Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立

根据Genebank中I型鸭病毒性肝炎病毒的基因序列,设计合成了2对引物,以山东、江苏、广东、河南等地分离株的RNA为模板进行RT-PCR扩增,均得到预期大小的目的片段,两对引物的检测结果一致。并对其中一种方法的敏感性、特异性进行了检测,结果表明本试验建立的用于I型鸭病毒性肝炎病毒诊断的RT-PCR方法具有较高的敏感性和特异性,最低RNA模板检出量为100pg,只能特异的检测出I型DHV,不能检出NDV、IBDV、DPV和GPV。因此,所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鸭病毒性肝炎病毒的快速鉴别诊断。     

四项球虫抗药性判定指标的准确性评价

从指标各自的特点、评价结果的一致性、其它指标、试验总体结果和发展趋势五个方面，分别对上海地区鸡球虫进行抗药性监测时采用的笼饲试验的4项判定指标进行了评述，认为在当前条件下，用抗球虫指数（ACI）、病变记分减少率（RLS）、相对卵囊产量（ROP）、最适抗球虫活性百分率（POAA）4项指标来综合评定球虫抗药性的方法是有效的、可靠的。比较而言，RPO、RLS的错判率较高，RLS的漏判率较高；POAA错、漏判率的较低，优于ROP、RLS。而ACI错、漏判率均最低，准确性最好。     

上海地区鸡球虫对6种抗球虫药的抗药程度研究

为了解上海地区的鸡球虫抗药性状况,作者采集了上海市9个区县10个鸡场的球虫,进行了对地克珠利（Diclazuril)、氯苯胍（Robenidine)、氯羟吡啶（Clopidol)、氨丙啉（Amprolium)、马杜拉霉素（Maduramicin)、莫能霉素（Monensin)的抗药性研究。试验设6个药物组和感染不用药、不感染不用药2个对照组,以抗球虫指数（ACI）、病变记分减少率（RLS）、相对卵囊产量（ROP）、最适抗球虫活性百分率（POAA）为试验指标,进行综合评定,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性、完全抗药性4个等级。结果显示来自10个鸡场的球虫中,对地克珠利有90％未产生抗药性,对氯苯胍有90％为无抗药性和轻度抗药,对驻杜拉霉素有50％为无抗药性和轻度抗药,对氯羟吡啶有80％达到完全抗药,对氨丙啉有90％达到中度和完全抗药,对莫能霉素则全部达到中度以上的抗药程度,作者认为目前在上海地区以放心地理合理使用地克珠利和氯苯胍,对马杜拉霉素要慎使用,对氯羟吡啶、氨丙啉、莫能霉素须减少或暂停使用。     

柔嫩艾美耳球虫延伸因子1α特性与功能初步分析

鸡球虫病在世界范围内对家禽业具有重大的经济影响，导致高死亡率、低增长、低生产力和高防治成本。由于球虫耐药性问题严峻，球虫病的防治重点倾向于研究方便安全，并且与活疫苗相比更容易生产的亚单位疫苗。因此，迫切需要新的方法来有效地控制球虫病，包括寻找特定的分子靶标。本文以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA第一链为模板，扩增了延伸因子1α（EtEF1α）的ORF序列，生物信息学分析显示，该基因编码450个氨基酸，预测相对分子质量为49.1 ku，等电点为4.7；编码的蛋白无信号肽和跨膜结构域，但都含有N-肉豆蔻酰化位点。qRT-PCR和Western blot分析EtEF1α在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平和蛋白翻译水平，结果显示，EtEF1α在子孢子（Spz）和裂殖子（Mrz）的mRNA转录水平高于未孢子化卵囊（UO）和孢子化卵囊（SO），翻译水平在UO和Mrz高表达；间接免疫定位发现，EtEF1α主要定位于Spz一端和整个Mrz，随着虫体在细胞内发育，荧光强度逐渐增强。分泌试验显示该蛋白为分泌蛋白，但不是由微线体分泌的。入侵抑制试验结果表明，兔抗rEtEF1α多克隆抗体能抑制子孢子入侵DF-1细胞，抑制率约为22%。综上表明，该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育和子孢子入侵宿主细胞的过程。     

