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3.
本试验旨在克隆鉴定猪硒蛋白X(Sel X)基因,将其定点突变后进行原核表达,获得重组蛋白,并制备猪Sel X多克隆抗体,为以猪为模型Sel X功能研究奠定基础。利用c DNA末端快速克隆(3'-RACE)技术从猪肝脏总RNA扩增出含开放阅读框(ORF)至poly(A)共1 215 bp的Sel X基因c DNA片段,其348 bp的ORF编码区和对应的氨基酸残基与人相应序列分别有88%和91%序列同源性,猪Sel X基因提交NCBI Gen Bank数据库,序列号为EF113597。ORF编码氨基酸残基中硒代半胱氨酸(Sec)位于C-端第95个残基,其编码密码子TGA经定点突变为半胱氨酸(Cys)的TGT后,将其插入载体p ET30,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,在0.5 mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导2 h获得融合表达产物,经His-tag亲和层析后,获得分子质量为18.0 ku的纯化蛋白。将纯化获得的Sel X基因突变体融合蛋白(Sel Xm)免疫兔子,得到效价高达1∶20 000的多克隆抗体,免疫印迹(Western-blot)结果显示该抗体能特异性识别纯化的Sel Xm和猪肝脏中相应Sel X。本试验成功克隆并鉴定了猪Sel X基因,并制备了其多克隆抗体。 相似文献
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应澳大利亚新南威尔士州乡村消防局的邀请,我们20人受国家林业局森林公安局的指派,于2002年12月6日至21日对澳大利亚进行了为期15天的航空护林专项访问考察。考察团以南京森林公安高等专科学校校党委书记周鸿升为团长,成员分别来自东航中心、西南总站以及部分省区负责航护工作的同志组成。考察期间,全团同志十分珍惜本次难得的学习考察机会,严格按照国家林业局森林公安局领导提出的6条要求,抓紧学习、认真思考。在每一个考察地点,大家认真听取各地的情况介绍,专心作好学习笔记,深入了解澳大利亚林业及森林防火,特别是航空护林工作开展情况。… 相似文献
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缓释复合酸化剂对断奶仔猪消化道酸度及肠道功能的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
本试验选用28 R龄断奶、平均体质量(7.00±0.10)kg的长白猪(♂)×大白猪(♂)二元杂交仔猪64头,按单因索试验设计原则,研究在玉米一豆粕一膨化大豆型基础日粮中添加不同类型(包被未包被)复合酸化剂对断奶仔猪胃肠道酸度、生产性能、肠组织形态、消化酶活性、肠道微生物菌群及肠黏膜抗体SIgA的影响.试验设4个处理,每个处理4个重复,每个重复4头猪(公母各半),饲养试验时间为35 d.结果表明,微胶囊型缓释复合酸化剂可以极显著降低断奶仔猪胃和小肠pH(P<0.01);极显著提高空肠绒毛高度和隐窝深度的比值(P<0.01);断奶前期,显著提高小肠蔗糖酶和乳糖酶活性(P<0.05);断奶后期,极显著提高仔猪盲肠和结肠中乳酸杆菌数量,降低大肠杆菌数量(P<0.01);微胶囊型缓释复合酸化剂还有增加仔猪肠黏膜抗体SIgA分泌量的趋势(P>0.05).结果提示,在断奶仔猪日粮中添加微胶囊型缓释复合酸化剂,可以通过降低肠道pH,优化肠道微生物区系,改善肠组织形态和功能,从而提高断奶仔猪肠道的消化力和适应性,并促进仔猪生长. 相似文献