烟草、苜蓿及甜瓜对甘露糖耐受性比较研究

为了研究烟草、苜蓿及甜瓜对甘露糖耐受性,分别对这3种植物外植体进行了不同梯度的甘露糖的敏感性实验。实验结果表明,烟草和苜蓿对甘露糖不敏感,甜瓜在甘露糖与蔗糖比例达到46∶时显示出甘露糖对其的毒性,当比例达到64∶甜瓜彻底死亡。这一结果也说明并非所有的植物都适于以甘露糖为筛选剂的植物遗传转化。     

新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定

根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌（63／290）的OMP25的基因序列设计引物，用聚合酶链式反应（PcR）技术从新疆绵羊种布鲁氏菌（80／019）基因组DNA中扩增出OMP25基因片段，TtDNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上，将重组质粒转化到受体菌DH10B中，蓝白斑筛选阳性菌落，结果成功克隆OMP25基因片段，进行核苷酸序列测定，测序结果分析表明：新疆绵羊菌株与国际标准菌株有明显差异。     

新疆垦区奶牛乳房炎致病菌的调查

近年来，随着集约化养殖业的不断发展，抗生素预防和治疗水平的提高和中兽医研究的进一步深入，通过中草药的免疫调节和严格的泌乳期和干奶期乳房抗生素预防和乳头药浴，奶牛隐性乳房炎的检出率有所下降。但由于引起奶牛乳房炎的病原较为复杂、病因也很多，受不同地区、不同气候的影响，导致临床性乳房炎的发病率和危害性仍然居高不下，也给乳房炎的防治工作带来了很大的困难。因此，为了能够使奶牛乳房炎的预防和控制工作得到切实有效的解决，此试验一方面通过临床观察和试剂诊断，检测奶牛临床性和隐性乳房炎的发病率，并了解试验奶牛场的群体结构（体形、品系、年龄）、产奶性能、繁殖状况以及奶牛之间的亲代关系等情况。     

布鲁氏菌致病及免疫机制研究进展

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属的细菌引起的人畜共患传染病 ,目前布鲁氏菌属的细菌主要有七个种。随着分子生物学技术的发展 ,对布鲁氏菌的致病机制在分子水平上有了更进一步的理解 :布鲁氏菌自身一些与致病有关的基因使得布鲁氏菌逃避了巨噬细胞的杀伤作用 ,在巨噬细胞内存活和定居。在布鲁氏菌病免疫过程中 ,先天性免疫应答主要通过补体、巨噬细胞、天然杀伤细胞来参与 ,获得性免疫应答中 ,CD4 、CD8 、rδT细胞起很重要的作用。文章围绕这些与致病、免疫有关的基因及参与免疫反应细胞的研究进展进行了探讨 ,可为今后进行布鲁氏菌病预防及开发新型基因工程苗提供理论依据。     

牛奶酸碱度变化在奶牛隐性乳房炎检测中的应用

利用奶牛隐性乳房炎诊断液、光学显微镜以及pH211酸度计测定乳汁的pH值与体细胞的含量,确定奶牛隐性乳房炎与牛乳pH值的变化关系。结果表明,牛奶pH值的变化与体细胞和炎性细胞的含量呈正相关,即泌乳奶牛奶样的正常pH值在6.4～6.6之间;体细胞在20～50万·mL-1区间时,牛奶pH值在6.6～6.8之间;体细胞在50～150万·mL-1区间时,其pH值在6.8～7.0之间;体细胞在150～500万·mL-1区间时,其pH值在7.0～7.2之间;体细胞在大于500万·mL-1时,其pH值在7.2以上。     

布鲁氏菌侵染对类泛素SUMO-1表达的影响及类泛素SUMO-1慢病毒表达载体的构建

研究布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7后类泛素SUMO-1的表达变化,并构建小鼠类泛素SUMO-1基因过表达的慢病毒载体。本试验分别利用布鲁氏菌16M、M5-90侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7,利用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测细胞中类泛素SUMO-1的表达;利用DNA重组技术将类泛素SUMO-1基因片段插入到慢病毒表达载体pLEX-MCS 中,获得重组慢病毒质粒pLEX-SUMO-1,测序鉴定成功后转染293T 细胞,包装好的慢病毒感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,并利用实时荧光定量PCR、Western blotting方法分别检测细胞中类泛素SUMO-1 mRNA及蛋白表达水平。结果表明,布鲁氏菌16M、M5-90侵染细胞后,在感染早期类泛素SUMO-1的表达受到抑制,12 h内呈现下降趋势,在12 h后开始上升,极显著高于正常水平(P < 0.01);测序结果证明,类泛素SUMO-1基因正确插入到pLEX-MCS 质粒中;实时荧光定量PCR方法检测表明,类泛素SUMO-1 mRNA转录水平上调。由此可见,布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7能够引起细胞内类泛素SUMO-1表达的改变;成功构建了类泛素SUMO-1慢病毒过表达载体,为进一步研究类泛素SUMO-1的功能奠定基础。     

塔里木马鹿单核细胞增多性李氏杆菌的分离与鉴定

对马鹿流产胎儿的肝脏中的细菌进行分离和鉴定.用亚碲酸钾培养基分离流产胎儿的肝脏中的细菌,并用生化试验、人工感染试验、PCR和测序方法对分离的细菌进行鉴定.该分离株在生化试验、培养特性、溶血性等方面与单核细胞增多性李氏杆菌特性完全相符,能使接种小鼠在24～96h内100%死亡.测序结果表明,扩增P60基因片段与GenBank中报道的单核细胞增多性李氏杆菌强毒株EGD株P60基因核苷酸的同源性分别为99.1%,推导的氨基酸序列的同源性为99.6%.从塔里木马鹿成功分离的细菌为单核细胞增多性李氏杆菌强毒株.     

赤羽病研究进展

赤羽病是引起牛、羊繁殖障碍的一种重要病毒性疫病,是我国从国外进口牛、羊必须检测的七种疫病之一,对我国养牛业和养羊业危害严重.近年来,人们对该病病原学、流行病学、诊断和免疫预防进行了大量的研究,为该病的科学防控提供了依据.     

SELEX技术及其应用前景

SELEX技术又称指数级富集的配体系统进化技术,其原理是从随机寡核苷酸文库中筛选到能特异性结合靶物质的寡核苷酸配体(称为适配子).由于适配子与靶物质结合的特异性和亲和力可与抗体媲美,SELEX技术已经被广泛应用于生命科学各个领域的研究工作中,显示出良好的应用前景.     

基于重组蛋白SP41的布鲁氏菌间接ELISA检测方法的建立及初步应用

对布鲁氏菌黏附素SP41蛋白进行表达、纯化,以表达重组蛋白为包被抗原,建立了检测布鲁氏菌病绵羊血清抗体的间接ELISA方法。克隆布鲁氏菌SP41基因,PRC、酶切、测序鉴定正确后,构建pET-32a(+)-SP41原核表达载体,转化表达菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达重组SP41蛋白,纯化表达产物后包被酶标反应板,方阵滴定法进行最佳血清稀释度和最侍抗原浓度的筛选,结果显示重组蛋白SP41最佳抗原包被浓度为0.6mg/L,最佳血清稀释度为1:50。交叉试验、阻断试验、重复性试验表明,该方法重复性好、特异性强。利用此方法检测217份绵羊血清样本,结果表明该方法的阳性检出率要高于虎红平板试验和试管凝集试验。