3种飞机草总RNA提取方法比较研究

以飞机草幼嫩叶片为材料,分别采用Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB法对叶片总RNA进行提取。结果表明,异硫氰酸胍法和Trizol法提取的飞机草叶片总RNA质量较高,以异硫氰酸胍法提取的RNA浓度和纯度更优,蛋白质污染少,可用于基因克隆;CTAB法不能提取到RNA或提取的RNA含量极低,电泳检测不到任何条带,不适于提取飞机草总RNA。因此,异硫氰酸胍法和Trizol法可用于研究飞机草入侵适应性的分子机理。     

异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响

为了实现对目标细菌的有效示踪,实验以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,分别设置FITC标记浓度0.2、2、20、50、100、200μg/mL,标记时间1、15、30、60、120、240 min,研究了FITC标记浓度与标记时间对鳗弧菌标记效果的影响,同时对在不同温度(25、4、-20、-70℃)及不同时间(24、48、96、192 h)存储条件下鳗弧菌标记荧光的稳定性进行了比较,对标记鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光变化进行了观察,研究了不同光照条件(0、150、1 500、25 000 lx)对标记鳗弧菌的荧光衰减影响,以及在-20和-70℃条件下反复冻融对标记鳗弧菌荧光强度的影响。结果表明,FITC的最适标记浓度范围为20~100μg/mL,最适标记时间范围60~120 min,储藏在-20和-70℃条件下,标记后的鳗弧菌荧光信号比储藏在4和25℃条件下稳定,标记后的鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光信号稳定性优于对照组,不同强度自然光照对标记鳗弧菌的荧光衰减效果不明显,标记细菌经3次冻融,发现在-70℃条件下冻存的细菌荧光信号稳定性保持良好。本研究结果为FITC用于标记海洋细菌提供了实用的技术参数。     

响应面法优化芥菜芽苗富集异硫氰酸酯发芽条件

[目的]优化芥菜芽苗发芽条件以富集异硫氰酸盐含量。[方法]以芥菜为试材,通过单因素试验和响应面试验研究发芽时间、光照时间和发芽温度对芥菜中异硫氰酸酯含量的影响并对其进行优化。[结果]建立的回归模型显著,可用于预测异硫氰酸酯富集培养条件,各因素对芥菜中异硫氰酸酯含量影响为发芽时间光照时间发芽温度,经模型预测并验证得到芥菜发芽富集异硫氰酸酯的最佳条件为发芽时间4.8 d、光照时间17.4 h、发芽温度30.7℃,在该条件下芥菜中异硫氰酸酯含量可达(721.9±8.9)mg/kg。[结论]该研究结果为芥菜芽苗类功能食品的开发利用提供了参考。     

芥菜籽中异硫氰酸酯提取工艺的优化

以芥菜籽为试材,异硫氰酸酯提取率为考察指标,采用超声提取法,分别设超声温度(40、50、60、70、80℃),超声时间(20、30、40、50、60 min)和乙醇体积分数(65%、75%、85%、95%、100%)3个单因素试验,再在单因素试验的基础上进行响应面试验,优化芥菜籽中异硫氰酸酯的提取工艺。结果表明:乙醇体积分数为70%,超声温度为50℃、超声时间为40 min时,芥菜籽中异硫氰酸酯提取率较高,为2.199%。     

