不同培养基继代培养蜡蚧轮枝菌对产孢量和烟粉虱毒力的影响

为了探究不同培养基继代培养的蜡蚧轮枝菌对烟粉虱的作用效果,通过继代培养方法测定JMC-01、JMC-02菌株的产孢量、对烟粉虱的毒力及其几丁质酶活性。结果表明,JMC-01、JMC-02菌株在添加蝉蜕和烟粉虱的PDA培养基中连续培养5代的产孢量、对烟粉虱的毒力、几丁质酶活性均高于无添加的PDA培养基,且JMC-01菌株的各项参数均高于JMC-02菌株。JMC-01菌株在添加蝉蜕的PDA培养基中T_1和T_3代的产孢量最大,均为1.279×10~7个/mL,T_3代对烟粉虱的毒力最大,为88.33%,T_5代的几丁质酶活最高,为0.268 3 U/mL;在添加烟粉虱的PDA培养基中,JMC-01菌株的最大产孢量、对烟粉虱的最高毒力和最高几丁质酶活分别出现在S_2、S_4和S_5代,分别为1.270×10~7个/mL、88.33%和0.325 4 U/mL。回归分析结果显示,JMC-01、JMC-02菌株几丁质酶活性与烟粉虱校正死亡率呈显著的正相关,且拟合优度较好。本试验表明JMC-01、JMC-02菌株均对烟粉虱具有较强的毒力,添加蝉蜕和烟粉虱的培养基可以维持菌株生长特性、增加产孢量、延缓菌株退化、增强菌株的几丁质酶活性,为烟粉虱的生物防治提供了新的菌种资源。     

4℃保存的小鼠胎体皮肤成纤维细胞继代培养及冻存

为了探讨利用死亡动物皮肤组织获取成纤维细胞的方法,研究将小鼠胎体或皮肤分别在4℃的mPBS液中保存24~120 h,然后通过原代培养、冷冻复苏和继代培养,观察了皮肤成纤维细胞的生长增殖能力。结果表明:与新鲜皮肤(对照组)原代培养成纤维细胞达到85%以上汇合需要8 d相比,4℃保存24~120 h后的皮肤(试验组)需要的时间延长(9~21 d),但仍能贴壁生长并达到85%以上汇合,且皮肤保存法优于胎体保存法;各试验组经3~4 d继二代培养即可达到85%汇合(对照组为3 d);冷冻复苏的各试验组原代培养细胞,经继二代培养即可在3~4 d内达到85%以上汇合。说明动物死亡后,若及时采集其皮肤并在4℃的mPBS液中保存一段时间,经原代培养和继代培养,或经原代培养、冷冻复苏和继代培养,可获得具有正常继代能力的成纤维细胞。     

苹果砧木组培苗耐盐筛选技术研究

筛选了供试苹果砧木茎尖培养继代苗耐ＮａＣｌ的临界浓度，比较了０．６％ＮａＣｌ对继代苗、生根苗生长的影响。结果表明，继代苗的受害指数、相对增殖系数、相对生物产量、游离脯氨酸含量及细胞膜透性与砧木耐盐性之间存在一定的相关性，以盐胁迫 ５０ ｄ、盐敏感砧木受害指数高于０．７、继代苗生长严重受抑制为标准，确定继代苗耐ＮａＣｌ的临界浓度为０．６％－０．８％；继代苗、生根苗之间存在耐盐相关性。     

长期继代培养过程中楸树愈伤组织的分化能力

以长期继代培养的楸树愈伤组织和新诱导的楸树愈伤组织为试验材料，利用石蜡切片比较分析它们的组织形态特征，并测定过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和淀粉酶的活性，以及可溶性蛋白与可溶性糖的含量，以探究楸树愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的形成原因。组织形态学观察分析发现，继代培养7 a的白色颗粒状愈伤组织细胞中淀粉粒含量丰富，分布均匀，仍为胚性愈伤组织；新诱导的浅绿色愈伤组织存在明显的细胞分化中心，有均匀分布的淀粉粒，为早期胚性愈伤组织；新诱导的黄白色致密愈伤组织为非胚性向胚性转化的愈伤组织，新诱导黄白色疏松愈伤组织为非胚性愈伤组织。生理生化指标测定分析发现，继代培养7 a的楸树胚性愈伤组织中可溶性糖和可溶性蛋白的含量均显著高于新诱导出的3种愈伤组织，但其同工酶活性却较低，表明在长期继代培养的过程中，楸树愈伤组织的生理生化代谢活性降低。由此推测生理生化代谢活性的下降可能是造成楸树胚性愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的重要因素。     

