鹅巴氏杆菌和大肠杆菌混合感染的诊治

由大肠杆菌感染引起鹅发病的情况很多,大多病程较长、死亡率较低;但大肠杆菌和巴氏杆菌混合感染后情况则发生变化。2004年2月底江苏某鹅场有4300多只鹅,发生了以精神沉郁、拉稀、呈急性发病死亡为特征的病例。我们根据临床症状,解剖观察病变,采集病料进行实验室诊断,确诊为鹅巴氏杆菌和大肠杆菌混合感染,现将诊断情况报告如下：     

干扰素作为免疫调节剂在肉鸡生产上的应用

本试验选用在一个生产周期的白羽肉鸡,通过对使用和未使用干扰素的2组商品肉鸡对鸡新城疫、禽流感H9抗体影响效果的比较,研究干扰素对商品肉鸡免疫效果的影响,结果表明,疫苗与干扰素先后使用,可提高鸡群平均抗体滴度。     

副猪嗜血杆菌OMP5基因的克隆及生物信息学分析

根据GenBank上公布的副猪嗜血杆菌外膜蛋白OMP5基因的核苷酸序列,设计1对特异性引物,对贵州省HPS分离株OMP5基因进行扩增。结果表明所扩增的OIvIP5基因的长度为1116bp,与SH0165株对应的核苷酸序列和氨基酸同源性均为lOO％。生物信息学分析结果表明,OMP5基因所编码的外膜蛋白P5的理论等电点pl为9．34不稳定系数为20．44,推测其为稳定性蛋白;脂肪指数为83．94,总体平均亲水性为-0．172,推测该蛋白是一种亲水性蛋白;该蛋白含有丰富的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,无跨膜区,最前端的21个N-末端氨基酸残基为信号肽序列并且主要为疏水性氨基酸,最佳切割位点在第21～22个氨基酸之间;结构位点预测表明该蛋白含有多个不同的糖基化和磷酸化位点。     

猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断

为摸清贵州省某猪场猪只发病死亡的原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断、猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该猪场发病猪进行了诊断.试验诊断结果表明:通过流行病学调查、剖检病理和猪繁殖与呼吸综合征抗体快速金标检测卡检测初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,RT-PCR检测核酸确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒野毒感染.     

猪伪狂犬病诊断技术研究进展

猪伪狂犬病是由猪疱疹病毒1型所引起的猪、羊、牛等多种家畜及野生动物的一种以发热、奇痒(猪除外)、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。各种年龄的猪都易感,且流行广泛,严重制约了养猪业的发展。猪伪狂犬病临床上常与猪圆环病毒病、猪繁殖与呼吸综合征以及猪细小病毒病等常见的猪病毒病混合感染,且临床症状较为相似。目前该病的诊断技术主要有临床诊断方法、病原学诊断方法、免疫学诊断方法及分子生物学诊断方法等。近年来随着科学技术的迅猛发展,灵敏度高、特异性强的分子生物学诊断技术越来越受人们重视。本文针对该病最新的诊断技术进行综述,以期为猪伪狂犬病的防治提供参考。     

伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究

根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株（EF552427）的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒 Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-gE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。     

副猪嗜血杆菌OMP5 基因的克隆及生物信息学分析

根据GenBank 上公布的副猪嗜血杆菌外膜蛋白OMP5 基因的核苷酸序列,设计1 对特异性引物,对贵州省HPS 分离株OMP5 基因进行扩增。结果表明所扩增的OMP5 基因的长度为1116 bp,与SH0165 株对应的核苷酸序列和氨基酸同源性均为100%。生物信息学分析结果表明,OMP5 基因所编码的外膜蛋白P5 的理论等电点pI为9.34,不稳定系数为20.44,推测其为稳定性蛋白;脂肪指数为83.94,总体平均亲水性为-0.172,推测该蛋白是一种亲水性蛋白;该蛋白含有丰富的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,无跨膜区,最前端的21 个N-末端氨基酸残基为信号肽序列并且主要为疏水性氨基酸,最佳切割位点在第21～22 个氨基酸之间;结构位点预测表明该蛋白含有多个不同的糖基化和磷酸化位点。     

山东省生物多样性的研究现状与发展趋势

生物多样性是人类赖以生存的物质基础。目前,山东省生物多样性下降的总体趋势尚未得到有效遏制,为进一步加强生物多样性保护工作,有必要对山东省的生物多样性研究的相关情况进行总结,提出未来的研究方向。通过查阅近10年的文献,从遗传多样性、物种多样性和生态系统多样性3个方面总结了山东省生物多样性的研究现状,并指出其存在的问题和发展趋势。     

文明寨油田沉积特征与剩余油分布

文明寨油田位于东濮凹陷中央隆起带北端,是一个受断块控制的复杂油气藏。储层砂体主要为古近系沙河街组,剩余油丰富。对该区块的研究主要集中在剩余油的开发,对沉积相与剩余油分布关系的研究较少。以岩心、测井及录井资料为依据,对文明寨油田的沉积相进行了研究,研究区主要发育水下分流河道、水下分流间湾、河道漫溢、席状砂、河口坝及前三角洲泥等微相类型。运用监测资料分析了沉积微相与剩余油分布的关系,并对不同微相砂体剩余油的开发提出了针对性的建议。     

印度南瓜延伸因子基因CmEF1a的克隆与分析

真核生物延伸因子(EF1a)是一种重要的内参基因,广泛应用于RT-qPCR中。为获得印度南瓜EF1a基因,开发合适的荧光定量PCR引物,本研究通过转录组测序和RT-PCR方法获得了1条长度为1 701 bp的cDNA,命名为CmEF1a,GeneBank登录号:MH310443。结果表明,CmEF1a包含1个ORF,大小为1 344 bp,编码447个氨基酸,理论分子大小约为49.30 kD, 蛋白质等电点为9.14。Wolf Psort分析发现, CmEF1a蛋白亚细胞定位于细胞质基质中;Motif Scan分析显示, CmEF1a蛋白质的氨基酸序列2~432位和322~430位分别为EF1结构域和EF1的C端保守结构域。同源性分析表明, CmEF1a基因编码的蛋白质与同为葫芦科的中国南瓜、甜瓜和黄瓜同源蛋白的相似性达到99%,具有高度的保守性。在此基础上设计了1对RT-qPCR引物, 该引物具有较高的特异性和扩增效率, 在印度南瓜不同组织和不同胁迫处理下均能稳定表达, 适合作为内参基因应用于印度南瓜基因表达研究。本研究结果为印度南瓜重要功能基因的表达分析及相关分子调控机制的研究奠定了一定的理论基础。