O型FMDV复合多表位在毕赤酵母中的表达与鉴定

将O型FMDV复合多表位CTB-TEpi与FMDV结构基因P1-2A(P1/2A)连入毕赤酵母表达载体pPIC9K,经SacⅠ线性化后,利用电转化法整合到毕赤酵母(Pichia pastoris)基因组中。通过G418浓度梯度筛选得到高拷贝阳性转化子GS115/P1/2A-CTB-TEpi。经甲醇诱导表达后,目的蛋白在毕赤酵母中获得成功表达,并在FMDV自裂解片段2A的作用下裂解为P1/2A和CTB-TEpi 2个片段,相对分子质量分别为81 800和39 400,占上清液中可溶蛋白的比例为25%。Western blotting分析表明,表达蛋白的2部分均可被抗O型FMDV的血清所识别,而且含有CTB片段的CTB-TEpi条带可以被兔抗霍乱毒素血清识别,证明表达的蛋白具有抗原活性,为进一步研究O型FMDV复合多表位亚单位疫苗的免疫效果打下了基础。     

金黄色葡萄球菌肠毒素A在枯草芽孢杆菌中的表达及其活性分析

利用优化后的SEA基因片段与带有枯草芽孢杆菌启动子的表达载体pBC38c,成功构建了含有SEA基因的重组表达质粒pBC38c-SEA。通过电转化的方法,将重组质粒pBC38c-SEA转入枯草芽孢杆菌1A751中。对目的蛋白进行表达,采用硫酸铵沉淀法浓缩上清中的蛋白,超声波裂解法裂解菌体沉淀,SDS-PAGE凝胶电泳法检测蛋白表达情况,Western-blot对表达的目的蛋白进行活性分析,并对表达条件与硫酸铵浓度进行优化。结果表明,成功构建了枯草芽孢杆菌表达质粒pBC38c-SEA,并在枯草芽孢杆菌中获得了表达,目的蛋白存在于培养基上清中,且具有抗原性。随着培养时间的延长,目的蛋白表达产量增多,在35h时达到最多,同时硫酸铵终浓度为50%,目的蛋白得到最好沉淀。本试验结果表明,SEA基因得以分泌表达,为进一步研究其生物活性并作为佐剂在临床中应用奠定了基础。     

大连地区地下水质量影响指标的形成作用分析

为查明大连地区浅层地下水的水化学特征,采用模糊综合评价法对已采的样品进行地下水质量综合评价,并筛选影响地下水质量的指标,应用水文地球化学模拟方法分析各指标的形成作用。结果表明:研究区地下水化学类型以HCO3·SO4·Cl-Ca·Na型水为主,Ⅱ~Ⅲ类、Ⅳ和Ⅴ类水质分别占样品总数的41.67%、8.33%和50.00%,劣质水体集中分布于大中城市构成的城市圈。水文地球化学模拟揭示了钠长石、钙长石的溶解和Ca-Na交换作用是地下水中Na+、Ca2+、Al3+、HCO-3等组分的成因机制,沿海冲积平原区域受工农业活动和海水入侵的复合影响,SO2-、Cl-、NO-3等组分的迁移摩尔质量浓度达到模拟路径的峰值,分别为0.808、3.300和5.12 mmol/L,氧化还原作用也控制着"三氮"组分含量的变化。     

苍山大蒜高产高效栽培技术

苍山大蒜是山东名产蔬菜之一，蒜头大、蒜皮薄、蒜瓣洁白整齐，风味辛辣浓郁，主要有蒲棵、糙蒜、高脚子３个栽培品种。其中，蒲棵的生长势和适应性较强，较耐寒，品质优良，具有香、辣、粘等特点，种植较为普遍。现将栽培技术介绍如下： 一、深耕细作．科学施肥 大蒜根系为弦线状须根，根系较脆弱，生活力差， ８０％～９０％分布在１５～２０ｃｍ深耕层内，喜肥沃疏松的土壤环境，土质以壤土为宜。前茬作物收获后，应抢墒耕翻，耕深约２０ｃｍ，耕后纵横耙细、耙平，做到地平土细，土松下实，无明暗坷垃。 大蒜生长期长，需肥较多，应掌握…     

浑河冲洪积扇地典型地区浅层地下水有机污染现状及成因分析

地下水的有机污染已引起了包括我国在内的许多国家的重视。通过对浑河冲洪积扇地113组浅层地下水水样分析,论述了浑河冲洪积扇地典型地区地下水有机污染的状况,并对地下水中有机污染的来源进行了分析。研究结果表明,研究区内有机物污染可能已威胁到居民的饮水安全,有机污染来源包括天然和人为两个方面。     

冰滑坡涌浪下冰碛坝溃决机理试验研究

[目的]对冰滑坡涌浪导致的冰碛坝溃决过程与溃决机理进行试验研究,为冰川区重大工程建设和冰湖冰碛坝溃决灾害防治提供科技支撑.[方法]开展不同滑块体积、滑动角度、滑动距离、坝体物质组成和坝体几何形态的水槽模型试验.基于试验现象、试验数据与理论推导,对涌浪过程、坝体物质起动和坝体溃决临界条件进行分析.[结果]①冰滑坡涌浪随时...     

全球升温1.5℃和2.0℃情景下贵州省极端降水的变化特征

利用CCSM4和IPSL-CM5A-MR模式1961-2005年历史模拟和2006−2098年RCP2.6和RCP4.5排放情景下的逐日降水以及1961−2005年贵州省84个气象台站逐日降水资料，使用偏差校正改善模式模拟能力，通过降水强度、日最大降水量和强降水量等9个指标探究全球升温1.5℃和2.0℃条件下贵州省极端降水变化特征。结果表明：贵州省RCP2.6和RCP4.5情景下各极端降水指数虽然波动幅度较大，但总体上均呈现增加的趋势，且相对于基准期（1986−2005年）而言全球升温2.0℃时各极端降水指数增幅约为升温1.5℃时的两倍。在升温2.0℃下9个极端降水指数概率密度曲线尾端均向右延伸，表明在升温2.0℃情景下各极端降水指数中高值出现的概率增大。因此，将全球升温控制在1.5℃而不是2.0℃意义重大。     

蒺藜苜蓿miR167c调控生长和花器官发育的功能验证

MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,参与调控植物的生长发育、代谢和逆境响应等过程。本研究通过构建蒺藜苜蓿miR167c的海绵载体，探究miR167c及其靶基因对拟南芥生长发育的影响。靶基因预测结果显示，生长素响应因子6/8(Auxin response factor 6/8,ARF6/8)、类受体蛋白激酶家族蛋白(Receptor-like protein kinase-related family protein, RPK)和IAA-氨基酸水解酶(IAA-Alanine resistant 3,IAR3)基因为拟南芥miR167c的靶基因。实时荧光定量分析表明，转基因拟南芥植株中At-miR167c表达量较野生型显著降低，而上述4个靶基因的表达量显著上调。转基因拟南芥的花期提前，花序紧凑，花苞数量增多；莲座叶数量和鲜重显著增加；株高、分枝数和果荚数明显增加。研究结果为进一步解析miR167调控植物生长和花器官发育的分子机制提供了参考依据。