日本脑炎病毒弱毒疫苗株全长cDNA的体外合成及恢复病毒的拯救

将病毒的全基因组分成3个重叠的区段分别扩增出来,把这3个片段连接到载体中。以这3个片段为模板,通过融合PCR方法,获得JEV的全长cDNA。以cDNA为体外转录的模板,体外转录获得病毒mRNA,转染BHK-21细胞,拯救JEV病毒。通过生物学特性、分子生物学、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定,并测定恢复病毒的生长曲线和LD50。结果显示,获得了全长cDNA,体外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞后,二代恢复病毒可引起明显的细胞病变,间接免疫荧光试验和RT-PCR均为阳性。空斑试验表明,拯救病毒与原病毒空斑表型类似;恢复病毒与亲本毒相比在BHK-21细胞上生长更快;恢复病毒的LD50与亲本毒类似。     

沈家门渔港亟待整治

舟山渔场的重要港口沈家门渔港，地理位置十分优越，它位于舟山本岛东南隅、南面有鲁家峙、马峙山、小干山、蛇山对峙成港，挡住强台风威胁；北面有黄舵山，邻陀山、香岩山等高山抵住寒流侵袭。     

日光温室早春茬黄瓜高产栽培技术

日光温室生产的早春茬黄瓜,一般在2月份定植,4～6月份进入采收高峰期,比大棚黄瓜早上市一个多月,这个阶段是黄瓜生产的淡季,上市量少,价格较高,经济效益可观,平均亩效益在万元以上。下面,介绍一下温室早春茬黄瓜的栽培技术。     

黄颡鱼成鱼饲养技术

黄颡鱼 [ｐｓｅｕｄｏｂａｇｒｕｓｆｕｌｖｉｄｒａｃｏ (Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ) ],俗称黄骨鱼、黄丫鱼、黄姑鱼、黄刺鱼、黄鼓鱼、黄蜡丁、安丁鱼 ,鲶形目 ,鱼尝科 ,黄颡鱼属。黄颡鱼肉嫩味鲜 ,营养丰富 ,为重要的经济鱼类。近因销量剧增 ,野生资源锐减 ,成鱼售价稳中上扬 ,人工养殖黄颡鱼的热潮 ,正在全国兴起。应广大养殖户要求 ,特编写本资料。黄颡鱼成鱼养殖模式有 :鱼塘单养、鱼塘混养、网箱单养等多种形式。1　鱼塘单养鱼塘单养 (含水泥池精养 )黄颡鱼 ,一亩水面需投放 2 5～ 3ｃｍ鱼苗 5 0 0 0～ 10 0 0 0尾 ,另外每亩套养 10 0～…     

斑鳠池塘精养试验

斑鳠是名贵经济鱼类，目前资源遭到破坏，因此开展斑鳠人工繁殖和人工养殖对其资源保护与增殖有着重要意义。为了探讨如何提高斑鳠养殖技术水平，我们于1995年进行了池塘精养斑鳠试验。现将试验结果报告如下。     

三疣梭子蟹良种繁育技术

本繁殖技术是笔者经总结历年于潍坊、日照等地从事三疣梭子蟹苗种生产经验而成。在适宜地区严格按照本技术规程生产,取得二龄幼蟹每茬0.3千克/米~3以上的单产成绩,部分池子有望达到每茬0.75千克/米~3以上。 一、育苗设施 新建或利用原有的对虾、河蟹育苗室、工厂化养鱼车间均     

与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定

以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2[N119I]和pGEX-4T-1-Rab2[Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2[N119I]和GST-Rab2[Q65L]融合蛋白的表达,使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白;最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Δvirb2缺失布鲁菌株上清互作,利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白,质谱分析差异蛋白。结果表明:所鉴定出的布鲁菌株效应蛋白为热休克蛋白HSP70。这为未来研究HSP70如何调节布鲁菌胞内寄生奠定基础。     

西部地区农业转型升级期农户信息需求与服务建设研究——以安宁河流域西昌市农户的调研为例

西昌市经过多年发展农业转型升级较为成功.笔者通过随机抽样发放问卷并辅以个别访谈的形式,在西昌市各乡镇进行了实地调查.经过对800户农村居民的信息需求进行调查、统计分析与研究,总结了西昌市在农业转型升级时期信息需求与服务建设情况,以其取得的成效向我国西部地区辐射,为农村可持续发展中农业信息化建设提供参考依据.