大肠杆菌属16S rDNA实时荧光定量PCR方法的建立及应用

根据GenBank大肠杆菌属16S rDNA基因序列设计并合成PCR引物及针对大肠杆菌属的特异Taqman探针,以大肠杆菌标准菌株的PCR扩增产物作为阳性模板制定标准曲线,建立大肠杆菌属实时荧光定量PCR检测方法。该法Mg2＋最佳工作浓度5 mmol/L,探针最佳工作浓度0.12μmol/L,标准曲线相关系数为0.998,能够定量和特异性检测大肠杆菌而与肠道优势菌群的代表种葡萄球菌、双歧杆菌和芽孢杆菌呈阴性反应,检测大肠杆菌16S rDNA基因的灵敏度达40.8 copies/μL。应用建立的方法对20、26、324、1、47、56日龄樱桃谷鸭的气管、食道、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠进行检测结果表明（以每个细菌含1个16S rDNA基因拷贝数计）,大肠杆菌属细菌总量,气管内为7.06×10^7～3.01×10^8个;食道内为1.73×10^8～3.23×10^8个;十二指肠内为2.29×10^8～2.39×10^9个;空肠内为1.28×10^8～1.69×10^9个;回肠内为1.86×10^8～1.90×10^10个;盲肠内为6.01×10^8～1.38×10^9个;直肠内为1.07×10^8～4.67×10^10个。樱桃谷鸭从食道到直肠的大肠杆菌属细菌的数量呈现上升趋势,盲肠和直肠分布量较多。     

应用TaqMan-MGB探针FQ-PCR探讨鸭瘟弱毒苗在鸭体内的分布及排泄规律

用鸭瘟病毒(DPV)Cha株弱毒苗皮下注射免疫20日龄樱桃谷鸭,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对免疫后10、30、609、0 min及12、24 h和6、9、12、21、366、0 d鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、回盲处、血液、气管、气管分泌液、食管及其分泌液、十二指肠、空肠、回肠、肓肠、直肠及各肠段分泌液中DPV-DNA的拷贝数(以对数值表示)进行了检测。结果显示,免疫后10 min即可在胸腺和血液中检测到DPV-DNA;60 min肾脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.349);脾(9.932)、脑(9.791)、胸腺(9.736)、法氏囊(9.598)及哈德氏腺(8.135)中DPV-DNA拷贝数于90 min分别达到最高;12 h后所有受检样品中都能检测到DPV-DNA,其中心脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.818);肠道中DPV-DNA拷贝数在免疫后6~12 d明显高于其他组织,其中盲肠是DPV-DNA拷贝数(10.591)最高的受检样品,直肠分泌液中DPV-DNA最早于90 min检测到。研究表明,免疫鸭于免疫早期在包括主要免疫器官在内的各实质...     

发达国家创业教育模式对河南高校的启示

河南高校创业教育模式与发达国家差距非常大,在创业教育的理念、课程体系、师资、社会支持体系和实践体系等方面存在严重的问题,极大地削弱了创业教育的效果.应借鉴美国、英国等发达国家创业教育模式的经验,树立先进的创业教育理念,构建多元化的创业教育课程体系,打造高质量的创业教育师资队伍,构建强大的社会支持服务体系,提供实用的创业教育实践平台.     

H2O2对葡萄离体叶片白藜芦醇的诱导作用

[目的]葡萄叶片白藜芦醇含量较虎杖根含量低,难以作为药用提取用途,研究采用诱导剂升高葡萄离体叶片中白藜芦醇的含量.[方法]实验采用H2O2对离体红地球葡萄叶片进行诱导,采用薄层及高效液相色谱法分析白藜芦醇的含量变化,并使用RT - PCR方法分析茋合酶基因(STS)的表达量变化.[结果]H2O2对离体叶片茋类物质具有显著的诱导作用,诱导白藜芦醇的积累呈现显著的量时依赖性;5;H2O2处理48 h后叶片白藜芦醇含量可提高15倍以上,鲜重达到263 μg/g.[结论]H2O2可以作为葡萄离体叶片白藜芦醇的有效诱导剂.     

