用CODEHOP设计简并引物克隆反刍月形单胞菌K6乙酸激酶基因片段

利用CODEHOP设计细菌乙酸激酶的简并引物,选用1对引物ACKSe以高效丙酸生成菌反刍月形单胞菌K6基因组DNA进行PCR,得到749 bp PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,测序后经Blastx比对,此DNA产物与其他菌属来源的乙酸激酶蛋白序列具有相似性,所克隆的序列即为K6的乙酸激酶基因片段。用CODEHOP程序化设计的简并引物可信性强,阳性率高。该基因的成功克隆为丙酸生成菌K6乙酸代谢工程研究提供了依据。     

中草药添加剂对鱼类致病菌预防效果的研究

嗜水气单胞菌、柱状黄杆菌是淡水鱼类主要致病菌,能引发鱼多种疾病,包括烂鳃病、出血病、体表溃烂等.本试验对草金鱼分别浸泡和注射感染以上两种菌,观察添加不同组分的中草药添加剂对这两种致病菌是否有预防效果.结果表明:大加三组对嗜水气单胞菌感染预防效果最好,三黄散组对柱状黄杆菌感染预防效果最好.     

两株气单胞菌的分离与鉴定

从福建省某牛蛙养殖场病死牛蛙和某鸭场病死鸭体内分离到两株细菌，检验结果表明，两株分离菌均为有运动力的革兰氏阴性杆菌。根据其临床症状、细菌培养特性、生化特性、动物回归试验以及溶血试验等一系列试验，研究证明牛蛙感染的病原为嗜水气单胞菌，鸭感染的病原为温和气单胞菌。     

斑点叉尾(鮰)嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定及系统发育分析

从发生在四川、重庆等省市的斑点叉尾(鮰)急性流行性传染病病鱼的肝脏、肾脏内分离到1株高致病性菌株(CCF00024),人工感染健康鱼表现出与自然病鱼相同的症状,并从中分离获得同种细菌,证实其为斑点叉尾(鮰)急性流行性传染病的病原菌.形态、生理生化检测表明,该菌为非发酵型直杆菌,严格需氧,革兰氏阴性,极生多鞭毛,对除麦芽糖和甘露糖以外的多种糖类不利用产酸,氧化酶阴性,DNA酶、蛋白酶、脲酶、赖氨酸脱羧酶阳性,MR、VP阴性.在以该菌16S rDNA序列(GenBank登录号AY970826)和GenBank及RDP数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,分离菌CCF00024与嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)聚在一簇,特别是与S.maltophilia M5-1的同源性最高,序列相似性达99.6%,结合形态和生理生化特点将其鉴定为嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia).药敏试验结果表明,对磺胺甲(口恶)唑、磺胺异(口恶)唑、阿齐霉素、洛美沙星高度敏感,而对新霉素、卡那霉素、氨苄青霉素,头孢唑啉、先锋霉素V和链霉素不敏感.     

A3α肽聚糖对受免彭泽鲫免疫应答影响的研究

给彭泽鲫注射接种灭活嗜水气单胞菌苗，然后投喂含有肽聚糖的饲料，测定鲫鱼白细胞吞噬活性、血清和体表粘液溶菌酶活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率等免疫指标。结果：各项免疫指标显著提高，表明A3α肽聚糖可增强受免彭泽鲫的免疫应答效果。     

禽类弯曲杆菌

弯曲杆菌及其同属菌群是脊椎动物和某些非脊椎动物口腔及肠道内的共生菌,这种特性导致控制家禽中弯曲杆菌污染问题复杂化。本文详细讨论了弯曲杆菌的系统发育,基因组学及其生理学,深入揭示了这些微生物是如何通过进化,进而占据肠道的有利环境,提出只有深刻了解它们的生理学,才能制定有效的控制方案。     

嗜水气单胞菌免疫蛋鸡IgY效价变化规律和体外抑菌效果观察

大约在100多年以前,Klemperer发现免疫的鸡可以将Ig从血清转移到蛋黄中,具有IgG样的免疫球蛋白作用.用禽卵大量制备多克隆抗体它有几个优势：饲养成本较低;不会造成动物的伤害;易产生高水平的抗体;在pH4～11时较稳定,可作为口服剂和检测试剂用于预防、治疗和诊断动物疾病,是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。     

嗜水气单胞菌疫苗的检验及免疫效力试验

选用嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ,Ａｈ）疫苗生产用菌Ｊ－１株,以气升式发酵罐２８℃通气培养２８ｈ,制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液。半成品检验表明,该疫苗用菌液内无杂菌生长,细菌数量达２．７×１０１０ｃｆｕ／ｍｌ。以０．４％福尔马林溶液３７℃灭活２４ｈ,制成灭活疫苗。经成品检验,该疫苗为棕黄色液体,涂布平板无活菌生长,以１×１０７ｃｆｕ攻击６尾健康鲫鱼,１周内鲫鱼无异常反应。取该疫苗分别以腹腔注射和浸泡两种方式各免疫１２尾鲫鱼,１月后以同源强毒菌株攻击,疫苗的相对存活率分别为８３．３％和５８．３％。     

用发酵罐制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液培养条件的优化

本试验探讨了用发酵罐培养嗜水气单胞菌灭活疫苗生产菌株Ｊ－１株菌液的最佳条件。分别以发酵罐和摇床在不同的培养条件下培养Ｊ－１株制备菌液,前者１２个批次,后者６个批次。比较不同的培养条件对细菌菌体数量及ＨＥＣ毒素产量的影响。结果表明：发酵罐培养优于摇床培养,以产毒素培养基于２８℃发酵罐通气培养Ｊ－１株,培养２８小时效果最佳,培养菌液含菌量达２．９×１０１０ｃｆｕ／ｍｌ,培养液上清的溶血价达２７,发酵液中残糖为０．１２ｇ／Ｌ,符合发酵工艺要求。