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用两株单克隆抗体混合后包被ELLISA微孔板,加牛冠状病毒抗原,加经白陶土处理过的兔抗牛冠状病毒免血清,再加上辣根氧化物酶标记的羊抗兔IgG抗体,加底物质显色间接ELISA检测牛冠状病毒抗原获得成功。用此方法检测细胞培养的牛冠状病毒上清液,其敏感度高出血凝试验(HA)8倍,从武汉市附近3个奶牛场采集犊牛腹泻粪便105份,用单抗ELISA检测牛冠状病毒抗原,共检出阳性36份,并与血凝及血凝抑制试验, 相似文献
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应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高 相似文献
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选1日龄商品代艾维因混合健雏480只,按单因子随机试验设计分为4组,每组4个重复,每重复30只进行试验。对照组饲喂基础日粮 5mg/kg维基尼亚霉素;试验l,2,3组鸡21日龄前分别饲喂基础日粮 0.1%生命素 0.5%迈克活菌酶;基础日粮 500玎骧/kg糖萜素 0.5%迈克活菌酶;基础日粮 300mg//kg糖萜素 0.3%迈克活菌酶 0.06%生命素。21日龄后分别饲喂基础日粮 0.1%生命素 0.3%迈克活菌酶;基础日粮 300叫kg糖萜素 0.3%迈克活菌酶;基础日粮 200mg/kg糖萜素 0.2%迈克活菌酶 0.05%生命素。各组基础日粮完全相同。试验结果表明:3个试验组供试鸡的体增重分别比对照组提高10.24、9.61和12.48%.料重比分别降低7.50、7.08和11.67%,每只鸡实际赢利分别增加0.5ll、0.671和1.019元,生物学综合评定值分别为106.12、105.75和108.56。不同无公害添加剂组合对维基尼亚霉素具有显著替代作用。 相似文献
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野桑蚕、家蚕海藻糖酶基因5''侧翼区的克隆与序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
海藻糖是一种双糖,广泛存在于包括细菌、酵母、植物和无脊椎动物在内的生物体内,主要功能是储备生物代谢所需的能源.在昆虫血液中,海藻糖是一种最重要的糖类,具有供给能量和提供合成生物大分子的底物等功能.其功能主要是通过海藻糖酶(Trehalase)的作用来实现的.家蚕海藻糖酶有可溶型和膜固定型两种类型,可溶型主要存在于蛹期中肠,而膜固定型存在于包括卵巢在内的多种组织.这两种类型酶是由同一个基因表达而形成不同的成熟海藻糖酶.海藻糖酶膜固定型存在于向血液面的卵巢膜内,该基因的表达是由滞育激素诱导调控.卵母细胞通过位于膜内的海藻糖酶,将血液中海藻糖降解成葡萄糖,然后吸收到胞内,最后合成糖原,从而导致蚕卵的滞育.从而海藻糖酶基因是从分子水平来解明家蚕滞育机理的一个重要途径.本实验从野桑蚕、家蚕苏@菊×明@虎基因组中分别克隆了野桑蚕和家蚕的海藻糖酶基因的5′侧翼区片段并进行了测序分析,以供进一步的启动子功能研究,现报道如下. 相似文献
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从BL21(DE3)E.coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase,T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中,经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中,构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白,这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌,仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子,而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E.coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。 相似文献
39.
半胱胺不同添加方式对生长肥育猪胴体品质的影响 总被引:8,自引:2,他引:6
在生长期和肥育期的猪基础日粮中分别添加360mg/kg和450mg/kg半胱胺(CS)(试验I组每6d添加1d,5d间隔期喂基础日粮)或分别添加60mg/kg和75mg/kgCS(试验Ⅱ组),研究CS不同添加方式对生长肥育猪酮体品质的影响。屠宰试验表明:胴体瘦肉率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别提高5.24%(P<0.05)和4.63%(P<0.05),胴体脂肪率试验I组和试验Ⅱ组比对照组分别降低9.52%和8.53%(P<0.05)。肉质测试表明,CS对背最长肌肉质无明显影响。经包被处理的CS间断性添加和持续添加对朋体性状和肉质均无显著性差异。试验I组和试验Ⅱ组的皮下激素敏感脂酶和血清中生长激素含量分别比对照组提高41.38(P<0.05)、31.11(P<0.05)和38.23(P<0.05)、24.44%(P<0.05)。 相似文献
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柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠和脾脏一氧化氮合酶的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
采用NADPH—d(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate—diaphroase)组织化学法观察了雏鸡感染柔嫩艾美耳珠虫(E.tenella)后一氧化氮合酶(N0S)在盲肠和脾脏中的分布与表达情况。试验结果表明,所有正常鸡盲肠粘膜下层和肌层均有较深的着色,根据以往的资料和N0S的表达特性初步判断为神经元型N0S(nNOS);试验鸡在感染后3~5d,盲肠粘膜上皮和肠腺上皮也有较深的着色,并从感染后7d开始着色减弱;而对照组鸡盲肠粘膜上皮和肠腺上皮以及对照组和试验组的脾脏几乎不着色或着色很浅。试验结果提示,盲肠粘膜上皮和肠腺上皮的着色可能是诱导型N0S(iN0S)表达的结果,而由其产生的N0参与雏鸡球虫感染过程。 相似文献