大连沿海虾夷扇贝养殖群体遗传结构的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,从5种同工酶和1种非酶蛋白中共检测到8个多态位点和25个等位基因,以此分析了大连沿海4个海区虾夷扇贝Patinopecten yessoensis养殖群体的遗传结构。结果表明,各养殖群体间基因频率分布差异大,相互间存在较大的遗传距离;基因型分布严重偏离Hardy—Weinberg平衡;群体内存在一定程度的近交。     

恩诺沙星完全抗原的制备及免疫抗体的检测

恩诺沙星（ENR）是动物专用的氟喹诺酮（FQs）类药物,主要用于治疗畜禽细菌性疾病和支原体感染。ENR进入畜禽机体后,在动物体内消除缓慢,半衰期长。自20世纪80年代以来,越来越多的试验结果证实动物或人类对FQs类药物可产生耐药性。我国对ENR的残留限量做了规定,要求动物肌肉中的残留量不得超过100ng／kg。因此,通过有效的技术手段对动物组织中的药物残留量进行检测是非常必要的。对ENR建立免疫学检测方法已有报道,但关于不同条件下合成完全抗原及其对抗体影响的报道很少。试验采用不同方法和条件耦联半抗原并对抗体进行筛选,进而对后续单抗的制备和检测方法的建立提供最佳条件。     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及ciELISA试剂盒的研制

【目的】研制快速、灵敏、特异的恩诺沙星残留检测ciELISA试剂盒(ENR-Kit),为动物源性食品中恩诺沙星(ENR)残留的快速免疫学检测奠定基础。【方法】通过细胞融合技术制备恩诺沙星单克隆抗体(ENR mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法生产ENR单抗,应用ENR mAb研制ENR残留间接竞争ELISA(ciELISA)快速检测试剂盒,并对其灵敏度、半数抑制浓度(IC50)、特异性、准确度和基质效应性进行检测。【结果】筛选出2株杂交瘤细胞,其单抗亚类均为IgG1亚型。4G1-B3杂交瘤细胞株的ENR mAb间接ELISA效价为1∶1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/moL。ENR-Kit的线性检测范围为0.05~48.75μg/L,灵敏度0.05μg/L,半数抑制浓度(IC50)为1.31μg/L,与环丙沙星的交叉反应率(CR)为0.02%,与其他化合物的交叉反应率(CR)均<0.01%。ENR-Kit对牛奶样、鱼肉样和鸡肉样中ENR的平均添加回收率分别为96.49%,86.95%和84.13%,平均变异系数均<10%,不同基质对ENR-Kit检测结果影响小。【结论】研制的ENR-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合ENR残留快速检测的推广应用。     

巯基乙醇在家蝇幼虫血淋巴中适宜添加量研究

[目的]为家蝇幼虫血淋巴抗菌活性物质的分离、纯化提供依据。[方法]以大肠杆菌为指示菌,利用琼脂糖孔穴扩散法研究巯基乙醇对家蝇幼虫血淋巴抑菌活性的影响,确定巯基乙醇作为抗氧化剂在家蝇幼虫血淋巴中的适宜添加量。[结果]巯基乙醇能抑制大肠杆菌的生长,抑菌效果随其浓度的增加更为明显。当巯基乙醇体积浓度≤10-6时,其对大肠杆菌无抑菌效果,说明巯基乙醇的最大非抑菌体积浓度为10-6。体积浓度为10-6的巯基乙醇可有效保护浓度小于或等于1∶5的家蝇幼虫血淋巴悬液不被氧化,且其对大肠杆菌的抑菌效果不受影响。[结论]巯基乙醇在家蝇幼虫血淋巴中的适宜加入量应根据试验中具体情况确定。     

影响硬颗粒饲料水分含量的因素及水分在线控制技术研究

硬颗粒饲料生产过程中水分含量难以稳定控制是困扰饲料行业多年的难题。文章综述了饲料生产过程中粉碎、调质、制粒和冷却等工艺对硬颗粒饲料产品水分含量的影响,并简要介绍了饲料生产过程中水分在线控制技术的应用研究。     

