷冻解冻方法处理猪精子,分别对其顶体膜蛋白进行分离,进行SDS-PAGE电泳和总灰度值的检测和分析。结果表明,采用一次稀释法进行猪精液的冷冻保存较二次稀释法解冻后精子活率高,精子顶体膜蛋白组分中除125 ku和90 ku处蛋白表达水平低于二次稀释法外,120 ku、48 ku、36 ku均高于二次稀释法。可见,猪精子在受到更深层次(二次稀释法对精子冷冻解冻损伤大)的冷冻损伤时,伴随着顶体膜蛋白125 ku和90 ku表达水平的升高以及120、48及36 ku表达水平的降低。     

Study of Semen Cryopreservation for Banna Mini-pig Inbred Line

In this study, different concentrations of glycerol were added to semen cryoprotective extenders of Banna Mini-pig inbred line (BMI), different thawing solutions and thawing methods were studied. After thawing, the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were compared to optimize the cryopreservation method of BMI semen. The results showed that the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in 2% and 3% glycerol groups than those in 1%, 4% and 5% glycerol groups (P<0.05);The motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in thawing solution Ⅰ than those in thawing solution Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ (P<0.05); Through comparing the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity, the thawing effect in 40℃ 6 s and 50℃ 6 s groups were better than that in 38℃ 30 s (P<0.05). In conclusion, the optimal semen cryoprotective method for BMI was 2% or 3% glycerol as cryoprotectant, using thawing solution Ⅰ to thaw at 40℃ 6 s or 50℃ 6 s.     

杂种野猪宰后肌肉品质特性的研究

猪的品种是影响猪肉食用品质的最主要因素,而猪肉的化学组成成分和宰后生理生化变化则是肌肉品质形成的基础。针对杂种野猪和本地白猪两种不同的品种猪在相同条件下饲养和屠宰,研究了宰后肌肉的色泽红度a值、pH值、嫩度(剪切力)和蒸煮损失的变化情况。试验表明,杂种野猪肉红度较深且保持时间长,pH值高,嫩度差,蒸煮损失少。     

聚维酮碘对常温保存猪精子质量的影响

通过在猪鲜精和17℃保存精液中添加聚维酮碘(PVP-Ⅰ),探讨其杀灭精液有害细菌的效果和对精子质量的影响,从而达到阻断病原菌垂直传播的目的。保存后不同时间时取样精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测精液中细菌菌落总数,并用MicroScanA/S4细菌鉴定仪鉴定细菌种类。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率、活力,低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测线粒体活性和考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,用PVP-Ⅰ消毒猪精液时,在0～0.27g/L随着PVP-Ⅰ质量浓度的增加杀菌效果越好。精液中添加0.20g/L和0.27g/L PVP-Ⅰ能杀死棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌(作用1h),但不能杀死变形杆菌。在猪精液稀释液中添加质量浓度0～0.20g/L的PVP-Ⅰ对17℃保存猪精子质量无影响。结果表明,聚维酮碘在质量浓度0.20g/L能杀死猪精液中的棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌,并且对17℃保存猪精子质量常规指标(活率、活力、线粒体活性、质膜完整性和顶体完整性)无影响。     

海南特种野猪肌肉组织特性与胴体肉质性状的相关性研究

为了研究海南特种野猪肌肉组织学特性及其与胴体肉质性状之间的关系,试验测定了海南特种野猪骨骼肌不同部位肌纤维形态和胴体肉质性状指标,并进行了相关分析。结果表明,海南特种野猪肌纤维直径较小,肌纤维密度较大,肌纤维面积适中;肌纤维等效直径、面积、密度均与剪切力呈显著(P0.05)正相关;肌纤维等效直径和面积与肌内脂肪呈显著(P0.05)负相关;肌纤维长径与肉色和大理石纹均呈显著(P0.05)正相关。结果揭示了海南特种野猪肌纤维等效直径、面积、密度与肉质性状存在显著相关关系。其肌纤维细,肌纤维密度高,肌肉表面纹理细腻致密,嫩度好,肉质优良。     

不同处理对猪精子活率、顶体完整率、DNA含量及精清酶活性的影响

对猪全精进行稀释、保存、冷冻、冷休克处理,测定相关指标.结果表明,精液1:1稀释后,在室温(25℃)保存过程中,精子活率、顶体完整率逐渐下降,精清中GOT活性持续升高,ALP活性变化不明显,LDH活性首先于保存的第24h升高,以后下降.精液1:10稀释后,精子活率急剧降低,顶体完整率没有显著性变化;随室温保存时间的延长,两者呈下降趋势,到室温保存的第24h,除GOT活性升高外,其它两种酶活性变化不明显.精液经冷冻解冻、冷休克处理后,精子活率、顶体完整率大幅度下降,精清中GOT、LDII、ALP活性升高,并随冷休克处理时间的延长而加剧;稀释后再进行冷休克处理,各指标变化幅度减小.本试验结果还表明,猪精液DNA含量为3.14mg/10~9精子,其与精子密度呈正相关(r=0.893),试验中各种处理均未引起精子DNA含量明显变化.