伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究 |
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引用本文: | 郝飞,汤德元,李春燕,曾智勇,罗险峰,甘振磊,刘建,王洪光.伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究[J].猪业科学,2013(9):92-94. |
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作者姓名: | 郝飞 汤德元 李春燕 曾智勇 罗险峰 甘振磊 刘建 王洪光 |
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作者单位: | 1. 贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳,550025 2. 贵州省动物疫病预防控制中心,贵州 贵阳,550008 |
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基金项目: | 贵州省科学技术基金项目资助(黔科合J 字[2013]2110 号);贵州省2011 年农业攻关项目资助[黔科合NY 字(2011)3103 号];贵州省2010 年农业科技攻关项目(黔科合NY 字[2010]3042 号) |
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摘 要: | 根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株(EF552427)的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒 Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-gE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒 gE基因 原核表达 免疫原性 |
收稿时间: | 6/9/2013 12:00:00 AM |
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