口蹄疫病毒结构蛋白VP2-3-1基因的克隆及原核表达

根据口蹄疫病毒（FMDV）china99流行毒株基因序列设计特异引物，以阳性质粒pGEM—p1为模板，扩增p1基因。p1片段经Nco1和Xho1酶消化后，得到目的基因VP2—3—1，将其与经相同酶消化的表达载体pProEx—HTb连接并转化BL21（DE3），经PCR、酶切鉴定和序列分析筛选阳性克隆，经IPTG诱导后SDS—PAGE检测，结果表明VP2—3—1基因得到表达；Western blotting结果显示，该表达蛋白能被口蹄疫病毒阳性血清所识别。     

杰威多花黑麦草生产试验总结

杰威多花黑麦草是从美国引进，2005年在我国审定登记的新品种。该品种适宜在长江中下游地区，海拔1800m以下的冬闲地或四边地种植。通过生产试验，得出该品种的干物质和种子产量都显著高于对照组草种（阿伯德多花黑麦草），草质柔嫩，值得大力推广种植。     

李氏杆菌溶血素基因的表达及活性分析

根据LMO溶血素基因hlyA设计引物,PCR扩增hlyA,将扩增产物与pMD18-T连接,重组质粒经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序。将由重组质粒pMD18-hlyA上扩增的缺失信号肽序列的目的片段与表达载体DGEX-4T-1分别酶切连接后,转化BL21细胞。筛选阳性克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析,纯化重组融合蛋白进行溶血试验、小鼠致病力试验和间接ELISA分析。结果表明hlyA基因在大肠杆菌中成功表达分子量82Ku的融合蛋白,能裂解红细胞,且能被LMO阳性血清所识别。一定剂量腹腔注射能将小鼠致死。以此为包被抗原的间接ELISA可以将LMO阴、阳性血清分开。这表明GST-LLO融合蛋白具有良好的生物活性,可用于李氏杆菌病的间接ELISA诊断。     

鹅源新城疫的生物学特性分析

对2株鹅源新城疫病毒从形态、致病力、部分F基因序列分析、动物回归试验以及病死鹅的剖检症状等方面与鸡新城疫病毒进行了比较。结果显示，2株鹅源新城疫病毒与鸡新城疫病毒应该属于同种病毒，而不是一种新病毒，只是毒力更强．且能引起鹅发病。     

青海地区喜马拉雅旱獭弓形虫病的ELISA检测

用弓形虫的重组蛋白GST-SAG1作为ELISA诊断抗原,进行了ELISA诊断方法的建立,并对青海省喜马拉雅旱獭进行了弓形虫病的血清学调查。经对所收集的68份喜马拉雅旱獭血清抗体进行检测,共检出阳性血清15份,阳性率约为22.06%,表明青海省喜马拉雅旱獭中存在弓形虫病的感染。     

蠓虫源盖塔病毒(SZC30)结构基因分子生物学特征分析

为了解云南蠓虫源盖塔病毒（GETV） SZC30株分子特征及其与国内外其他媒介和宿主动物中分离病毒的遗传进化关系,本研究采用5对盖塔病毒特异引物对2013年首次在云南省蠓虫中分离的盖塔病毒SZC30株结构基因进行RT-PCR扩增,并对扩增产物进行测序;采用DNAStar软件中SeqMan进行序列拼接,获得SZC30株病毒结构基因序列长3 762 nt,编码衣壳蛋白（C）、E1、E2、E3和6K蛋白,序列长度分别为804、1 317、1 266、192和183 nt,编码蛋白长度分别为268、438、422、64和61个氨基酸。C、E1和E2基因系统进化分析显示,SZC30株与1955-2018年不同地域、宿主分离的27株盖塔病毒分离株形成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ 4个进化分支;SZC30株与中国、韩国和日本蚊虫和动物分离株位于Ⅲ进化分支内,核苷酸同源性最高,在98.0%以上,氨基酸同源性在98.9%以上,亲缘关系较近;而与马来西亚、俄罗斯等蚊虫分离株位于不同进化分支,核苷酸同源性低于97.6%,亲缘关系较远;与马来西亚蚊虫分离株（GenBank登录号：AF339484）、中国海南和云南蚊虫分离株（GenBank登录号：EU015061和KY434327）在C、E1和E2蛋白存在31个氨基酸差异位点,而与日本蚊虫分离株（GenBank登录号：LC152056）、中国猪分离株（GenBank登录号：MG865966和MG865969）氨基酸位点无差异,且同源性为100%。SZC30株与27株盖塔病毒在E1、E2蛋白上存在2个潜在糖基化位点和3个跨膜区;T细胞抗原表位分析结果显示,SZC30株与分离自蚊、猪、狐、牛和马等的盖塔病毒分离株均存在表位差异,其中,E1、E2蛋白发现较多表位差异。以上结果提示,蠓虫源盖塔病毒与大多数蚊虫和动物分离毒株同源性高、遗传进化关系近,且氨基酸位点、糖基化位点、跨膜区结构等分子特征相似,提示蠓虫可能作为一种潜在的传播媒介参与了当地盖塔病毒的传播扩散。     

四川省部分地区猪传染性胸膜肺炎的流行病学调查

为弄清猪传染性胸膜肺炎在四川省的流行状况,笔者利用猪传染性胸膜肺炎抗体检测正向间接血凝试剂盒对在不同时间采集的、不同地区和不同来源的1062份非免疫猪血清进行了检测。结果不同地区猪群的猪传染性胸膜肺炎抗体阳性率不同,从1%-37%,平均阳性率为18.5%。其中,30日龄以内未断奶仔猪阳性率为1%、30-70日龄保育仔猪阳性率为23%、70-150日龄育肥猪阳性率为27%、后备母猪阳性率为8%、经产母猪阳性率为3%。以上结果表明猪传染性胸膜肺炎在四川省各地都有发生,且发生与猪的日龄、饲养方式有关。     

猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒Ⅱ型混合感染的诊断

2005年11月-12月,山东半岛某规模化养猪场45日龄以内的猪发生疫情,1720多头二元小种猪陆续死亡150多头。经临床症状观察、病理剖检和实验室检测,确诊为猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）和圆环病毒Ⅱ型（Porcine CircovirusⅡ,PCV-Ⅱ）混合感染。     

应用原代细胞繁殖非洲猪瘟病毒的研究进展

非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是影响养猪业发展的最重要疫病之一，其病原体为非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)。由于该病毒基因组庞大，生物学特性复杂，其增殖、分离通常需要使用猪原代细胞并且只能在经授权的生物安全三级以上实验室进行，阻碍了对该病的基础研究及疫苗研发。对ASFV开展深入的生物学特性研究和疫苗研发，原代细胞仍然是不可或缺的工具。因此，对目前已报道可用于ASFV繁殖的原代细胞种类、优缺点，以及研究应用现状进行综述，目的是为从事相关工作的科研人员提供思路和参考。     

非洲猪瘟病毒空气传播途径研究现状

非洲猪瘟（African swine fever,ASF）主要通过直接接触、间接接触、饲喂被病毒污染的食物和吸血昆虫传播，经呼吸道和消化道途径侵入猪体。在临床实践中，非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）通过空气传播的案例已有多个报道，具备空气净化过滤系统的养殖场在抗击ASF疫情时也相对表现得更为优秀。鉴于国内养殖企业对ASFV能否通过空气传播的高度关注，本文就现有国内外相关研究进行综述，以期为我国学界和相关从业人员提供一定的借鉴。