马鞍型焊缝空间轨迹规划研究

弧焊机器人在进行马鞍型焊缝焊接过程中,不仅要保证运动轨迹而且要保证焊枪姿态和各点焊接参数的合理性以保证焊接质量。本文以马鞍型焊缝为研究对象,利用机器人仿真软件进行弧焊机器人系统进行仿真,对马鞍型焊缝焊接路径的规划和焊枪位姿的优化调整进行探索和研究,生成离线编程数据,仅供参考。     

基于stm32微控制器的高位水箱供水自动控制与质检装置的设计

本设计基于stm32微控制器,提出了高位水箱供水自动控制与质检装置的设计方案,给出了该系统的硬件结构框架与软件设计流程。本设计在高性能MCU的基础上,具有成本低、控制精度高、安全可靠等特点。     

孵育时间对UV-C辐射处理离体葡萄叶片茋类物质含量和种类的影响

[目的]茋类物质是一类重要的次生代谢产物,其在葡萄属植物中承担了重要的病理及生理作用.以往研究发现UV-C照射会引起茋类物质白藜芦醇含量升高,研究UV-C照射后离体叶茋类物质含量与时间的变化关系及与叶龄的关系.[方法]采用不同叶龄的红地球葡萄离体叶片为材料,应用HPLC检测UV-C处理后的不同孵育时间叶片茋类物质的变化规律,以及叶龄对诱导效果的影响特征,同时利用RT-PCR技术对其生物合成途径限速酶基因表达规律进行研究.[结果]UV-C处理后随暗孵育时间的增加,老叶中的茋类物质比率及种类变化较大.诱导后24h时白藜芦醇苷达到376 μg/g,白藜芦醇高达258 μg/g,紫檀茋515μg/g,ε-viniferin达到22μg/g,分别是空白组的1.6、50、100以及62倍.[结论]在UV-C处理离体葡萄叶后,叶龄和暗孵育时间对叶片的茋类物质的积累有重要的影响.老叶在UV-C辐射后24 h茋类物质的种类最多,总含量较高.     

微藻为营养源固定化硫酸盐还原菌对含铜废水动态去除试验研究

从底泥中筛选了一株脱硫弧菌属(Desulfovibrio)硫酸盐还原菌(SRB),选取易分解的普通小球藻、斜生栅藻、羊角月牙藻、螺旋鱼腥藻作为其营养源,以聚乙烯醇和海藻酸钠为主要包埋材料制备固定化SRB微球,并采用正交实验对包埋条件进行优化,然后通过上流式厌氧反应器考察了固定化SRB微球对含铜废水的长期处理效果。结果表明:微藻经过5 d发酵可分解为丙酸、丁酸、戊酸等脂肪酸,其中斜生栅藻由于发酵产物最佳被选为SRB营养源。制备微球最优配比为聚乙烯醇用量2%、海藻酸钠1%、氯化钙6%、二氧化硅1%、菌液50 m L,而且二氧化硅与聚乙烯醇用量对硫酸盐去除率影响最大。上流式厌氧反应器在反应初期对污染物的去除以微球的吸附作用为主,5 d后SRB菌发挥作用,在反应器运行0~36 d期间Cu2+的去除率可达到98%以上,运行45 d基本失效。每克微藻对Cu2+、SO2-4去除能力分别为45.28、182.17 mg·d~(-1)。     

顶空固相微萃取气质联用检测宁夏滩羊肉挥发性风味成分

采用固相微萃取-气相色谱-质谱(SPME-GC/MS)联用分析技术,对6月龄宁夏滩羊背最长肌肉挥发性成分进行了分析,共鉴定出了26种化合物。结果表明,宁夏滩羊肉的挥发性成分主要为烃类5种、酮类5种、醇类7种、醛类3种、酸类1种、酯类1种、含硫含氮及杂环化合物4种。     

中心静脉导管在恶性胸腔积液患者引流中的应用及护理

目的：探讨中心静脉导管在晚期肺癌伴大量胸腔积液患者治疗中的应用及护理。方法：从术前、术中、术后3个阶段分别介绍了护理方法,着重强调了导管的固定、引流、感染预防等护理要点。结果：置管后患者呼吸困难减轻、胸闷、气促、胸痛等临床症状明显改善。结论：运用中心静脉导管作胸腔穿刺引流操作简单,危险性小,患者痛苦小,易于接受,提高了患者的生活质量。