核酸适配体比色法在抗生素残留快速检测中的应用

传统的抗生素残留快速检测方法主要是以抗体为核心试剂的免疫学方法,免疫学检测方法灵敏度好、操作简单快速.但是,抗体的获得需要多次免疫动物或(和)细胞培养,制备周期一般比较长,实验成本相对也较高.另外,抗体长期储存可能会影响效价.核酸适配体是从随机序列中筛选出来的一段单链寡聚核酸,适配体与靶分子之间的分子识别与抗体极为相似,但适配体比抗体具有更高的特异性,在常温下较稳定,不像抗体那样随着温度的变化容易降解.本文对基于核酸适配体的胶体金比色法在抗生素残留快速检测中的应用做一介绍.     

板蓝根对人工感染鸡大肠杆菌病的疗效观察

试验以鸡大肠杆菌为研究对象,通过试管二倍稀释法和平皿法相结合,测定了板蓝根的最小抑菌浓度为1∶4;通过人工感染鸡大肠杆菌病后以板蓝根来治疗,结果1∶4浓度可以起到90%以上的保护。结果表明:板蓝根可以有效的治疗鸡大肠杆菌病。     

中药丹参对人工感染鸡大肠杆菌病的疗效观察

鸡大肠杆菌病是由埃希大肠杆菌引起的一种常见细菌性传染病,主要发生在雏鸡和成年产蛋鸡开产阶段,其防治手段主要是使用抗生素。但耐药性问题使其疗效每况愈下,另外畜产品无公害化生产的要求,使抗生素的选择范围越来越小。而中药的疗效受菌株耐药性的影响较小,且毒副作用小,几乎无残留,所以研究中药防治鸡大肠杆菌病有现实意义。丹参为唇形科植物丹参的干燥根及根茎,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效,丹参抑制金黄色葡萄球菌的报道较多,对大肠杆菌抑制作用的报道较少。试验研究了丹参对大肠杆菌的抗菌效果,现将试验过程及结果报道如…     

伪狂犬病病毒Fa株gE基因在大肠杆菌中的表达及gE-ELISA鉴别诊断方法的建立

试验以pPGEDNA为模板，用1对分别含有EcoR I和BamH I酶切位点的伪狂犬病病毒gE基因特异性引物，扩增出约1．7kb的含完整gE基因的DNA片段；目的片段经EcoR I和BamH I双酶切后，插入原核表达载体pBV220得到重组表达质粒pBVgE，并转化大肠杆菌DH5a；对温敏诱导表达所获产物进行SDS—PAGE、Western—Blot和琼脂双扩散检测。结果表明，gE糖蛋白得到了高效表达，表达产物约占总蛋白的17％。为了鉴别伪狂犬病疫苗免疫猪和自然感染猪，用表达纯化的gE蛋白为抗原，建立了GE—ELISA方法。选定的反应条件包括GE抗原包被浓度为6.6mg／L，血清最适稀释度为1：40。测试结果：与PRV、HCV、PRRSV、JEV、SA215阳性血清呈阴性反应，而与PRV标准阳性血清呈阳性反应。这一结果表明该法特异性强、敏感性高、重复性好，可用于猪伪狂犬病的临床诊断，尤其疫苗免疫猪和自然感染猪的鉴别。     

温和性猪瘟的诊断和防治

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种高度接触性传染病。猪是该病的唯一自然宿主，主要特征为急性经过，高热稽留，死亡率高，以及小血管壁变性引起的广泛出血，梗塞和坏死病变。猪瘟病毒野毒株毒力有差异，强毒株引起死亡率高的急性猪瘟，而温和毒株一般产生亚急性或慢性感染，临床症状较轻。从有关报道来看，猪瘟疫情在我国大范围内已基本被控制，成年猪已经很少发病，但是已免疫过的猪群，尤其是初生仔猪仍有此病发生，而且死亡率较高。郑州郊区某猪场，出现仔猪死亡病例，经诊断为温和性猪瘟引起的死亡。１发病情况及剖检变化养殖场介绍，仔…