鸭坦布苏病毒自然感染病例的诊断与病理学观察

为探究鸭坦布苏病毒(DTMUV)在贵州省鸭群的流行,对疑似DTMUV感染肉种鸭进行剖检,观察发病鸭内脏器官病变。取病鸭内脏组织进行RT-PCR检测确诊为DTMUV感染,将病料处理后接种BHK-21细胞,进行RT-PCR鉴定和透射电镜观察,确定分离到DTMUV,并将病料组织制作病理切片。结果显示,接种BHK-21出现明显CPE,电镜观察见病毒颗粒。将分离毒株的E基因经PCR扩增后测序,分析E基因氨基酸序列的同源性,发现所分离毒株与中国北京鸭源参考株同源性最高达99.39%,而与我国早期分离参考株(FX2010)同源性较低,将病料制作切片并进行HE染色,可见脑组织非化脓性脑炎,脾脏淋巴细胞减少,肝细胞变性坏死。本研究成功在贵州省分离到一株DTMUV,对其遗传进化进行分析,为探究贵州省养鸭地区DTMUV的感染和致病提供参考。     

犬IFN-β的克隆及其序列分析

为了分析犬干扰素β(IFN-β)基因分子特征,预测其编码蛋白质的生物学功能,根据GenBank登录的犬IFN-β基因序列(FJ194477)设计合成特异性引物,通过PCR从外周血淋巴细胞总DNA中扩增IFN-β基因CDS区并克隆,应用生物信息学方法对犬IFN-β基因进行序列分析,并对其理化性质以及编码蛋白的二级结构、三级结构进行预测,构建分子系统进化树。结果表明:犬IFN-β基因编码区全长561 bp,共编码186个氨基酸,其分子式可表示为C_(1014)H_(1593)N_(263)O_(290)S_9,分子质量为22.40 ku;属于亲水性蛋白,理论等电点为5.98;含有丰富的二级结构,以α-螺旋(76.88%)和无规则卷曲(19.35%)为主,蛋白三级结构呈弯曲螺旋结构;与貉、威德尔海豹、金钱豹、家猫、宽吻海豚、人、鸡和绿头鸭相对应序列核苷酸序列同源性分别为98.4%、87.2%、85.2%、84.7%、79.0%、74.9%、43.9%和43.3%。说明犬与貉IFN-β核苷酸同源性最高,亲缘关系最近。     

遵义市宠物犬细小病毒感染情况调查

为了解遵义市宠物犬细小病毒的感染情况,对遵义市2家宠物医院2016年3月至2017年3月接诊的1 090个疑似犬细小病毒感染病例进行实验室胶体金快速检测诊断。结果:确诊犬细小病毒阳性232例,发病率为21.28%(232/1 090);犬年龄越小、体型(体重)越小,发病率和死亡率越高;公犬发病率明显高于母犬;春、秋季多发,以春季发病率最高。     

城市公园中水蕨的新发现及其群落物种多样性分析

[目的]调查笔架山公园中新发现长势良好的国家Ⅱ级保护植物水蕨群落的物种多样性。[方法]通过样方调查研究笔架山公园中新发现水蕨群落的生境和物种多样性。[结果]样方内物种数共15种,隶属11科15属。重要值排名前5位的分别为草龙(27.35)、狗牙根(15.69)、水竹叶(14.09)、金钮扣(8.03)和水蕨(5.96),水蕨在整体群落中并不占据优势;此外,该水蕨群落出现3种藤本植物。Simpson指数(D)为0.917,Shannon-Wiener指数(H)为2.735,Pielou指数分别为0.883和0.917,均高于其他区域的典型群落。[结论]建议对该群落定点保护,并清除已有入侵物种薇甘菊和圆叶牵牛。     

杨树吸收富集矿山流域污染土壤重金属的研究

为探究杨树修复矿山流域重金属污染土壤的性能,选取安徽省铜陵市某矿山流域,对其中8个采样点内人工林美洲黑杨（Populus deltoides W. Bar-tram ex Marshall）和立地土壤进行取样,测定了土壤和杨树不同部位Cd、Zn、Cu、Pb和As的含量。参考农用地土地管控标准(GB15618—2018)可知,所有采样点土壤中Cd和Pb的含量均超过农用地风险筛选值;矿山和流域下游土壤中Cd、Pb和As的含量超过农用地土壤风险管控值,Zn和Cu的含量超过农用地风险筛选值。杨树在重金属不同污染程度上的立地土壤中均生长良好,表现出较强的耐受性。从8个样点重金属的平均富集系数（BCF）和转运系数（TF）来看,杨树对Cd的富集转运能力最强,平均BCF达到5.5,平均TF达到1.83,不同部位中树叶富集转运能力相对最强而树枝和树干最弱;对于其他重金属,除树叶Zn的平均BCF达到1.63外,杨树不同部位Pb、As、Zn和Cu的平均BCF均小于1,其中Pb和As的平均BCF均小于0.01,表现出极差的富集能力;杨树对Pb的平均TF小于1,对As、Zn和Cu的平均TF均大于1,在低富集能力水平下表现出较好的转运能力。因此,杨树可作为以Cd-Zn为主的重金属污染土壤的修复树种。     

