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海棠山自然保护区特殊的地理区位和丰富的森林植被资源。通过近20a的保护管理取得了明显的生态效益和社会效益、经济效益。如对保护区在加大资金投入,增加保护管理设施和科技含量,其森林生态系统的巨大功能,对辽西及中国西北部的生态建设意义重大。 相似文献
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将病毒的全基因组分成3个重叠的区段分别扩增出来,把这3个片段连接到载体中。以这3个片段为模板,通过融合PCR方法,获得JEV的全长cDNA。以cDNA为体外转录的模板,体外转录获得病毒mRNA,转染BHK-21细胞,拯救JEV病毒。通过生物学特性、分子生物学、蛋白水平等几个方面对恢复病毒进行鉴定,并测定恢复病毒的生长曲线和LD50。结果显示,获得了全长cDNA,体外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞后,二代恢复病毒可引起明显的细胞病变,间接免疫荧光试验和RT-PCR均为阳性。空斑试验表明,拯救病毒与原病毒空斑表型类似;恢复病毒与亲本毒相比在BHK-21细胞上生长更快;恢复病毒的LD50与亲本毒类似。 相似文献
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猪日本乙型脑炎病毒(JEV)是引起以母猪流产为主要特征的繁殖障碍性疾病病原之一,笔者拟构建JEV的DNA型复制子载体,并利用该载体表达外源基因。以JEV毒株SA14-14-2为基础,去除病毒结构蛋白基因prM和部分E基因而保留全部非结构蛋白和非编码区序列,插入FMDV2A和丁肝病毒核酶序列构建复制子表达载体pAC-JEV,实时定量PCR、间接免疫荧光、Western blotting方法检测JEV自身蛋白(NS3)表达,验证复制子的自主复制能力。在pAC-JEV的结构蛋白C基因下游插入EGFP基因、猪流感病毒的HA和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的GP5基因构建重组复制子pAC-JEV-EGFP、pAC-JEV-HA、pAC-JEV-GP5和NS5基因缺失载体pAC-JEV-ΔNS5,该复制子载体转染BHK-21,荧光显微镜直接观察EGFP表达,Western blotting方法检测外源蛋白质(GFP、GP5、HA)表达情况。结果表明:随着转染时间延长,复制子转染细胞内NS3的表达逐渐增加,表明所构建的JEV复制子表达载体具有自主复制能力。EGFP mRNA转录水平和EGFP蛋白质荧光信号随着转染时间的延长逐渐增加,并且荧光信号可持续8d以上,携带猪流感病毒的HA和猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5基因的复制子载体转染BHK-21细胞后,HA和GP5能有效表达,说明复制子具有表达外源蛋白质的能力。该复制子表达载体的成功构建,为深入研究JEV各蛋白质的功能、各蛋白质与细胞内蛋白质相互作用关系以及基于复制子载体的疫苗开发等提供了技术平台。 相似文献
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海棠山自然保护区是辽西风沙干旱地区保存最完整的天然林区。地处中国一级敏感带上,位于荒漠化向外扩展的前沿。区内有华北、长白和蒙古三个植物区系的植物,植物区系丰富,由这三大植物区系组成的各种植物群落,具有强大的向外辐射能力。它是阻止科尔沁沙地南侵,保护辽河平原和辽宁工业城市群社会经济可持续发展的天然绿色屏障。特殊的地理位置决定了海棠山自然保护区的特殊生态意义。 相似文献
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一、接穗采集和嫁接方法接穗采自品种纯正、生长健壮且无病虫害的结果母树。剪取当年生新梢或1年生枝的中部做接穗,随采随用。春季嫁接用的接穗可于休眠期剪下,在0~5℃条件下保湿贮存。将接穗进行蜡封处理,可延长休眠保存期和提高嫁接成活率。对新植1~2年生的山杏,中心干粗度在1~1.5厘米,在距地面10厘米左右处嫁接,接穗的粗度尽量与砧木相同,应采用劈接。3年生以上中心干比较粗,且着生了主侧枝,除中心干换头外,主侧枝上均要进行换头,应采用腹接和劈接。对3~5厘米粗的主侧枝,1个枝上应接2~3个头,应采用切接。若树液开始流动,位于背风处… 相似文献