民猪Y-box结合蛋白基因的克隆、表达以及冷刺激对其表达方式的影响

为了探讨Y-box结合蛋白(YB1)是否参与哺乳动物的冷适应反应,本研究采用RT-PCR和Real-time PCR 的方法克隆测序了民猪YB1基因的序列,检测了该基因在大肠、腿肌、肺脏、脂肪、心脏、脾脏和肝脏组织的表达情况,比较了该基因在冷刺激13 d后常温组((10±2)℃)和冷刺激组((-20±3)℃)个体的骨骼肌组织内的表达变化.结果表明,民猪的YB1基因完整的CDS区长975 bp,编码325个氨基酸,具有1个高度保守的冷休克域,存在多个磷酸化位点,不包含任何跨膜区域,是一种存在于细胞质中的蛋白质.组织表达谱表明YB1基因在所检测的7种组织内均高水平表达.该基因在被冷刺激13 d后,在腿肌内的表达水平出现显著下降(P＜0.05).冷刺激造成了YB1基因转录发生了变化.     

温度和培养介质对细叶杜香种子萌发的影响

本实验研究了温度和培养介质对细叶杜香种子萌发的影响,确定了细叶杜香种子萌发的最适温度和最佳培养介质,为进一步开发利用细叶杜香提供理论依据.     

东亚砂藓类萌发素蛋白基因RjGLP的克隆及表达分析

以东亚砂藓转录组测序获得的类萌发素蛋白基因序列为基础,采用PCR技术克隆得到该基因的cDNA全长序列,命名为RjbZIP。该序列全长为726 bp,包含669 bp的开放阅读框,编码222个氨基酸的蛋白质。生物信息学分析显示,该蛋白的相对分子质量为23 397.9,等电点(pI)为6.82,不稳定系数为14.41,为稳定蛋白。序列预测分析表明,该蛋白疏水性强,具有信号肽序列,是一种胞外基质分泌蛋白。多序列比对分析结果显示,该基因编码的蛋白具有GLPs家族的典型特征。实时荧光定量PCR研究表明,在干旱胁迫处理过程中,东亚砂藓RjGLP基因的表达量高于正常生长的材料(CK),被诱导表达,推测该基因可能参与对干旱胁迫的应答。     

几种东北大豆种子贮藏蛋白的分析

采用SDS-PAGE方法,对23个东北大豆品种的种子贮藏蛋白(包括醇溶蛋白、球蛋白和谷蛋白)进行提取及电泳分析.结果表明:所分析的23个大豆品种,各种贮藏蛋白所含的亚基条带的数量基本一致,但不同品种各种蛋白的亚基带的强弱存在一定的不同.     

干旱胁迫对三种藓类植物生理特性的影响

以东亚砂藓、毛尖紫萼藓和山墙藓3种藓类植物为试材,选取不同的时间梯度,对其进行3个月的硅胶干燥处理,研究了干旱胁迫对3种藓类植物相对水分含量(RWC)、丙二醛(MDA)含量、过氧化物酶(POD)活性、游离脯氨酸(Pro)含量、可溶性蛋白质(SP)含量、可溶性糖(SS)含量等6项生理指标的影响。结果表明:经硅胶干旱胁迫处理的3种藓类,随着相对水分含量的逐渐降低,3种藓类植物体内的丙二醛含量均呈现先降低后升高再下降再升高的趋势;山墙藓POD活性较另外2种藓类低,且变化不明显,而东亚砂藓和毛尖紫萼藓在不同时期POD活性有较大变化;3种藓类的渗透调节物中,游离脯氨酸含量变化与可溶性糖含量变化呈反相关,可溶性蛋白质含量变化与POD活性呈正相关;6种生理指标的变化从一定程度上反映出3种藓类具有不同于其它植物的特殊抗旱生理机制。     

黑龙江省规模化猪场种猪RYRⅠ基因多态性检测分析

猪肉品质一直以来都是种猪培育过程中的一个关键指标。兰尼定Ⅰ型受体基因(RYRⅠ)是一个有效的影响猪肉品质的候选基因,它的第615位氨基酸突变是造成猪发生应激综合症,进而出现PSE肉的主要原因。因此,国内外很多猪场都对该基因进行了清除。为加速优质种猪选育进程,选择了黑龙江省5家规模化猪场,对猪场内后备种猪的RYRⅠ基因进行了基因分型与检测。结果表明:有3家猪场的后备种猪中有nn型个体,但数量非常少;5家猪场内均有杂合型个体,占到所检个体的10%~20%。说明黑龙江省种猪企业对RYR1基因的清除工作还有待加强,猪肉品质提升还有很大空间。     

卵泡抑素基因过表达对其通路上相关基因表达的影响

为了探讨过表达卵泡抑素(follistatin,FST)基因对其通路上相关基因表达量的影响,本研究采用PCR方法扩增了民猪的FST基因,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Dsig-FST,对转染了重组质粒的成纤维细胞进行了鉴定,并采用实时荧光定量PCR检测通路上相关基因表达量的变化。结果表明,本研究成功克隆了民猪的FST基因,并在猪胎儿成纤维细胞中显著过表达,结果导致了ActRⅡB和BMP4基因显著下调 (P<0.05),Smad4和Myostatin基因有下调趋势,ActRⅡA基因有上调趋势。由此可见,FST基因的表达变化对其通路上部分相关基因的表达有不同程度的抑制或促进作用。     

猪黑素皮质素受体-4基因在成纤维细胞中的沉默研究

黑素皮质素受体-4(melanocortin receptor-4,MC4R)、黑素皮质素受体-3(melanocortin receptor-3,MC3R)、瘦素(Leptin)和缩胆囊素受体(cholecystokinin A receptor,CCKAR)基因均是与采食量相关的功能基因,为了研究这4个基因之间可能存在的互作关系,本研究采用RNAi方法,将体外培养的成纤维细胞中的MC4R基因沉默,然后采用Real-time PCR方法对Leptin、MC3R和CCKAR基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,MC4R被沉默后,Leptin、MC3R和CCKAR的表达水平均没有发生显著变化。     

黑龙江省25份大豆品种的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对供试25份大豆品种的过氧化物同工酶（Peroxidase isozyme,简称POD）、酯酶同工酶（Esterase isozyme,简称EST）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,简称SOD）进行分析。结果表明：品种间的POD、EST、SOD同工酶酶谱在酶带数、迁...