| 与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定 |
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| 引用本文： | 崔桂梅,魏盼,赵玉玺,潘垒昌,徐晓晗,彭其胜.与Rab2互作布鲁菌株效应蛋白HSP70的鉴定[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2014(2). |
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| 作者姓名： | 崔桂梅 魏盼 赵玉玺 潘垒昌 徐晓晗 彭其胜 |
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| 作者单位： | 吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31372409) |
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| 摘 要： | 以Rab2作为诱饵钓取布鲁菌效应蛋白,通过RT-PCR获得鼠Rab2基因,利用基因克隆方法构建表达载体pGEX-4T-1-Rab2及其2个突变体pGEX-4T-1-Rab2N119I]和pGEX-4T-1-Rab2Q65L];然后IPTG诱导GST-Rab2、GST-Rab2N119I]和GST-Rab2Q65L]融合蛋白的表达,使用琼脂糖亲和介质分离纯化融合蛋白;最后将纯化的融合蛋白与超声破碎的野生布鲁菌或Δvirb2缺失布鲁菌株上清互作,利用SDS-PAGE电泳和银染确定差异蛋白,质谱分析差异蛋白。结果表明:所鉴定出的布鲁菌株效应蛋白为热休克蛋白HSP70。这为未来研究HSP70如何调节布鲁菌胞内寄生奠定基础。
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| 关 键 词： | 布鲁菌 Rab 效应蛋白 HSP |
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