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181.
182.
犬冠状病毒的分离鉴定及其纤突蛋白基因的克隆与序列比较 总被引:10,自引:0,他引:10
以犬胎原代细胞,采用同步接种、带毒传代和添加新细胞的方法,从1例腹泻犬脾脏和1例临床健康犬肠内容物中分离出2株犬冠状病毒(CCVYS1,CCV CI1)。该2株病毒可使CRFK细胞出现典型的细胞融合病变,与从美国引进的CCVNL-18参考株形成的细胞病变相似;电镜负染和超薄切片观察,分离毒株细胞培养物中均含有典型的冠状病毒粒子,并形成胞浆内包涵体;经理化学、生物学鉴定,濉有CCV的特性;间接免疫荧 相似文献
183.
禽流感病毒HA基因的分子克隆和测序 总被引:14,自引:0,他引:14
血凝素(HA)是禽流感病毒诱导机体产生保护性体液免疫反应的主要靶抗原。本研究的目的是克隆HA基因,为以后的表达及基因工程疫苗的研制奠定基础。收获接毒鸡胚的尿囊液,超速离心沉淀病毒,采用异硫氰酸胍法提取病毒RNA,利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒(H9N2亚型)血凝素的cDNA。PCR产物加A尾后,用玻璃奶试剂盒回收纯化目的片段,通过T-A连接将加尾PCR产物连接到线状克隆载体pGEM-T easy vector,转化DH5α感受态细胞,在含氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆,提取质粒,经酶切鉴定,对目的片段进行测序,结果获得了HA基因全长,约1.7kb,与已知序列进行同源性比较,同源性最高的可达97%,所克隆的基因为禽流感HA基因工程疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
184.
185.
186.
187.
为获得苦瓜叶片高温胁迫状态下表达的相关基因,本研究以高温胁迫下苦瓜叶片为实验材料,采用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术对正常温度(26℃)和高温胁迫(38℃)下苦瓜叶片转录测序后进行组装,再利用KEGG、Pfam、Swiss-Prot和NR数据库平台对热激蛋白的相关功能基因筛选,共获得24个热激蛋白相关基因,包括得20个热激蛋白基因、2个位于叶绿体中的小热激蛋白以及2个热激转录因子。聚类分析研究表明,涉及到热激蛋白相关的20个Unigene广泛分布于3大类中,其中c42567和c43094这两个亲缘关系最近;两个小热激蛋白c42963和c12133的亲缘关系次之;c35683和c3040两个热激转录因子亲缘关系最远。通过本次研究中获取的24个热激蛋白相关Unigene信息,有助于深入研究苦瓜耐高温胁迫机理等提供数据信息。 相似文献
188.
雄性不育是水稻杂种优势利用的重要资源,对雄性不育现象的研究具有重要理论意义和实践价值。本研究以自然突变的水稻雄性不育突变体012S-3为试验材料,对其表型特征和花粉育性等进行调查,并构建遗传群体,利用分子标记对目的基因进行初步定位,然后应用基因组重测序技术对其进行精细定位。结果表明,012S-3是一个典型的无花粉普通型雄性不育材料,其不育性状受1对隐性核基因控制。初步定位分析目的基因与SSR标记RM6081存在连锁关系,其遗传距离约为34.4 c M;进一步的精细定位分析,找到3个候选基因:LOC_Os07g35880、LOC_Os07g35920和LOC_Os07g35940,其中LOC_Os07g35880和LOC_Os07g35940编码β-淀粉酶,属于水稻中新发现的花粉致死基因。该不育基因的成功定位为其进一步的分离克隆及其在水稻分子设计育种中的应用奠定了基础。 相似文献
189.
植物蛋白质的亚细胞定位研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
细胞是生命形式的基本组成单元,各种蛋白质按照其功能有序地分布在细胞的每个分区中。植物细胞的主要分区包括细胞膜和其他内膜系统、细胞核、细胞质以及位于其中的线粒体、叶绿体、高尔基体和内质网等各种细胞器。植物蛋白质的亚细胞定位是功能基因组学的重要内容。主要的植物蛋白质亚细胞定位技术包括:融合报告基因定位法、免疫组织化学定位法、蛋白质组学定位技术以及共分离标记酶辅助定位法,而生物信息学预测也成为亚细胞定位研究的一种重要手段。高通量蛋白质亚细胞定位技术的发展和应用,为构建定位数据库积累了数据。在模式植物拟南芥中,有亚细胞定位信息的蛋白质已经超过4 000个。 相似文献
190.