尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因的筛选

应用引物退火控制技术(ACP)筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因,寻找与雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因。本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选取雌、雄鱼各5尾组成RNA池,采用引物退火控制技术,分析了两组个体肌肉组织差异表达基因。利用20对随机引物差异显示扩增,共获得8条ESTs,其中5个已知的ESTs分别为转录变体3(LOC100691543)、60S核糖体蛋白(RL3)、小白蛋白β样蛋白、肌型肌酸激酶M2-CK和转录因子Sox4,其余3个为未知的ESTs。实时定量PCR分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼雌雄肌肉组织中的表达发现,8个差异表达基因中转录变体3与ACP6-Y在尼罗罗非鱼雄鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雌鱼(P0.01),ACP3-X、60S核糖体蛋白(RL3)、小白蛋白β样蛋白、ACP15-X、肌型肌酸激酶M2-CK与转录因子Sox4在尼罗罗非鱼雌鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雄鱼(P0.01)。结果表明,应用引物退火控制技术筛选获得了8个可能参与了雌雄鱼肌肉生长发育调控的ESTs,为进一步筛选雌雄鱼肌肉生长发育相关候选基因奠定了基础。     

达氏鳇肌肉组织转录组测序和功能分析

为发掘达氏鳇的功能基因,采用新一代高通量测序技术对达氏鳇肌肉组织转录组进行测序。结果获得原始数据14 447 211 200 bp,拼接获得了55 531条单基因序列(unigene),长度范围300~32 613 bp,平均长度941 bp。利用生物信息学方法对unigene进行了非冗余蛋白质数据库(Nr)相似搜索,此外还进行了GO的功能注释和KEGG代谢通路分析。结果一共有20 735条unigene(37.34%)与Nr数据库中的己知基因同源;根据GO功能可分为生物过程、细胞组分和分子功能3大类56分支;依据KEGG代谢通路分析可以分成290类。     

低温环境对猪不同肌肉组织线粒体的影响

猪是对外界环境温度较为敏感的一种恒温动物。为了探讨低温环境对猪肌肉组织线粒体的影响以及民猪与大白猪间的代谢差异,以民猪(耐寒品种)和大白猪(非耐寒品种)为试验材料,采用Real-time PCR的相对定量方法,检测了轻度和重度冷处理下两个猪种的腓肠肌、比目鱼肌及趾长伸肌线粒体DNA变化情况。结果表明:轻度冷处理下,民猪腓肠肌、比目鱼肌和趾长伸肌的mtDNA表达量均出现了明显的下降,而大白猪则表现为不变或略有上升。重度冷处理下,民猪的腓肠肌显著下降,民猪和大白猪其余的肌肉组织均表现为显著上升,而且比目鱼肌的上升倍数最大。据此认为,轻度冷处理下,民猪各肌肉组织的代谢模式不同于大白猪的;重度冷处理下,以红肌为主的比目鱼肌是颤栗性产热的主要肌肉组织,推测低温环境会诱导肌纤维类型的转化。     

表面增强拉曼光谱快速检测生鲜肉中的瘦肉精

为了快速检测生鲜肉中的瘦肉精,该研究利用表面增强拉曼光谱技术,以沙丁胺醇为检测目标物,建立了一种快速检测肌肉组织和肝脏中瘦肉精含量的方法。在碱性环境下利用乙酸乙酯对样品中沙丁胺醇进行提取,采用Savitzky-Golay 5点平滑法和自适应迭代重加权惩罚最小二乘法消除光谱噪声以及荧光背景对分析建模的影响。为检测方法的重复性,对50个相同沙丁胺醇质量分数(1 mg/kg)的肌肉组织样品进行信号采集,对沙丁胺醇特征峰强度进行分析,621、814、1 253、1 489、1 609 cm~(-1) 5个特征峰强度的相对标准偏差(RSD)为6.54%、6.07%、8.65%、7.44%、6.81%,说明该方法具有较好的重复性。建立沙丁胺醇标准溶液的预测模型,沙丁胺醇浓度与其特征峰强度相关性较好,决定系数R~2为0.968。对肌肉组织和肝脏中沙丁胺醇含量进行检测,检测范围分别为0.01~5和0.02~5 mg/kg,检出限分别为0.01和0.02 mg/kg,其含量与预测实测值决定系数为0.912和0.921。研究表明,该方法可以实现肌肉组织和肝脏中沙丁胺醇含量的定量预测。     

脂肪组织的内分泌功能及其与肌肉组织间的分子信号联系

脂肪组织不仅是机体储存能量的主要场所,还是一个活跃的内分泌器官;骨骼肌同样也具有分泌活性物质的功能,能表达、合成和分泌多种生物信号分子。这些活性因子与许多重要的生理、病理过程有密切的关系。对脂肪组织的内分泌功能及其与肌肉组织间的分子信号联系进行了综述。     

