贵州黑山羊独立生长因子1B基因cDNA克隆与生物信息学分析

选择与羊同源性较高的牛独立生长因子1B(GFI1B)基因序列设计特异性引物,提取贵州黑山羊脾脏总RNA,通过RT-PCR技术对GFI1B基因进行克隆测序及序列分析。结果表明:首次克隆了贵州黑山羊GFI1B基因cDNA序列996 bp,GenBank登录号为JN662390,编码331个氨基酸。贵州黑山羊GFI1B基因与牛的同源性高达97.0%。聚类分析显示:哺乳动物、禽类和两栖类各为一类。生物信息学分析表明:山羊GFI1B分子包括1个低组分复杂性区域、6个锌指结构域ZnF-C4。同时,预测结果还表明GFI1B分子不包含信号肽序列且没有跨膜螺旋结构域,26个磷酸化位点,蛋白糖基化位点有7个。     

敌百虫中毒对贵州白香猪氧化应激及自由基损伤的影响

为探讨急性敌百虫中毒对贵州白香猪氧化应激和自由基损伤的影响,为贵州白香猪有机磷农药中毒诊断和治疗提供参考数据,采用兽用敌百虫对贵州白香猪进行经口急性毒性试验,观察试验猪临床中毒症状并用分光光度法检测其肝、脾、肺、肾等组织的乙酰胆碱酯酶(AchE)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、胆碱酯酶(CHE)活力及VC、VE水平。结果表明:中毒贵州白香猪体内存在严重氧化应激及自由基损伤;与对照相比,染毒处理试验猪的肝、脾、肺、肾中的AchE、CHE活力及VC、VE含量均呈下降趋势,SOD和POD活力则有所提高,说明,有机磷中毒导致乙酰胆碱酯酶活力受抑制,体内自由基反应加剧。     

DNA池快速筛查牛SOCS2、SOCS3和CIS基因SNPs

选取务川黑牛为试验对象构建DNA池筛查SOCS2、SOCS3和CIS基因SNPs,结果首次在牛中发现CIS基因SNPs位点。在SOCS2基因中快速筛查到的3个SNPs均位于第4外显子内,其中G3456A(Glu→Lys)和G3810A(Val→Ile)为错义突变,T3599C为同义突变;在CIS基因中发现5个SNPs,其中A4086G(Val→Met)为错义突变,位于第3外显子处,其余4个SNPs(C4410T、G4560A、C4566T和G5251C)均位于3’-UTR序列。     

新城疫病毒M蛋白与宿主蛋白相互作用的研究进展

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是单股负链不分节段的RNA病毒,其基因组大小约为15.2 kb,编码6种结构蛋白和2种非结构蛋白.由于NDV基因组较小,不能编码病毒复制需要的所有蛋白,因此必须借助宿主蛋白来完成NDV的生活周期.M蛋白是一种非糖基化膜相关蛋白,在抑制宿主细胞基因转录、...     

体外产气法评价刺梨果渣对肉羊瘤胃体外发酵参数的影响

研究旨在利用体外产气法评价不同水平刺梨果渣的肉羊瘤胃体外发酵参数,为开发利用刺梨果渣饲料资源奠定基础。以4只成年山羊作为瘤胃液供体羊,体外发酵底物为动物饲养试验中肉羊采食的3组饲粮(对照组：不含刺梨果渣;处理1组：含12%刺梨果渣;处理2组：含24%刺梨果渣),测定产气量、发酵参数、纤维素酶活性。结果显示：处理1组6 h累计产气量(GP_{6 h})显著高于对照组(P<0.05),3组间其余时间点产气量差异不显著(P>0.05)。处理1组总挥发性脂肪酸、乙酸含量具有高于对照组、处理2组的趋势(P=0.08);3组间其余发酵参数[氨态氮(NH₃-N)、干物质降解率(DMD)和有机物降解率(OMD)]无显著差异(P>0.05)。3组间瘤胃纤维素酶(纤维二糖酶、羧甲基纤维素酶、木聚糖酶)活性不受刺梨果渣水平的影响,差异不显著(P>0.05)。由此可见,刺梨果渣对肉羊瘤胃体外发酵没有负面影响,可作为肉羊饲料使用,适量水平(12%)的刺梨果渣可提高产气量,促进瘤胃发酵,但仍需结合生产实际情况考虑其对肉羊生产性能的影响。     

