当前畜牧行政执法存在的问题及对策

畜牧兽医行政执法是国家行政机关依法实施行政管理,直接或间接产生法律效果的行为,畜牧兽医行政执法具有国家强制性。具体内容包括畜牧兽医行政处理、行政处罚和行政强制执行。畜牧兽医行政执法的主体有两个部分,一部分是省、市县畜牧兽医行政主管部门;另一部分是动物防疫法律法规授权的动物卫生监督机构。畜牧兽医行政执法活动是由畜牧兽医行政执法主体组织实施的执法活动。     

猪RUVBL2真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

RUVBL2(RuvB-like 2)蛋白是进化上高度保守AAA+(ATPases Associated With Diverse Cellular Activities,AAA)家族成员之一,CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞被广泛地用于表达重组DNA蛋白。为探究猪睾丸组织的RUVBL2基因是否能够在CHO细胞中表达,本实验以猪睾丸组织的cDNA为模板,PCR扩增RUVBL2目的基因,并将其克隆至pIRES2-EGFP(Mammalian Expression Vectors pIRES2-EGFP)载体上,进一步转化到DH5α中,再进行PCR、酶切及测序鉴定;将重组质粒转染到CHO细胞中,再进行荧光、RT-PCR、Western blot检测。结果显示:PCR、酶切及测序都证实了RUVBL2基因正确地插入到了载体质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点;荧光、RT-PCR、Western blot也证实了RUVBL2基因在CHO细胞中的成功表达。本实验成功构建了猪的pIRES2-EGFP-RUVBL2真核表达载体,并证实了猪睾丸组织中的RUVBL2基因能够在CHO细胞中表达。     

7种稻田常用杀虫剂对鲫幼鱼的急性毒性及安全性评价

为探明杀虫剂在稻田使用后对鱼类的毒性效应,以鲫幼鱼为测试生物,测定了5类7种稻田常用杀虫剂对鲫幼鱼的急性毒性。结果表明,吡虫啉对鲫幼鱼的毒性最低,24 h、48 h、72 h、96 h的LC50分别为56.946mg/L、53.655 mg/L、51.151 mg/L、49.604 mg/L,安全浓度为4.960 mg/L;毒性最高的为溴氰菊酯,24 h、48 h、72 h、96 h的LC50分别为0.032 mg/L、0.025 mg/L、0.019 mg/L、0.015 mg/L,安全浓度为0.002 mg/L。根据《化学农药环境安全评价试验准则》,吡虫啉、噻虫嗪和吡蚜酮对鲫幼鱼为低毒,噻嗪酮和三唑磷对试验鱼类为中毒,毒死蜱对其为高毒,溴氰菊酯对其毒性最大,为剧毒。该结果可为杀虫剂在养鱼稻田的合理使用提供科学依据。     

基因组单核苷酸多态性图谱构建方法研究进展

为了获得高质量的金标孕酮单抗，通过采用柠檬酸三钠还原法，制备出符合要求的30 nm胶体金溶液，在此基础上摸索胶体金标记孕酮单克隆抗体的最佳条件，并对其进行质量鉴定。结果发现，用柠檬酸三钠还原法制备的30 nm胶体金溶液呈深红色，透射电镜观察，胶体金颗粒大小基本一致；胶体金标记孕酮单克隆抗体的最低稳定浓度为16 μg/mL，最适稳定浓度为19.2 μg/ mL，最适标记pH为8.5。制备的金标抗体复合物经电镜观察，周围有一层明显的低电子密度晕圈，且其D_{520 nm}值在0.2~0.4之间。     

河南省农村户用沼气池推广使用调查研究

针对近年来河南省部分地区农村户用沼气池推广使用过程中出现的问题,通过问卷调查、与用户和沼气服务队交流访谈等的方式,对河南省濮阳、焦作、济源等地农村户用沼气池推广使用情况进行了实地调查,认为在大力推广沼气池的同时,忽视了对政策制定、管理模式、使用对象、政府监管等方面的研究,提出了一些具有建设性的意见和措施.     

