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以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用优化的反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术,扩增了2331 bp的Vp4全长基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中,构建质粒pGEM-T-Vp4。以SalⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM—T—Vp4.和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp4基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp4。将pW425t-Vp4转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中,通过生长功能弥补筛选阳性克隆,SDS-PAGE分析,可见约87.67Ku融合蛋白。Western blot分析表明,该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,研究结果为pW425t-Vp4在乳酸菌受体菌株中表达提供科学依据。 相似文献
104.
105.
Characterization of a line of pigs previously selected for increased litter size for RBP4 and follistatin 总被引:1,自引:0,他引:1
C.D. Blowe K.E. Boyette M.S. Ashwell E.J. Eisen O.W. Robison & J.P. Cassady 《Zeitschrift für Tierzüchtung und Züchtungsbiologie》2006,123(6):389-395
The objective of this study was to determine if selection response for increased litter size in pigs could be partially attributed to three type 1 marker loci coding for genes known to affect litter size: oestrogen receptor (ESR), retinol‐binding protein 4 (RBP4) and follistatin (FS). In the high litter size line (LS), pigs from the largest litters, based on number of pigs born alive (NBA), were retained to parent the next generation. A randomly selected control line (LC) was maintained. Gilts were reared in litters of 10 pigs or less to minimize maternal effects. Pigs were measured at generations 10–12. Additional traits scored were number of fully formed pigs (NFF) and number of mummified fetuses (MUM). Breeding values for NFF and NBA were greater (p < 0.05) in LS than LC in generations 11 and 12, but no significant line differences were found for MUM. The A allele of the ESR locus was fixed in both lines. After adjustment for effects of genetic drift, frequency of the two alleles segregating for the FS and RBP4 loci did not differ significantly between lines. No significant additive or dominance effects of the FS markers were detected for NFF, NBA and MUM in either LS or LC. Response to selection for increased litter size could not be attributed to effects at the ESR, RBP4 or FS loci. 相似文献
106.
《The Journal of Applied Poultry Research》2006,15(2):256-265
It is well established that the use of alfalfa in diets for monogastric animals is limited by its high fiber content. However, alfalfa is a natural source of xanthophylls and gives poultry products a desirably yellow color. In addition, alfalfa saponins may contribute to reduce the levels of cholesterol in the meat and egg yolk. We have investigated the potential utilization of β-glucanases and β-1,4-xylanases for enhancing the nutritive value of alfalfa for laying hens. An experiment was conducted with 864 ISA Brown layer hens from 40 to 52 wk of age and fed on diets containing rye (19.6%) or rye and alfalfa (15.1%). The results suggested that inclusion of alfalfa in the diets reduced body weights and total egg mass (P < 0.01). Dietary supplementation with polysaccharidases was unable to significantly improve the performance of laying hens. However, egg yolks from birds that consumed diets containing alfalfa were more deeply pigmented, presenting an increase in yellowness (b*). In contrast, at the percentage of incorporation tested, inclusion of alfalfa in the diets was unable to lower the levels of cholesterol content in the egg yolk. Taken together the results suggest that exogenous plant cell wall hydrolases are not effective for improving the nutritive value of alfalfa-containing diets for laying hens, although inclusion of small percentages of the dehydrated leguminous meal may directly affect the quality of the generated poultry products. 相似文献
107.
利用国外报道的与PVr4基因紧密连锁的CAPS标记,对辣椒抗PVY基因PVr4的转育进行了研究和探讨。采用与报道的相同抗源材料CdM334为回交的供体亲本,与5个自交系77013、75-7-3-1、83077、83078、83-163进行回交,在BC1代进行了分子标记的选择。从5个BC1群体75-7-3-1×(CdM334×75-7-3-1)、77013×(CdM334×77013)、83077×(CdM334×83077)、83078×(CdM334×83078)、83-163×(CdM334×83-163)中,分别检测出含有抗病连锁标记的单株21株、15株、10株、11株、12株。 相似文献
108.
109.
牛TLR4基因的遗传多态性与乳房炎的关联分析 总被引:10,自引:2,他引:10
TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象,利用创造酶切位点PCR法扩增243bp的目的片段,通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外显子的多态性,结果发现扩增产物的27bp处C到T的突变使得多态位点产生,编码的氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。A、B2个等位基因在3个群体中均有分布,A等位基因占优势(大于78%),经χ^2适合性检验,三河牛在该位点未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P〈0.05)。运用SAS8.2软件采用最小二乘法拟合线性模型,将该基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析,结果表明:AA基因型为乳房炎抗性基因型(P〈0.05),A等位基因为乳房炎抗性的有利基因。 相似文献
110.
鹅黑素皮质素受体-4基因的克隆与序列分析 总被引:6,自引:1,他引:6
黑素皮质素受体-4(Melanocortin receptor-4,MC4R)是其黑素皮质素受体MCR(MC1-5R)家族成员之一,属G蛋白偶联受体。它可与瘦蛋白、神经肽、α-黑素细胞刺激素等一起调节动物体重和采食量。参考鸡MC4R基因序列设计引物,克隆并测序了鹅MC4R基因。结果表明,鹅MC4R基因编码区全长996 bp,其核苷酸序列与鸡的同源性为95.3%,与人、牛、猪等哺乳动物同源性在75%-79%;其氨基酸序列与鸡的同源性达到98.5%。构建哺乳类、鸟类和鱼类MC4R基因核苷酸进化树显示,鹅较早地与哺乳类动物分化开来。分析MC4R蛋白的氨基酸残基特性参数表明,MC4R的7次跨膜结构与MC4R的亲水性区域、电荷密度以及氨基酸残基位于表面概率的变化规律相一致。 相似文献