不同屠宰体重对江口萝卜猪胴体性状、肉品质、氨基酸和脂肪酸的影响

为研究不同屠宰体重对江口萝卜猪胴体性状、肉品质、氨基酸及脂肪酸的影响,本研究选取60、70、80、90、100、110 kg各6头江口萝卜猪测定了其不同体重阶段的胴体品质和肉质特性,以分析其胴体性状、肉品质及肌肉营养成分随体重的变化规律。结果显示,江口萝卜猪在体重达80 kg之前,其屠宰率、眼肌面积随体重的增加增长较快,氨基酸的含量增加明显,80 kg时肌肉中含有丰富的脂肪酸种类,其中油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸含量较高。江口萝卜猪在体重达90 kg之后脂肪过多沉积,各体重组赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸等必需氨基酸的含量呈显著或极显著差异（P<0.05;P<0.01）。总体上看,江口萝卜猪在体重达80 kg左右时其胴体性状及肉质性能较好,肌肉中氨基酸和脂肪酸含量丰富,且具有理想的氨基酸和脂肪酸构成,尤其是必需氨基酸及鲜味氨基酸含量高,不饱和脂肪酸及饱和脂肪酸构成比例适宜。因此,综合各项测定指标江口萝卜猪在体重达80 kg左右屠宰较优。     

犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化

为了研究犬细小病毒（canine parovirus,CPV）VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPV VP2基因插入原核表达载体pET-32a（+）中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900 bp左右的载体条带和1 755 bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64 ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导5 h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64 ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。     

瘦素基因的研究进展

瘦素（leptin,LEP）是白色脂肪分泌的一种蛋白质激素,在哺乳动物中,LEP是一种16-ku的肽类激素,在能量平衡的神经内分泌和外周调节中发挥重要作用,是反应体脂含量和调节体重、摄食的重要信号因子。在人类疾病方面,LEP基因的表达对很多疾病的发生起着重要的调控作用,尤其是LEP基因的突变可能导致肥胖、糖尿病和乳腺癌等疾病;在畜牧生产上,LEP基因的表达对牛、羊和猪的采食和生长性状影响显著。为了加深对LEP基因的认识,作者对LEP基因的结构及LEP的分布、结构和功能进行了总结,并对近几年LEP基因在疾病和畜牧生产方面的研究进展进行了综述。     

饲料中添加茶叶粉末对育肥猪肉质性状的影响

研究饲料中添加茶叶粉末饲喂育肥猪对其生长性状和肉质性状的影响。试验选择30头4月龄体质量30 kg左右的健康仔猪,随机分为茶叶组与饲料组2个组,每组15头,育肥4个月后屠宰测定。结果表明,2组试验猪在育肥期间生长情况无显著差异;2组试验猪各项肉质指标均较适中,未表现出白肌肉和黑干肉;茶叶组滴水损失、失水率、熟肉率显著低于饲料组,水份含量显著高于饲料组,硒、锌含量极显著高于饲料组,pH值、肉色、大理石纹高于饲料组,嫩度、肌内脂肪含量略低于饲料组;检测16种常见氨基酸和必需氨基酸含量发现,茶叶组大部分都高于饲料组,且鲜味氨基酸和芳香族氨基酸均高于饲料组。结果表明,茶叶粉末是生长育肥猪的理想饲料添加剂。     

OCX-32基因表达载体构建及其对鸡子宫上皮细胞Ca2+浓度和脂质指标的影响

为探究卵黄蛋白原-32（ovocalyxin-32,OCX-32）基因过表达与鸡子宫上皮细胞Ca²⁺含量和脂质指标之间的关联性,本研究采用Ⅳ型胶原酶法分离培养长顺绿壳蛋鸡子宫上皮细胞,构建pcDNA3.1（+）+OCX-32+Flag表达载体并转染子宫上皮细胞,测定OCX-32基因过表达量、Ca²⁺浓度和脂质指标并进行相关性分析。结果显示,试验组的总胆固醇（TCHO）浓度显著高于对照组（P<0.05）,对照组的Ca²⁺浓度显著高于试验组（P<0.05）。OCX-32基因过表达量与Ca²⁺浓度呈显著负相关关系（P<0.05）,与甘油三酯（TG）浓度呈显著正相关关系（P<0.05）,与TCHO浓度呈极显著负相关关系（P<0.01）,TCHO浓度与TG浓度呈极显著负相关关系（P<0.01）,研究结果揭示了OCX-32基因过表达能够调控鸡子宫上皮细胞的Ca²⁺含量和脂质的合成转运,为深入阐释鸡子宫上皮细胞中脂质和钙分泌的调控机制提供试验基础和数据支持。