鸡堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的免疫学筛选

[目的]寻找鸡球虫保护性抗原基因,为研究基因功能和研制抗鸡球虫疫苗奠定基础.[方法]将纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊于兔皮内多点注射,制备堆型艾美耳球虫抗血清,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其效价,进行免疫学筛选.利用PCR对获得的阳性克隆进行初步鉴定.[结果]间接酶联免疫吸附试验结果表明堆型艾美耳球虫抗血清检测结果呈阳性,初步筛选到的疑似阳性斑经3次复筛后获得6个阳性克隆,1～3号克隆约为1 000bp,4～6号克隆约为1 500 bp.[结论]对堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cD-NA文库获得的阳性克隆成功进行了免疫学筛选.     

寄生虫乳酸脱氢酶研究进展

大多数体内寄生虫的生存必须依赖糖酵解途径将葡萄糖代谢为乳酸以提供能量。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸还原为乳酸及乳酸氧化为丙酮酸的可逆反应,与寄生虫生存密切相关。研究表明,各种寄生虫LDH在理化性质和分子结构方面均有独特的特性,是良好的诊断分子和潜在的药物作用靶标。对寄生虫LDH功能的研究,对于促进寄生虫病诊断、疫苗研究以及新抗虫药物的研发具有重要意义。本文对国内外寄生虫LDH的研究现状进行了综述。     

传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因序列测定及TK蛋白功能初步分析

根据传染性喉气管炎病毒(ILTV)美国632株TK基因序列设计并合成1对引物,以ILTV烟台株DNA为模板扩增了TK基因,并对其进行了序列测定。将ILTV烟台株的TK基因和TK蛋白分别与ILTV美国632株,英国T horne株,B e ijing E 2株,BHV-1,EHV-1,EHV-2,FHV-1,HHV-1,HHV-2,HHV-3,HHV-4,HVT,M DV-1,M DV-2,PRV和SHV-2的TK基因和TK蛋白比较后发现,其TK基因的核苷酸和TK蛋白的氨基酸同源性分别为24.6%~99.5%和15.1%~98.9%,表明不同ILTV毒株之间TK基因和TK蛋白相对保守,但与其他α-疱疹病毒的TK基因和TK蛋白同源性则较低。     

再论农资企业为什么留不住人

<正>农资企业销售人员的频繁流动,已经成为一种较普遍的现象。虽说销售行业一直以来就是"铁打的营盘流水的兵",适当流动对个人和企业都是有帮助的,但频繁的人员离职和辞职应该引起企业的重视和关注,为什么农资营销人选择频繁跳槽?为什么农资企业留不住人?是待遇太低,还是没有良好的发展前景和平台?或者是没有系统的培训和提升空间?     

从荐菜技巧看农资营销

<正>很多厂家业务员拜访客户的时候,都已经习惯从业务包里掏出产品手册,让客户去选择产品,看看是否有合适的产品可以购买。和客户没聊完几句话,就丢下产品手册,告诉客户:有需要电话联系!这样的情况不少。很多客户接待厂家业务员的时候,都已经不愿意谈产品了。生意做了这么多年,该有的产品都有了,生产企业和厂家这么多,每天都要接待好几个厂家的业务员,产品同质化现     

单品牌or多品牌

<正>无论是单品牌还是多品牌经营,都是生产企业和厂家的一种运营模式,唯有农民接受的才是最好的经营模式,唯有农民认可的品牌才是真品牌单品牌经营是指企业生产的若干产品皆使用同一个品牌。多品牌经营是指企业生产的不同产品分别采用不同的品牌,甚至成立不同的销售公司和销售团队进行市场操作。在我们国内农药行业,也出现了单品牌与多品牌经营并