不同铬源对肉鸡肌肉品质及氨基酸含量的影响

为了考察日粮中添加不同铬源(均为有机铬)对肉鸡肌肉品质及氨基酸含量的影响,为铬资源的合理利用提供科学依据。特选用1日龄爱拔益加(Arbor Acres,AA)肉鸡792只,随机分成6个处理组,每个处理4个重复,每个重复33只;对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中分别添加酵母铬0.2mg/kg、吡啶甲酸铬0.2mg/kg或蛋氨酸铬0.1mg/kg(Ⅰ)、0.2mg/kg(Ⅱ)、0.6mg/kg(Ⅲ)型日粮(以Cr3+计),自由采食、饮水,试验期49d。结果表明:1)酵母铬和蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著降低胸肌纤维密度(P<0.05),酵母铬还显著降低了腿肌纤维面积(P<0.05);蛋氨酸铬(Ⅰ)组能显著降低胸肌和腿肌维纤维面积(P<0.05);2)吡啶甲酸铬能显著降低胸肌蛋白质量浓度(P<0.05),蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著降低胸肌粗脂肪含量(P<0.05);3)除蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著提高腿肌总抗氧化能力外(P<0.05),不同铬源对胸肌和腿肌其他抗氧化指标的影响差异均不显著(P>0.05);蛋氨酸铬(Ⅲ)能显著提高胸肌总抗氧化能力、提高腿肌过氧化氢酶活性(P<0.05);4)除吡啶甲酸铬显著降低胸肌丙氨酸含量外(P<0.05),不同铬源对肌肉其他氨基酸含量影响均不显著(P>0.05)。以上结果提示,与对照组相比,酵母铬和蛋氨酸铬较吡啶甲酸铬对改善肉鸡肌肉组织结构及抗氧化性能效果明显,补铬对改善肉鸡肌肉氨基酸含量、提高肉品质效果不明显(P>0.05)。     

大白猪和山西黑猪三种肌肉JAZF1基因的发育性表达研究

本文旨在探究JAZF1基因mRNA在大白猪和山西黑猪肌肉组织中的发育性表达规律,为研究猪肌内脂肪的形成机理提供有力的理论参考。采用实时荧光定量PCR技术检测大白猪和山西黑猪在25d、70d和150d的背最长肌、腰大肌和股二头肌三种肌肉组织中JAZF1基因mRNA表达量。结果表明:随着日龄的增长,JAZF1基因在三种肌肉中呈现逐渐下降的表达趋势。大白猪25d腰大肌和股二头肌、70d股二头肌中的表达量显著高于山西黑猪(P<0.05)。三种肌肉中的表达量比较发现,JAZF1基因在两个品种腰大肌中表达量最高,其次是股二头肌,背最长肌表达量最低。结果表明JAZF1基因在肌肉发育和肌内脂肪沉积过程中起着很重要的作用。本研究结果可为探索肌肉发育及肌内脂肪沉积相关研究提供理论参考和研究基础。     

日粮蛋白水平对藏母羊妊娠期乳腺发育及初生羔羊肌肉组织形态的影响

试验旨在研究日粮蛋白水平对藏母羊妊娠期乳腺发育相关生殖激素及初生羔羊肌肉组织形态的影响,为藏母羊妊娠期日粮合理配制提供依据。4组母羊妊娠前期(0～85 d)放牧饲养;妊娠后期(86～150 d)舍饲饲养,分别饲喂能量相同而蛋白水平依次为7.5%、9.5%、11.5%和13.5%的日粮。结果表明,试验条件下,藏母羊血清中黄体酮、催乳素、生长激素、促黄体素、促卵泡激素含量均11.5%蛋白组最高;初生羔羊肌纤维的直径和面积随着母羊妊娠后期日粮蛋白水平的增高而增加,肌纤维密度随蛋白水平的增高而减小。     

家禽肌肉组织中硝基咪唑类药物残留高效液相色谱检测法研究

 建立了检测家禽肌肉组织中甲硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑残留的高效液相色谱法。样品经乙酸乙酯振荡提取 ,浓缩 ,盐酸溶解残渣 ,己烷萃取除去脂肪。氢氧化钠调节溶液到pH 4 .8～ 5 .2 ,过C18小柱 ,甲醇洗脱 ,SpherisorbC18柱分离 ,32 0nm处检测。流动相为醋酸缓冲液 乙腈 (85∶15 ,v/v)。甲硝唑、洛硝哒唑和二甲硝咪唑检测限分别为 0 .5、1.0和 1.0ng·g-1。肉鸡肌肉组织中添加 6 .0ng·g-1水平回收率分别为 :甲硝唑 89.8% ,洛硝哒唑81.7% ,二甲硝咪唑 86 .6 %。此方法具有定性合理 ,检测限低 ,分析快速 ,准确等特点。     

Determination and Difference Analysis of DNA Methylation Content Both in Blood and Muscle Tissue of Pigs

In this experiment, DNA samples from parental lines Large White, Landrace, and Meishan pigs, and their hybrids Large White × Landrace, Landrace × Large White, Large White × Meishan, and Meishan × Large White pigs were used for the determination of DNA methylation content in both blood and muscle tissue. The differences about DNA methylation content between parental lines and their hybrids were analyzed. These will offer theoretical support from molecular level for heterosis. High performance liquid chromatography （HPLC） was firstly used to detect DNA methylation content. The average DNA methylation content in 163 DNA samples of muscle tissue was 16.92%, whereas, the average DNA methylation content in 182 samples of blood was 6.49%, the difference between which was especially prominent （P 〈 0.01）. In blood, the methylation content was lower than 10%, with the highest level of 9.93% in Landrace x Large White and the lowest of 2.97% in Landrace. The difference between Large White and Landrace was highly significant （P 〈 0.01）, but not significant between Large White and Meishan; and the differences between reciprocal cross hybrids in both hybrid systems were significant （P 〈 0.05）. In muscle tissue, the differences in methylation content among three parents were not significant （P 〉0.05）; and the differences between reciprocal cross hybrids in both hybrid systems were not significant （P 〉 0.05）, but between different hybrid systems, the hybrids had a significant difference （P 〈0.05）. The average methylation content in muscle samples was higher than that in blood samples, and the methylation in different tissues was different.