中药“增免散”对免疫抑制鸡免疫功能的影响

将300只1日龄雏鸡随机分成正常对照组、中药“增免散”组、环磷酰胺组、环磷酰胺组 左旋咪唑组、环磷酰胺 “增免散”组,6日龄用鸡新城疫LaSota疫苗免疫点眼滴鼻,14、21、28、35日龄测定鸡血液ND抗体效价、免疫器官指数、细胞免疫功能、红细胞免疫粘附功能等,探索中药“增免散”的免疫增强机理。结果表明:中药“增免散”不但能显著提高Lasota活苗接种雏鸡的特异性HI抗体水平,延长其持续时间,能促进雏鸡免疫器官的生长发育,能显著增高雏鸡外周血T淋巴细胞ANAE阳性率,并对雏鸡红细胞免疫粘附功能具有显著促进作用,而且对环磷酰胺的免疫抑制有部分拮抗作用。     

山羊卵巢颗粒细胞差异表达基因消减文库的建立

为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GSTA1)进行表达水平测定,证实了颗粒细胞2个基因mRNA的表达模式与差异显示的结果相同。表明消减文库构建成功。     

高电压脉冲电场下的牛骨胶原蛋白酶法提取

将高电压脉冲电场（PEF）技术用于牛骨胶原蛋白的提取，通过单因素试验和Box-Behnken中心设计法得出提取牛骨胶原蛋白的最佳工艺参数为：底物质量浓度1.0g/(100mL)、胃蛋白酶添加量3%、pH值2.5、场强21.98kV/cm、脉冲数7，在此条件下，可溶性蛋白质量浓度高达16.21mg/mL，通过紫外光谱鉴定了所提取的样品为纯胶原蛋白而不含其他杂蛋白。     

高繁殖力黄淮山羊大卵泡颗粒细胞上调表达基因的研究

旨在对山羊卵巢有腔卵泡发育中基因表达特点进行研究。本研究应用抑制消减杂交技术(SSH)对黄淮山羊卵泡期卵巢非闭锁大卵泡(6 mm)和小卵泡(4 mm)颗粒细胞内差异表达基因进行了研究,建立了消减cDNA文库,通过斑点杂交分析,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,结果发现,其中有8个与已知功能基因高度相似,12个全新的表达序列标签(EST)。结果显示,这些基因可能影响着山羊卵泡的发育成熟和排卵。     

定时输精对经产母猪繁殖性能及生殖激素的影响

试验旨在建立高效的经产母猪定时输精（timed artificial insemination,TAI）技术,研究了定时输精对经产母猪繁殖性能、断奶-分娩间隔、不同胎次母猪产仔性能及断奶后7 d内血清生殖激素水平的影响。选取309头2~8胎次二元（长×大）经产母猪,随机分为对照组和试验组,对照组母猪进行常规人工授精（artificial insemination,AI）,试验组母猪进行断奶后24 h注射PMSG 1 000 IU,间隔72 h注射GnRH 100 μg,在注射GnRH后24和40 h各输精1次的定时输精技术。通过统计两组母猪的断奶1周内发情率、受胎率、分娩率、窝均产仔数等,判断定时输精对经产母猪繁殖性能的影响;通过对断奶时间和分娩时间的统计,检测定时输精对经产母猪断奶-分娩间隔的影响;用放射免疫（RIA）方法检测2~4胎次母猪断奶1周内血清E₂、LH、FSH和P₄的含量,研究定时输精对母猪生殖激素的影响。结果显示,试验组母猪发情率显著高于对照组（P<0.05）,但两组间受胎率、分娩率差异不显著（P>0.05）,窝均产仔数、窝均合格仔数和繁殖效率有增加的趋势,但差异不显著（P>0.05）;定时输精显著缩短了母猪的断奶-分娩间隔（P<0.05）。在胎次方面,3~4胎母猪使用定时输精的效果较好,其发情率、受胎率和分娩率均显著高于对照组（P<0.05）。在生殖激素方面,试验组E₂水平在注射PMSG后迅速上升,且在定时输精处理后66~96 h内持续高于对照组（P<0.05）,试验组P₄水平在断奶后至配种前显著低于对照组（P<0.05）,但配种后快速升高,并高于对照组;LH和FSH的含量在两组间无显著差异。综上,定时输精可有效提高经产母猪的断奶发情率,并减少其非生产天数,可显著提高3~4胎母猪的繁殖性能。