草苁蓉酒发酵工艺研究

以大米、糯米、草苁蓉为原料,通过单因素试验和正交试验研究了草苁蓉粉用量、酒曲添加量和发酵时间对草苁蓉酒感官评分的影响。结果显示,用大米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.2%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高;而以糯米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.8%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高。由此得到的草苁蓉酒色泽呈亮黄色,澄清度高,甜度适宜。     

银湖山郊野公园典型植物群落物种多样性比较

为增强深圳银湖山郊野公园生态系统的服务功能,优化其植物群落设计,于2012年9月至2013年8月,对12条样线上的人工林和自然群落的物种组成、群落结构及其物种多样性进行调查。结果显示:共有维管植物86科257种,典型人工群落包括台湾相思-杉木人工林和柠檬桉-水团花-九节群落等,典型自然群落包括藜蒴群落、鸭脚木群落、铁榄-红鳞蒲桃-豺皮樟群落以及赤楠蒲桃群落等;与人工群落相比,典型自然群落类型较多,且群落中物种数也较多。4种典型自然群落Simpson指数、Shannon-Wiener指数、Pielou指数平均值分别为0.878、2.646、0.789;与人工群落相比,典型自然群落具有较高的Simpson指数、Shannon-Wiener多样性指数,较低的Pielou均匀度指数,但二者各指标均无显著差异。研究表明自然群落在一定程度上增加了植物群落结构的复杂性,具有较高的群落稳定性。     

犬细小病毒VP2蛋白的原核表达与纯化

为了研究犬细小病毒(canine parovirus,CPV)VP2蛋白的结构和功能,本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,将CPVVP2基因插入原核表达载体pET-32a(+)中构建重组原核表达载体pET-VP2,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后,利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示,重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900bp左右的载体条带和1 755bp左右的目的基因条带,成功构建了pET-VP2重组质粒;重组VP2蛋白的分子质量约为64ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0mmol/L IPTG、诱导5h条件下表达量最高,条带最亮;蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现,只在沉淀中出现了目的条带,而上清中并未出现相应条带,说明重组蛋白均以包涵体的形式存在;纯化后获得的重组蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定,均在64ku处出现条带,说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白,为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。     

以有机硒为硒源栽培黄白侧耳初探

初步研究了不同质量分数的硒代蛋氨酸对黄白侧耳的发菌、出菇以及子实体硒含量的影响。结果表明,培养料中低质量分数的硒代蛋氨酸(0.05 g/kg)对黄白侧耳菌丝的生长有明显的促进作用,较高质量分数的硒代蛋氨酸(0.7¹.0 g/kg)对黄白侧耳菌丝的生长有一定抑制作用,菌丝长势较差。培养料的硒代蛋氨酸质量分数在01.0 g/kg)对黄白侧耳菌丝的生长有一定抑制作用,菌丝长势较差。培养料的硒代蛋氨酸质量分数在0⁰.8 g/kg范围内,黄白侧耳均能正常出菇;较低质量分数的硒代蛋氨酸(00.8 g/kg范围内,黄白侧耳均能正常出菇;较低质量分数的硒代蛋氨酸(0⁰.4 g/kg)对黄白侧耳子实体产量无明显影响,但在较高质量分数硒代蛋氨酸(0.60.4 g/kg)对黄白侧耳子实体产量无明显影响,但在较高质量分数硒代蛋氨酸(0.6⁰.8 g/kg)的培养料上黄白侧耳子实体的产量却显著降低,说明较高质量分数的硒代蛋氨酸对黄白侧耳子实体的生长发育不利。通过测定黄白侧耳子实体的硒含量发现,子实体的硒含量与培养料中硒代蛋氨酸质量分数呈极显著正相关,硒代蛋氨酸质量分数为0.8 g/kg的培养料上子实体的硒含量最高,达到11.43μg/g。     

贵阳地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析

为研究贵阳地区犬细小病毒（canine parvovirus,CPV）的流行基因型及其遗传进化情况,本试验对从贵阳市分离的10株CPV的VP2基因进行PCR扩增和克隆并进行序列分析。结果显示,分离的病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变（CPE）,分离的10株病毒中,7株为CPV-2a亚型,3株为CPV-2c亚型,命名为GY-1~GY-10。10株CPV分离株与疫苗株VP2基因的同源性98.4%~99.4%,与其他国内外参考株的同源性为97.7%~99.9%。本试验首次报道贵阳市CPV的流行基因型为CPV-2a亚型并伴随CPV-2c亚型存在,对监测CPV遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。