牛GM-CSF与金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB共表达质粒的构建与原核表达

采用PCR方法对牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和金黄色葡萄球菌FnBPB的D区进行特异性的扩增,并通过重叠延伸PCR扩增GM-CSF-FnBPB串联基因,构建了克隆质粒pMD19-GM-CSF-FnBPB。利用表达载体pET-32a(+)对该融合基因片段进行原核表达,SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导浓度下,在39ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明,该蛋白具有反应原性,进而证明该融合基因成功在原核细胞中表达。     

A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展

A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁.研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视.A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期...     

一例犬皮下气肿的诊治

随着宠物饲养数量的增多,犬皮下气肿逐渐成为小动物临床的一种常见病.其原因复杂,常见于食道、胃或气管、肺等损伤,皮肤伤口、手术切口感染等.患处皮肤肿胀,因发病原因各异而出现不同的临床表现,轻微者无明显不适,严重者会出现饮食欲下降,精神不振,甚至致死.皮肤疏松部位的气肿如不及时治疗,易向周边扩散,甚至蔓延至全身.论文报告了...     

IFN-γ对妊娠早期大鼠下丘脑中IL-18表达的影响

为探讨y干扰素(IFN-y)对妊娠早期大鼠下丘脑中白细胞介素-18(IL-18)表达及其对妊娠结局的影响,将妊娠9d的SD大鼠随机分为对照组、试验1组和试验2组,采用生殖道肌肉注射的方法,对照组大鼠生殖道肌肉注射生理盐水,试验组大鼠注射IFN-y,其中1 组剂量为2.5×104 U/只,2组剂量为7.5×104 U/只...     

非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达

为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6%～99.2%和97.9%～99.4%之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2%～93.6%和96.4%～97.5%之间;在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku,主要以包涵体的形式存在;用western blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。     

甘肃省苜蓿害虫种类调查

调查记录了甘肃省各地苜蓿害虫,鳞翅目Lepidoptera 83种,鞘翅目Coleoptera 56种,半翅目Hemiptera 20种,同翅目Homoptera 10种,直翅目Orthoptera 9种,缨翅目Thysanoptera 4种,膜翅目Hymenoptera 2种,共计7个目,42个科,184种。分别介绍了这些害虫的中文名称、学名与主要分布区域。     

牛轮状病毒TaqMan实时荧光RT-PCR 快速检测方法的建立

本研究按照牛轮状病毒(BRV)结构蛋白VP6基因序列,设计合成引物和探针,经各反应条件的优化,建立了BRV TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术。对BRV进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,TaqMan实时荧光RT-PCR最低可检测到100个拷贝病毒RNA;与牛病毒性腹泻病毒(BVD)、猪瘟病毒(CSFV)、牛结核杆菌(MB)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)不发生交叉反应;所制作的标准曲线在10²~10⁹拷贝/μL浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.997;与常规的RT-PCR相比,该方法具有快速、特异、敏感、重复性好、可同时检测大量样品等优点。可对样品中微量BRV进行准确检测,对BRV的诊断有重要意义。     

含水量和添加剂对沙打旺青贮质量的影响

为了评价沙打旺原料的物料特性,探寻有效改善其青贮饲料发酵品质的措施。试验将原料分为新鲜和晾晒2组,分别设置清水对照(CK)、添加甲酸(6mL/kg)、添加蔗糖(2%)调制处理。室温下用袋贮方式贮藏360d。经分析表明,沙打旺青贮时,晾晒使水分从80%左右降至70%,极显著提高了青贮饲料的pH值(P<0.01),降低了乳酸和氨态氮含量(P<0.01)。与对照组相比,添加甲酸和蔗糖极显著降低了青贮饲料的pH值和氨态氮含量(P<0.01),显著提高了乳酸含量(P<0.05);蔗糖还明显提高了乙酸、丙酸及硝酸盐含量(P<0.05)。晾晒和添加剂对原料干物质含量及保存率无明显影响,但青贮使沙打旺中硝酸盐含量下降70%～77%,亚硝酸盐含量亦显著下降。     

挖沙废弃地草本能源植物生物质品质对氮肥的响应

在京郊挖沙废弃地上开展了柳枝稷、荻和芦竹的生物质品质氮肥效应研究,结果表明:施用氮肥对柳枝稷的纤维素、半纤维素、木质素含量影响均不显著;对荻和芦竹的纤维素、木质素含量影响不显著,但对二者的半纤维素含量影响显著;适量施用氮肥对柳枝稷、荻和芦竹的生物质产量、纤维素和半纤维素产量、纤维素类物质含量和产量均具有明显的促进作用.在边际土地上,可以通过施用适量氮肥对草本能源植物的生物质品质进行一定的调控.     

应用正交设计优化江南牡丹RAPD-PCR反应体系

以牡丹品种"云芳"基因组DNA为模板,采用正交实验设计L25(55)对影响牡丹RAPD-PCR反应的5因素(模板DNA、引物、Mg2+、dNTPs、Taq酶)在5个水平上进行优化试验。结果表明:最佳的RAPD-PCR的反应体系为:20μL体系中含有25 ng的模板DNA,0.2μmol/L的引物,Mg2+1.0 mmol/L,1×buffer反应缓冲液,DNTPs各为0.2 mmol/L,1.0 U的TaqDNA聚合酶。