H5亚型禽流感病毒荧光检测试纸条的研制

为了对引起家禽重大经济损失和具有公共卫生意义的H5亚型禽流感病毒(AIV)进行快速超敏检测,本研究研制了针对HA蛋白的4株单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞株,通过MAb的两两配对试验,以荧光量子点作为抗体标记生物材料,基于夹心法原理建立了H5亚型AIV荧光免疫层析检测试纸条。结果显示,该方法能够特异性检测出H5N1、H5N2等H5亚型AIV,而与H1N1、H3N2、H7N9、H9N2、NDV等其他病原无交叉反应;对标准检测抗原H5N1(Re-6)的最低检测量为1 ng/mL,比市售H5亚型AIV胶体金检测试纸条灵敏度高100倍;该方法的变异系数(CV)值在10%以内,与商品化的试剂盒检测结果符合率达99.8%。本文建立的H5亚型AIV荧光检测试纸条快速、敏感,检测结果准确可靠,为H5亚型禽流感的流行病学调查和快速诊断提供了基础。     

鲤疱疹病毒2型微滴式数字PCR检测方法的建立及比较分析

本研究建立了定量检测鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果表明,与qPCR相比,ddPCR具有相同的特异性,其灵敏性比qPCR低20倍.在定量CyHV-2 DNA时,ddPCR (R2=0.994)和qPCR (R2=0.994)均表现出良好的线性关系,且2种检测方法间的定量值呈正相关(R2=0.989).在定量检测相同稀释度的CyHV-2 DNA时,qPCR的定量值始终比ddPCR高10倍.ddPCR的组内和组间重复变异系数(CV)分别为0.59％-11.26％和6.55％-23.21％,而qPCR为16.57％-27.56％和22.31％-56.73％,说明ddPCR具有更好的稳定性.在临床样品定量检测时,ddPCR的检出率稍高于qPCR.本研究建立的ddPCR能够准确定量检测CyHV-2,将为CyHV-2相关研究提供有益参考.     

11种有害生物风险评估方法中风险因子的比较

本文依据国际植物检疫措施标准中有害生物风险评估需要考虑的因子为标准,分析比较了国内外11种有害生物风险评估方法中涉及风险因子的数量,得出各方法中风险因子的重视度及各风险因子的重要性,为今后的风险评估方法提供参考。     

警惕酒椰象甲的入侵

2015年8月,深圳出入境检验检疫局从来自香港的旅客携带物中截获大量酒椰棕榈果,深圳局实验室利用声测仪从该果中截获酒椰象甲(Leurostethus raphiae Marshall,1945),同期,北京出入境检验检疫局从非洲入境旅客携带的酒椰棕榈果中检出该虫。酒椰象甲为中国口岸首次截获。本文对该种有害生物的分类地位、分布、寄主、形态特征、传播途径等进行了介绍,并介绍了一种新型的检测技术-声测仪,提出了口岸检疫的应对措施。     

高通量测序技术在进境小麦病原微生物检测上的应用前景

我国是最大的小麦进口国,小麦上携带的病原微生物通过贸易方式传入我国会对我国的农业生产安全带来很大的风险。本文介绍了高通量检测技术在进境小麦病原微生物检测中的应用前景,相比较其他检测技术,高通量检测技术具有高效、快速并全面分析复杂的核苷酸群体的功能,随着测序成本不断降低,高通量测序将成为一项常规的实验手段,在进境小麦病原微生物多样性研究中发挥重要作用。     

泰国输华真柏中一种隐皮孢囊线虫的鉴定

深圳口岸从来自泰国真柏苗木中截获一种隐皮孢囊线虫。序列分析显示截获的孢囊线虫28S r DNA-D2/D3区基因序列与Gen Bank中布林克曼隐皮孢囊线虫(Cryphodera brinkmani)(登录号为JQ965677和DQ328705)的序列相似性为99%。系统进化树中截获的孢囊线虫和布林克曼隐皮孢囊线虫聚为一个分支。结合形态学特征比较和分子特征分析,将截获的孢囊线虫鉴定为布林克曼隐皮孢囊线虫。这是我国口岸首次报道截获该线虫。     

检测H9亚型AIV的压电免疫传感器的研究

[目的]研制检测H9亚型禽流感病毒的压电免疫传感器。[方法]用巯基丙酸在镀银电极石英晶体自组装巯基丙酸单分子膜再通过N-乙基-N-′（3-二甲氨基）丙基碳化二亚胺盐酸（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）偶联抗H9亚型禽流感病毒的特异性单抗构建传感器芯片,建立可以检测H9N2亚型禽流感病毒的免疫传感器。[结果]该方法具有较好的特异性,不与H5亚型流感病毒和新城疫病毒（NDV）反应;检测灵敏度达到20~100EID50。[结论]该研究为深入研究检测禽流感病毒的免疫传感器奠定了基础,为其他相关病毒的监测提供了一种新途径。     

榅桲锈病菌检疫鉴定

榅桲锈病也称为雪松-榲桲锈病,病原菌为Gymnosporangium clavipes(CookePeck)CookePeck,主要分布于北美和中南美洲部分地区,是我国进境植物检疫性有害生物。本文从病原菌的分类地位、分布、寄主、症状、形态特征、生物学特性、与近似种的区别及检疫鉴定方法等方面进行详细介绍,为口岸检疫提供参考。     

基于锁式探针技术的菜豆晕疫病菌检测技术研究

根据菜豆晕疫病菌的一段特异促旋酶亚组B(gyr B)基因序列,设计锁式探针和扩增引物,优化体系反应条件,建立了基于锁式探针菜豆晕疫病菌滚环扩增特异性检测体系。试验结果表明该检测体系能够从供试菌株中特异性检测出菜豆晕疫病菌。该体系检测DNA的阈值为600 fg/μL,与传统PCR相当;检测菌悬液检测阈值1.3×10~3 cfu/m L,比传统PCR高10倍,在模拟样品检测中也显示了更适合于样品的检测。     

根结线虫多样性研究进展

根结线虫属(Meloidogyne spp.)是专性内寄生物,寄主范围广,全球分布,给世界农业生产造成严重为害。生殖方式主要有孤雌生殖和两性融合。系统发育学研究指出,种间杂交可能在根结线虫多样化的进程中起着重要作用。越来越多的证据表明,基因组范围内的序列重复和水平基因转移为根结线虫的多样性提供了遗传基础。南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和北方根结线虫(Meloidogyne hapla)基因组测序的完成和注释也为研究根结线虫的多样性提供了重要线索。根结线虫的多样性给鉴定和防治工作带来了巨大挑战,需要寻找更加有效的方法。