爱拔益加肉仔鸡对胍基乙酸的耐受性评价

本试验旨在研究饲粮添加胍基乙酸(GAA)对爱拔益加(AA)肉仔鸡生长性能、血液学指标、脏器指数、组织同型半胱氨酸含量以及组织形态的影响,以系统评价AA肉仔鸡对GAA的耐受性。试验选用540只1日龄AA肉仔鸡公雏,随机分为5个组,每组6个重复,每个重复18只鸡。5组试鸡分别饲喂在基础饲粮中添加0、800、1 600、4 000和8 000 mg/kg GAA的饲粮。试验期42 d,分为前期(1~21日龄)和后期(22~42日龄)2个阶段。结果表明:与对照组相比,饲粮添加800~4 000 mg/kg GAA显著提高了肉仔鸡前期、后期和全期平均日增重(P0.05),显著降低其后期和全期料重比(P0.05),但对各期平均日采食量均无显著影响(P0.05)。饲粮添加8 000 mg/kg GAA组的平均日增重、平均日采食量和料重比与对照组相比差异不显著(P0.05)。饲粮添加800~8 000 mg/kg GAA对21、42日龄肉仔鸡血常规指标、血清生化指标、脏器指数和组织同型半胱氨酸含量均无显著影响(P0.05)。饲粮添加4 000、8 000 mg/kg GAA对肉仔鸡肝脏和肾脏组织形态无不良影响。由此可见,肉仔鸡饲粮中添加GAA对其生长性能、血液学指标、脏器指数、组织同型半胱氨酸含量和组织形态无不良影响,肉仔鸡可耐受8 000 mg/kg GAA。     

转基因玉米检测中4种DNA提取方法比较

以1%转基因玉米MON810粉末为材料,对比了酚-三氯甲烷法、PVP法、CTAB法、胍-三氯甲烷法4种经过调整和优化的DNA提取方法在转基因玉米检测中的效果差别,该4种方法均能获得可供进行进一步转基因成分检测分析的DNA,其中CTAB提取法获得的DNA质量相对较高。DNA提取过程中,略去蛋白酶、淀粉酶以及RNA酶的使用步骤,同样可获得质量良好的DNA用于转基因成分检测分析。在转基因玉米检测中,可针对样品情况选择和优化方法。     

魔芋叶片中4种总RNA提取方法的比较

本研究分别利用TRIzol法、异硫氰酸胍法、改良的CTAB法及试剂盒这4种方法提取魔芋叶片的总RNA,并用紫外光谱和琼脂糖凝胶电泳对各个提取效果进行鉴定。反复试验的结果表明:TRIzol法难以提取魔芋叶片总RNA,异硫氰酸胍法提取的总RNA浓度低、杂质较多且有部分降解,这两种方法不适宜用于魔芋叶片总RNA提取;试剂盒方法提取的总RNA产率和纯度较高,但稳定性差、成功率低且成本较高;改良的CTAB法利用PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,水饱和酚-氯仿去除蛋白质,醋酸钾去除多糖,该方法提取得到的总RNA的纯度较高,OD260/OD280值为1.893,而且效果稳定,有良好的可重复性。因此,我们认为改良的CTAB法是一种简便、快速且经济的提取魔芋叶片总RNA的方法。     

荧光相图法研究溶菌酶在盐酸胍溶液中的变性

采用荧光相图法分析盐酸胍诱导溶菌酶变性的荧光数据,建立溶菌酶在盐酸胍溶液中失活的变性模型。结果表明,盐酸胍浓度从0.5mol/L变化至3.0mol/L时,溶菌酶从天然态转变为部分折叠中间态,盐酸胍浓度从3.0mol/L变化至6.0mol/L时,溶菌酶从中间态转变为去折叠态。说明盐酸胍诱导溶菌酶变性的过程符合典型的＂三态模型＂。     

HPLC法测定盐酸氯苯胍原粉含量

目的：采用高效液相色谱法测定盐酸氯苯胍的含量。方法：样品经1％盐酸甲醇萃取．以SHIMADZUC8色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）分离,甲醇和2．5％的磷酸溶液以体积比75比25的混合液为流动相,在检测波长为317nm处测定。结果：峰面积与盐酸氯苯胍的质量浓度在1—100．0mg·L^-1范围内呈线性关系。标准加入回收率为（n=6）95．2％,相对标准偏差（n=5）小于0．5％。     

胍基乙酸的体内代谢及在动物生产中的应用

胍基乙酸是一种新型的营养性饲料添加剂,对提高动物生产性能、改善肉质和促进能量代谢等方面具有重要作用,作者综述了近年来胍基乙酸的体内代谢及在动物生产中的研究进展,为胍基乙酸的进一步研究提供了一定基础。