阜新市畜牧业发展的情况及分析

1畜牧业生产方式得到根本改变2011年阜新市新建、整合畜禽标准化养殖小区476个．累计已建成2533个,规模化饲养比重达到70％,阜新市人均生猪、肉羊、肉驴饲养量和牛奶占有量均为全省第一位。实现了“两个提升”和“一个降低”。“两个提升”：一是提升了农民收入水平。随着规模饲养的增加,生产方式发生了根本转变,养殖业经济效益明显提升．全市农民人均畜牧业收入达2700元．同比增长21．1％。二是提升了动物卫生和畜产品安全水平。规模养殖小区做到制度健全,管理规范,在投人品安全、药物残留等方面得到有效控制。“一个降低”：降低了畜禽死亡率,通过规模饲养,推行程序化免疫,有效控制了畜禽疫病发生。     

33．5％海正必绿防治结球生菜软腐病田间药效试验

结球生菜作为出口蔬菜,在我区已有一定的栽培面积,但结球生菜到结球中后期,特别采收后期软腐病发生严重,对产量影响较大。为有效防治此类细菌性病害,筛选安全、高效、低残留的药剂,我们开展了33．5％喹啉铜悬浮剂（海正必绿）防治结球生菜软腐病田间药效试验,现将试验结果总结如下。     

胚胎干细胞分化的重要分子开关:Oct-3/4

POU(Pit-Oct-Unc)域转录因子Oct-3/4已成为小鼠、人、猕猴等哺乳动物体内多能性胚胎干细胞的标志物。在小鼠胚胎发育过程中,Oct-3/4基因只在全能和多能细胞中表达。研究Oct-3/4表达部位及作用机制已成为研究胚胎形成过程及细胞分化过程的必要手段。本文综述了Oct-3/4的表达特性及人、牛、猪、小鼠之间Oct-3/4的结构差异,并详细的描述了其作用机制。     

一种基于Ⅱ型鲤疱疹病毒衣壳蛋白72的免疫学检测方法

Ⅱ型鲤疱疹病毒(cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2)是引起养殖异育银鲫(Carassius auratus gibelio)造血器官坏死症的致病病原。在临床筛查中基于病毒核酸的PCR和real time PCR技术已经建立,但是稳定性更强的免疫学诊断技术国内外尚无报道。本研究目的是利用Cy HV-2编码的ORF72基因(Gen Bank登录号:AFJ20502.1)所编码的衣壳蛋白作为捕获抗原,通过识别感染病毒的鱼体中的相应抗体,从而对样本进行临床免疫学检测。首先采用PCR方法从纯化的Cy HV-2基因组中扩增ORF72基因,并把该基因克隆至原核表达载体PGEX-4T-3,并转化到大肠杆菌中诱导表达,诱导表达的产物通过SDS-PAGE进行鉴定,对表达的重组蛋白进行纯化。用已纯化的72重组蛋白对小鼠进行免疫,制得72重组蛋白的抗体。Western blot检测表明所制备的多克隆抗体既能识别原核表达的重组蛋白,也可以识别Cy HV-2病毒粒子上的衣壳蛋白72。在上述基础上建立了基于Western blot技术的Cy HV-2抗体检测技术:用纯化的72重组蛋白作为检测抗原,鲫鱼血清用作一抗,兔抗鲫Ig M多克隆抗体作为二抗,酶标羊抗兔作为三抗鉴定鲫鱼是否存在Cy HV-2特异性抗体。在对急性感染期的临床样本检测中,本方法能在所有样本中检测出ORF72特异性抗体存在,表明72重组蛋白作为相应抗体捕获原可以用于确诊鲫鱼是否感染Cy HV-2。本研究建立的实验室免疫学检测方法为商品化免疫学检测技术的开发奠定了基础,对Cy HV-2的检验检疫具有一定的临床应用价值。     

山东省农产品流通服务体系研究

建设和完善农产品流通服务体系,是解决“三农问题”的重要途径之一.山东省农产品流通服务体系的建设虽然取得较大进展,但仍在服务体系的基础、主体作用、服务内容等方面存在诸多问题.今后需要在流通服务体系的基础设施、服务模式、管理体制等方面不断改善,以促进农村经济发展.     

钢结构仿古建筑双梁柱中节点的受力机理

为研究钢结构仿古建筑双梁柱中节点的抗震性能,对4个全焊双梁柱中节点进行了水平低周反复加载试验。通过观测试件在侧向力作用下的受力过程和破坏形态,分析双梁柱中节点的受力机理。根据梁截面形式的不同,将其分为箱型截面梁与工字型截面梁2类,依据仿古建筑独特的构造特点,将各试件节点核心区划分为上、中、下3个区域。通过量测各区域内的应变大小,分析该类结构节点核心区在侧向力作用下的受理机理及破坏模式,并建立双梁柱节点的斜压杆受力模型。试验结果表明：仿古建筑双梁柱节点的破坏形式主要为沿下核心区对角线的剪切破坏,并通过理论计算分析提出一种考虑轴压比与梁截面形式的双梁柱中节点抗剪承载力修正公式。     

可拓分析法在猪场环境安全预警中的应用

对猪场环境的安全状况进行有效预警分析,是猪场管理者、环保部门以及其他利益相关者关注的焦点.提出了运用可拓学理论研究猪场环境安全预警的方法,结合层次分析法及基于关联函数的可拓判定方法,建立猪场环境安全预警的可拓物元预警模型,并以某猪场环境为例进行了实证分析,为猪场管理者和相关管理部门提供环境预警方法上的参考.     

Shiva 1a基因在杆状病毒中的表达及其表达产物抑菌活性的检测

根据GenBank上公布的shiva-1a的成熟肽基因序列,人工合成shiva-1a基因并加入6×His标签.将shiva-1a基因克隆到杆状病毒转座载体pBacFast-Dual中,筛选重组质粒,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选得到重组杆状病毒DNA,以脂质体介导法转染Sf-9昆虫细胞,待细胞出现病变后,收集上清液从而获得重组杆状病毒.用此杆状病毒感染的Sf-9细胞,Western blot检测出分子量约5 ku的shiva-1a多肽,与预期结果大小一致.体外抑菌试验证明,表达的shiva-1a多肽对大肠杆菌(DE3菌株)具有抑菌活性.     

奶山羊胎儿成纤维细胞的分离培养及脂质体法转染研究

为获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验采用组织块培养法结合胰蛋白酶消化法分离纯化得到奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),绘制了生长曲线,鉴定了胎儿细胞性别及核型特征,并且研究了脂质体量、质粒量和转染时间对gFFs的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响。结果表明:该培养体系可以支持奶山羊胎儿成纤维细胞的体外生长,其细胞形态为梭形,高度汇合后呈火焰状,增殖特性以及核型特征均为正常,性别鉴定显示该奶山羊胎儿细胞为雌性,符合体细胞转基因克隆的基本要求。24孔板中采用脂质体转染试剂4.0μL、质粒DNA 1.2μg,转染6 h可以获得最佳的转染效果,转染效率达4.21%。