美国“红地球”葡萄无毒苗速繁技术研究

以"红地球"无毒葡萄品种为材料,研究0.5～1 mm茎尖脱毒并附加病毒唑辅助脱毒时诱导分化培养基的影响,选择出1/2MS(B5)+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+100 umol病毒唑效果最好,筛选出兼增殖和生根一次成苗功能的培养基B5+6-BA0.03 mg/L+IBA0.3 mg/L,简化了培养程序,获得较高繁殖率。过渡移栽时应避开夏季高温期,移栽基质以珍珠岩为好,并且移栽与定植的最佳途径是采用两项基质一步完成。     

灵武长枣高效继代增殖体系的建立

对灵武长枣茎段离体培养、高效继代增殖体系进行了研究。结果表明:以灵武长枣当年萌发幼嫩枣头为外植体,诱导腋芽萌发,细胞分裂素/生长素的比值为5倍时,腋芽萌发率最高;将萌发的嫩梢进行继代增殖培养,继代增殖茎段不同的放置方式、茎段不同位置、培养基的相态对增殖倍数有影响。     

大量元素对棕榈藤组培增殖的影响

探讨了大量元素含量对我国主要栽培藤种黄藤、短叶省藤和单叶省藤组培增殖的影响，确定了各大量元素的适宜范围．以优化的配方进行多次继代培养后，抽取离体芽和培养基进行大量元素含量测定，评价配方的好坏和确定多次继代使用是否需要变换配方     

不同冷冻剂对鸡胚PGCs的保护效应

发育至第19期和第28期的鸡胚性腺原始生殖细胞（PGCs）分离提纯后，在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO（二甲基亚砜）、EG（乙二醇）、蔗糖进行超低温冷冻保存，比较冷冻保护剂在单独或联合使用条件下对PGCs的冷冻保护效果，复苏后台盼蓝染色测定细胞存活率，体外接种培养、传代。结果表明：（1）第19期PGCs冷冻保存中，10％EG＋10％FBS＋0．1mol／L。蔗糖条件下细胞存活率最高为（92．20±2．18）％，且与10％DMSO＋10％FBS的存活率差异显著（P〈0．05），其余各冷冻保护液间存活率差异不显著；第28期PGCs冷冻保存中，5％DMsO＋5％EG＋10％FBS＋0．1mol／L。蔗糖条件下细胞存活率最高为（92．41±2．82）％，但各冷冻保护液间存活率差异均不显著（P〉0．05）。（2）解冻后体外培养的PGCs，在饲养层和3种细胞因子（I。IF、SCF、bFGF）的共同作用下，可持续增殖，传至第3代的PGCs，PAS染色、AKP染色均呈阳性并保持完整的二倍体核型，仍处于未分化状态。     

中华结缕草成熟胚再生影响因素研究

以中华结缕草(Zoysia sinica Hance)成熟胚为外植体,研究了培养基、水解酪蛋白(CH)、水解乳蛋白(LH)、植物生长调节剂等对愈伤组织诱导及其生长的影响,以及不同继代周期对愈伤组织分化及植株再生的影响。结果表明:2,4-D是影响愈伤组织诱导的关键因素;MS无机成分及有机成分含量对愈伤组织生长影响不显著,附加CH 500mg/L利于愈伤组织生长;继代培养次数直接影响胚性愈伤组织的诱导及植株再生;不经继代培养转入分化培养基的愈伤组织植株再生率最高达34.2%,随继代次数的增加,再生率明显下降,继代培养3次的愈伤组织再生率低于10%。     

大花序桉离体根培养过程中内源激素的变化

利用大花序桉组培继代苗为材料,研究外源激素对离体根培养过程中内源激素的动态变化过程。结果表明:添加外源激素NAA和IBA,与无激素培养基间达到极显著差异;20 d前后为根原基形成时期,30 d前后为根原基分化增殖时期,40 d前后为根原基伸长时期;不同激素对生根起重要调控作用,高IAA、ABA、i Pa和低ZR含量促进根原基的形成;低IAA、ABA、i Pa和高ZR含量促进根原基分化增殖;低IAA、ABA、i Pa和低ZR含量促进根原基伸长。