青年猪骨软骨病病理组织学变化与分类

研究了265头青年猪1 060个关节(附关节和腕关节各530个)骨软骨病的病理组织学变化.肉眼观察主要表现为患部关节软骨变色、充血,关节面粗糙、裂开、糜烂或凹陷,并根据其损伤程度进行分类,即正常、轻度、中度和严重,分别占21.7%、33.3%、29.0%、16.0%.显微观察特征为关节软骨局部增厚,软骨细胞增生、肥大;在一些区域软骨细胞变性、坏死,坏死区易形成裂隙;骨质内形成软骨岛.结论:青年猪有很高的骨软骨病发病率,后肢比前肢严重,并表现典型的骨软骨病组织病理学特征.     

西花蓟马(Frankliniella occidentalis)研究进展*

 西花蓟马(Frankliniella occidentalis)属于缨翅目(Thysanoptera)昆虫,最初分布于美国西部,20世纪80年代开始迅速扩散至全球各大洲,目前已在69个国家和地区有报道,成为世界性害虫。F. occidentalis可以以持久性的方式传播番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒,如番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus, TSWV);并且,F. occidentalis传播的病毒所造成的经济损失远远大于其本身所造成的损失。因此控制F. occidentalis的种群以及它的扩散是控制Tospoviruses的关键所在,有鉴于此,各国对F. occidentalis进行了深入的研究。主要论述了近年来F. occidentalis在生物学特征、室内饲养以及它和TSWV的互作关系等方面的进展。     

植酸酶对仔猪生产性能、养分表观消化率及粪、骨、血中钙、磷影响的研究

选用48头体重相近,体质健康的三元杂交(杜×长×大)仔猪为试验动物,随机分为2组,每组3个重复,每个重复8头,对照组为正常磷酸氢钙水平日粮,实验组日粮中添加5000 U/g植酸酶100 g/t替代50%磷酸氢钙。试验结果表明:在饲料中添加5000 U/g的植酸酶,能够使猪的日增重较对照组提高8．85%(P＜0．05),日采食量较对照组提高3．42%,饲料转化效率提高5．08%;钙、磷的表观消化率分别提高了14．29%(P＜0．05)、18．83%(P＜0．05),对粗蛋白质的表观消化率影响不大;添加植酸酶后粪中钙的排出减少21．05%(P＜0．01),粪中磷的排出减少17．91%(P＜0．01);骨中的钙、磷变化不大,全血中的钙提高了9．30%,磷提高了17．91%(P＜0．01);血清中钙提高12．62%,磷提高了7．08%。     

猪瘟病毒石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达

【目的】对猪瘟病毒石门株E2基因进行原核表达，以期获得可溶性表达产物，为检测猪瘟抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】用PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟病毒石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD，A1A2，B和C。分别将4个片段克隆于pMAL－p2X载体中，经PCR、双酶切和测序鉴定，E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确。将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21－CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中，共得到16株重组表达菌，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析。【结果】E2基因的4个主要抗原结构域均可在这4种表达菌中表达，但以BL21－CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好，可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白。免疫印迹结果表明，表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别。【结论】只表达目的基因的抗原结构域，可以缩短表达片段的长度，有利于获得可溶性目的蛋白，并且具有良好的血清学反应的特异性。     

应用ZrNPV防治落叶松绶尺蠖的研究

在落叶松人工林内利用落叶松绶尺蠖核型多角体病毒（ＺｒＮＰＶ）对落叶松绶尺蠖２、３、４龄幼虫进行了防治。使用浓度为１０３×１０７ＰＩＢ／ｍＬ的防治效果：２龄幼虫校正死亡率为７３．５３％；４龄幼虫校正死亡率为６７．５１％。使用浓度为１．０３×１０８ＰＩＢ／ｍＬ的防治效果：２龄虫校正死亡率为９０．８１％；３龄幼虫校正死亡率为８９．４７％；４龄幼虫校正死亡率为８６．４９％。同时证明落叶松绶尺蠖幼虫的龄期越小其死亡率越高、致死时间越短．防治的最适虫龄以２或３龄幼虫为佳。     

