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牡丹(Paeonia suffruticosa Andrews)花色的化学基础研究较为深入,但因其无遗传转化体系,导致花色相关基因的功能验证只能利用其他植物进行旁证。利用保守区段长分别为413和418 bp的牡丹花瓣类黄酮糖基转移酶基因PsUF3GT和PsUF5GT,通过VIGS表达载体,采用二因素三水平的试验体系对目的基因进行沉默。结果表明,PsUF3GT和PsUF5GT的表达量在花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤15 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤10 min)分别比空载体处理的花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤10 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤15 min)降低了65.0%和85.0%;花斑中总花青苷含量分别降低了24.2%和28.2%,尤其是盛开期花瓣(真空抽滤15 min)处理后3G型糖苷降低了92.2%,蕾期花瓣 (真空抽滤10 min)处理后3G5G型糖苷降低了54.9 %。由此获得了沉默PsUF3GT和PsUF5GT的适宜体系:以盛开期或者花蕾期带花柄的花朵为材料,抽真空渗透10 ~ 15 min后,置于去离子水中暗培养1 d(8 ℃,湿度60%);之后转移至23 ~ 25 ℃、湿度60%的环境,光照培养3 d后可用于检测和分析。本研究中建立的VIGS体系可有效沉默花瓣中的内源基因,为牡丹基因功能验证及其花色形成的分子机制研究奠定了基础。 相似文献
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西藏光核桃SRAP-PCR反应体系的优化和引物筛选 总被引:1,自引:0,他引:1
以西藏12份光核桃种质为试材,采用正交设计,从dNTPs、Mg2+、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶5种因素5个水平来优化SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了筛选。结果表明:光核桃25μL的SRAP反应体系的最佳组分包括2.5μL 10×buffer,0.35 mmol/L dNTPs,1.5 mmol/L Mg2+,0.4μmol/L引物,20 ng模板DNA和2.5 U Taq DNA聚合酶。各因素对扩增反应结果均有不同影响,其中以dNTPs浓度影响最大,模板DNA的影响最小。应用该体系从40个引物组合中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物组合23个。这一体系的建立及多态性引物组合的筛选为利用SRAP标记技术进行光核桃遗传多样性研究提供了依据。 相似文献
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脐橙果实糖积累与蔗糖代谢相关酶关系的研究 总被引:10,自引:1,他引:10
通过对“罗伯逊”脐橙果实发育过程中糖含量以及蔗糖代谢相关酶———蔗糖合成酶 (SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性的测定 ,结果表明 :SS合成与分解方向的活性变化趋势相似 ,SS分解方向活性在果实的整个发育期的两次回升 ,分别是SPS和SS合成方向的活性上升阶段 ,它通过调节果实内蔗糖浓度来影响果实的库强 ;SPS和SS合成方向分别是花后 15 0d之前和花后 15 0d之后影响果实糖积累的主要酶 ,SS分解方向则是通过调节果实的库强来影响糖积累 相似文献
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冬虫夏草,又名虫草,是青藏高原的特产之一,冬虫夏草(藏语:压扎梗布)是我国医药宝库中的一味珍贵的中药药材,常常把它与人参、鹿茸列为三大补品.虫草一般生长在海拔3000~5000米的高寒草甸地带,主要生长在气候高寒,土壤湿润,且含有机质的高山草甸项部和分水岭两侧的草地及地势较平缓的山坡上.因蝙蝠蛾在幼虫阶段在土壤中需食用植物根系来维持生命,但目前尚不能清楚具体食用的植物种类.为了解与摸清西藏地区冬虫夏草类型及其适生环境下的伴生植被等情况.课题立项于:国家科技支撑计划,课题编号:2007 BAI32B02,课题名称:影响西藏冬虫夏草品质的关键因子研究,课题组在2008年7月2日-8月5日,2009年5月18日-6月3日开展了调研. 相似文献
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脐橙果实发育过程中细胞壁物质及其水解酶活性的变化 总被引:4,自引:0,他引:4
以纽霍尔、罗脐、丰脐为研究材料,进行了定点、定位和定期的观测、取样;首次用NIRS法对甜橙果实生长发育过程中果肉质地组成的WSP、HP、ADF、NDF、SDF、IDF、HC和CEL含量进行了优化建模和定量分析;对影响果肉质地的果胶甲酯酶、多聚半乳糖醛酸酶、β-葡萄糖苷酶的变化进行了研究。结果表明:①用NIRS法定量分析甜橙果实质地主要有8个指标,优化模型交差检验结果基本接近化学分析的精度,能够用于预测脐橙新样品各质地的含量;②3个不同品种脐橙果肉质地组成的动态变化表明,质地组成在数量上化渣的纽霍尔较不易化渣的罗脐和丰脐有更低的CEL而W SP和SDF更高,果实发育过程中纽霍尔W SP和SDF含量的变幅较后二者大;③果实动态变化中,水解酶PE和PG的活性纽霍尔比罗脐和丰脐橙强、变化幅度也大,影响脐橙果肉质地的关键水解酶是PE和PG,β-葡萄糖苷酶是PE和PG作用的补充。 相似文献