口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立

应用免疫学原理与胶体金层析技术，采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验，符合率达100％。试验结果显示，该法与间接血凝法一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，不需要任何仪器，检测时间短，结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。     

进口奶牛牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定

牛传染性鼻气管炎是由牛疱疹病毒1型(BHV1)感染家养牛和野生牛引起的一种急性接触性病毒性传染病。该病具有典型的泛嗜性,能侵袭多种器官和组织,引起多种多样的临床症状,典型症状主要出现在上呼吸道,如化脓性鼻液伴有结膜炎,一般症状有高热、呼吸困难、鼻炎和上呼吸道炎症以及抑郁、厌食、流产和产奶量下降。若病毒感染生殖道,则会导致外阴道炎和龟头皮炎。该病虽死亡率较低,许多感染牛呈亚临床症状(无明显症状)经过,但常处于潜伏感染和长期排毒,在运输、拥挤等应急条件下常导致发病及继发感染。由于其流行范围广,对牛产奶量、繁殖力和役…     

牛传染性鼻气管炎PCR检测方法的建立

根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列设计一对引物,进行PCR检测,并对反应条件及反应体系进行优化。结果得到与预期大小(362bP)一致的特异性片段。最佳退火温度为58～64℃,Mg2 最佳浓度为1.6mM,dNTPS为0.36mM,引物为0.2pmol/uL,聚合酶0.8U/100uL。用这对引物扩增IBRV、HCV、PRRSV、PRV,只有IBRV扩增出特异性条带。该PCR方法的检测灵敏度为2.4ng/100uL,较其他方法敏感。     

猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸的研制

应用酶联免疫原理和胶体金层析技术,采用特殊的生产工艺,在玻璃纤维膜包被胶体金标记PCV-2抗原,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被PCV-2抗原和兔抗PCV-2抗体,制成猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸.当待检样品阳性时,在检测线处形成抗原抗体的免疫复合物而凝聚显色;当待检样品阴性时,检测线处不形成抗原抗体免疫复合物不显色.整个试验过程只需15 min.试纸与ELISA试剂比较,两者都具有微量、特异、准确的优点,且金标试纸独具操作方便、快速和结果直观、容易判定的优点.     

鸡鸭源性成分荧光LAMP检测方法的建立及应用

为快速鉴别牛羊肉中是否掺杂了鸡肉、鸭肉等其他肉类,基于Genie II等温扩增荧光检测系统,建立了检测鸡鸭源性成分的荧光LAMP检测方法。同时,优化了反应体系和条件,进行了特异性和灵敏度试验,以及市场检测应用。结果显示:鸡鸭源性成分荧光LAMP检测方法具有很强的特异性,除了相对应的动物源性成分外,其他13种动物源性成分均呈阴性;该方法检测鸡、鸭源性成分的灵敏度分别为0.88、3.32 pg/μL,均高于普通PCR 10倍;加入双加速引物,该方法的反应时间仅为15~20 min,10 min左右时就可进行实时初判;市场应用检测结果与普通PCR的符合率为100%。结果表明,本方法特异、灵敏,所需时间短,可用于鸡鸭源性成分的市场快速检测。     

秦皇岛市青龙满族自治县在改善生态环境中的探索与实践

河北省秦皇岛青龙满族县是位于燕山山脉东部的山区县,耕地只占总面积的10％,由于地形陡峭、土层很薄,夏季又多暴雨,再加上清朝末年以来森林植被遭到破坏,因此造成比较严重的水土流失,南部山区年侵蚀模数曾为2500t/km^2,制约了经济发展,长期属于贫困 。为此青龙满族自治县政府和群众采取了生物措施和工程措施相结合、调整农牧结构、加强小流域治理等方法,在实际中逐步探索出适合当地条 件的 水土保持的方法,明显改善了生态,有力的促进了经济发展,已于1997年脱贫。     

牛传染性鼻气管炎检测方法的研究进展

牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛传染性鼻气管炎的病原。文中介绍了牛传染性鼻气管炎的各种检测方法的研究进展,包括病理组织学诊断、病毒的分离鉴定、免疫学检测和核酸分子检测,为牛传染性鼻气管炎的检测提供了有价值的参考。     

多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用

为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV 1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:该方法能同时扩增得到2条与试验设计相符的311 bp(I BRV)和392 bp(AKAV)特异性条带;IBRV的灵敏度为0.13 pg/25μL,AKAV的灵敏度为1.04 pg/25μL。本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV和AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。     

“兔病毒性出血症”组织灭活苗的研制和应用

本文报告了“兔病毒性出血症”(俗称兔瘟)组织灭活苗的研制程序、测试结果和应用效果。本苗是用人工感染兔的肝、脾和肾的5%组织匀浆中加入0.25%福马林溶液(最后浓度 V/V),37℃灭活96小时而制成的。本苗的安全性可靠,免疫原性良好。兔肌注射0.5毫升,7天产生免疫力,近期保护率100%,6个月的保护率87.5%。普通冰箱内的保存期半年。在大田等十几个县市预防接种8万余头兔,取得了很好的效果。     

猪圆环病毒2型厦门株-1的ORF2基因序列分析

根据猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列,设计合成1对引物,对PCV2厦门株-1(XM-1)的ORF2基因进行PCR扩增.扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,可清晰看见1条与设计相符的大小为729 bp的特异条带.提取该片段进行测序,并与国内外24株PCV2毒株的ORF2进行比较,发现得到的PCV2 XM-1的ORF2与广西PCV2分离株(AY556475)核苷酸和氨基酸序列同源性均达到100%,与其它PCV2毒株ORF2的同源性分别为91.6%-99.9%和88.9%-100%,表明厦门地区生猪已感染PCV2,PCV2的ORF2基因与其它毒株有所不同.