胡葱黄条病毒外壳蛋白的原核表达与抗血清的制备

设计特异性引物PCR扩增得到胡葱黄条病毒(SYSV-O)的全长外壳蛋白(CP)基因,构建原核表达载体pET32a-SYSV-O CP,转化大肠杆菌诱导表达。结果表明,SYSV-O CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达,分子量约为46 kDa。用纯化表达产物免疫小鼠制备抗血清,Western blot检测结果表明,抗血清与SYSV-O的CP发生了强烈的特异性反应。使用该抗血清进行了田间样品的带毒检测。     

一步法复合RT-PCR鉴别ND强毒与AI病毒的研究

根据新城疫病毒（NDV）融合蛋白和禽流感病毒（AIV）核蛋白的核酸序列设计2对引物,对NDV和AIV的特异扩增片段分别为156bp和219bp,建立了同时检测强毒力NDV和AIV核酸的一步法复合RT—PCR。试验中未能检出弱毒力NDV,IBV,IBDV,REV,REOV及SPF鸡肌肉组织的RNA,从不同年代分离的16个NDV强毒株全为阳性而NDV弱毒株全为阴性。经验证,复合引物与单一引物的扩增效率一致,能够检出NDV和H;亚型AIV的最低病毒量分别为10^3.7EID。和10^3.9EID50。试验结果表明,此次建立的一步法复合RT—PCR特异、敏感,适用于强毒力NDV和AIV．感染的快速鉴别。     

猪Jiv基因的克隆表达与多克隆抗体制备

【目的】克隆猪Jiv蛋白核心区的2 112bp的基因片段,构建其原核表达载体后进行蛋白的表达和纯化,制备抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。【方法】利用RT-PCR方法,从猪脾脏组织RNA中扩增得到猪Jiv基因,将其克隆到pMD19-T载体并测序,以此为基础构建原核表达载体pET32a-Jiv,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中,利用IPTG诱导表达,获得大量包涵体形式的猪Jiv融合蛋白。通过镍离子螯合层析柱对表达的目的蛋白进行纯化,对纯化后的包涵体蛋白进行透析复性,以每只新西兰白兔400μg蛋白的初次免疫剂量和500μg蛋白的加强免疫剂量进行免疫,共免疫5次,采集血清,采用间接ELISA法检测抗体效价达到一定水平后,收集抗体,利用Western blot检测抗体特异性。【结果】克隆得到长度为2 112bp的猪Jiv基因片段;构建的pET32a-Jiv在E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中经诱导后高效表达,SDS-PAGE结果显示,纯化得到分子质量约为95ku的猪Jiv融合蛋白;测得的猪Jiv蛋白多克隆抗体效价达1∶6 400;Western blot检测结果证实,所获得抗体能够有效地应用于猪Jiv蛋白抗原的检测。【结论】成功地克隆了猪Jiv基因,制备了抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。     

植物病毒载体介导的可溶性甲烷单加氧酶B亚单位在蚕豆植物中的表达

用基因操作技术将编码可溶性甲烷单加氧酶B亚单位（Soluble Methane Monoxygermse-B component：SMMO-B）的基因全长序列导入来自三叶草黄脉病毒（Clover yellow vein virus；CIYVV）侵染性全长cDNA克隆的侵染性植物病毒表达载体pCIYVV／CP／W基因组的NIb／CP基因之间，构建了重组病毒克隆pCV—mmoB。用上述重组病毒克隆接种该病毒的自然寄主植物蚕豆，表现了与野生型CIYVV相同的症状。RT—PCR检测结果表明，子代病毒基因组中的外源基因获得了转录。蛋白质杂交（Western blotting；WB）检测结果表明，sMMO—B亚单位蛋白在被重组病毒克隆侵染的寄主植物中获得了表达。     

泛农花猪繁殖性状遗传参数的初步估测

本文对泛农花猪8头公猪及其44窝后代的若干繁殖性状表型参数和遗传参数,进行了初步估计,其结果如下:1.1982年的平均乳头数13.68个,总产仔数11.14头,产活仔数10.42头,初生个体重1.18公斤,初生窝重12.17公斤,断奶个体重18.15公斤,断奶窝重156.49公斤,断奶仔数8.57头。2.乳头数、总产仔数、产活仔数、初生个体重、初生窝重、断奶个体重和断奶仔数的遗传力各为0.23、0.18、0.34、0.87、0.75、0.11、0.69。3.产活仔数与初生窝重呈强正相关;初生个体重与断奶个体重和初生窝重与断奶仔数呈中等正相关;初生个体重与初生窝重和断奶仔数,以及产活仔数与断奶仔数均呈弱正相关。