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为了研究体外培养仔猪胰腺细胞的适宜条件,试验选取1日龄的仔猪胰腺组织置于冰上清洗、修剪,对消化酶、离心方式、培养皿铺被方式、培养液及添加不同促生长因子等多种因素进行筛选和优化。结果表明:0.25%胰酶消化所获得的细胞强于0.1%胶原酶消化获得的细胞,细胞清亮,易于生长;采用500 r/min离心5 min、多次离心所获得的细胞较Percoll不连续密度梯度离心和5%BSA等密度梯度离心所获得的细胞贴壁率高,生长能力强,易于培养传代;采用0.1%明胶或20μg/mL的层黏连蛋白铺被培养皿均比无铺被的培养皿获得更多的贴壁细胞;以RPMI 1640、M199、F12、L-DMEM多种培养液培养仔猪胰腺细胞,表现出多种细胞形态和生长趋势;在基础培养液中添加上皮生长因子、角质化生长因子、β-巯基乙醇和白血病细胞抑制因子、转铁蛋白与亚硒酸盐混合试剂等促干细胞增殖因子可促进不同形态细胞的增殖。说明按此方式培养可获得大量、多种细胞形态的仔猪胰腺祖/干细胞。 相似文献
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兔胰腺干/祖细胞的分离培养和鉴定 总被引:3,自引:1,他引:3
采取1~9日龄的实验仔兔胰腺,1 mg/mLⅣ型胶原酶消化,低糖DMEM培养.细胞铺满后进行传代20代以上冻存.对2~3代的细胞进行免疫组化染色,诱导向β细胞分化并进行高糖刺激胰岛素分泌.结果表明,兔的胰腺干/祖细胞具有较强的增殖能力;免疫组化染色表现为PDX-1、CK19、nestin和胰高血糖素阳性;分化诱导2 d后,双硫腙染色(DTZ)20%阳性,6 d后迅速增加到80%;高糖刺激诱导细胞具有胰岛素释放能力.通过免疫组化染色和诱导细胞胰岛素分泌实验证明分离的是兔胰腺干/祖细胞.首次报道兔胰腺干/祖细胞分离培养方法. 相似文献
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本文有用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对本区8个新品种小麦不同时期的根、茎、叶进行过氧化物酶同工酶分析。结果表明:同一时期不同品种、同一器官的过氧化物酶酶谱均有差异。通过对8个新品种小麦抗病、抗倒伏等性状以及产量的调查分析,认为过氧化物酶(pox)同工酶与小麦对锈病抗性有密切关系,并在一定程度上对小麦产量有影响。 相似文献
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通过将金银花内生真菌发酵液饲喂注射嗜水气单胞菌的鲤鱼,研究金银花内生真菌对鲤鱼肠道菌群的影响.通过分离培养健康空白组、攻毒组和内生真菌组的鲤鱼后肠细菌、革兰染色和显微镜观察,表明:对鲤鱼注射嗜水气单胞菌后,其后肠优势菌群发生了改变.空白组的优势菌为G+短杆菌(JYK-1)和G+球菌(JYK-2);攻毒组的优势菌为Gˉ长杆菌(JYG-1和JYG-2).对注射嗜水气单胞菌的鲤鱼饲喂含金银花内生真菌发酵液的饲料后,其优势菌为G+短杆菌(JYN-1)和G+球菌(JYN-2),并且JYN-1和JYK-1的形态和染色特征相同,JYK-2和JYN-2的形态和染色特征相同.研究表明:给攻毒后的鲤鱼饲喂金银花内生真菌可以调节其肠道菌群,使致病菌降低,有益菌增加.说明饲喂金银花内生真菌后肠道优势菌JYN-1和JYN-2可以作为潜在的益生菌进行下一步的研究. 相似文献
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利用从小麦茎叶组织中分离的内生真菌,进行平板对峙试验,从中筛选出2株对禾谷丝核菌有明显抑制效果的菌株(RF5和RF6)。采用改良的真菌基因组DNA提取方法,提取内生真菌RF5和RF6的基因组DNA,运用ITS序列通用引物(ITS4、ITS5)进行扩增,分别得到约600 bp的特异条带。对PCR产物进行测序,根据序列比对分析结果,将拮抗真菌RF5和RF6分别鉴定为:肉座菌(Hypoc-reales sp.)和杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。进一步研究这2株拮抗真菌的抗菌活性大小,结果显示,2株真菌对病原菌都能产生明显的抑菌圈,抑菌圈直径分别为23 mm和19 mm;其液体发酵产物对病原菌的生长也有显著抑制作用,抑制率分别为63.3%和60.8%。 相似文献
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研究药用植物蒲公英内生真菌PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制作用。蒲公英内生真菌PG23通过培养,乙醇沉淀获得粗多糖、苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用MTT法测定PG23多糖对肺癌A549细胞的抑制率,并计算半抑制浓度(IC50)。结果表明,PG23发酵液中多糖得率为2.754%,多糖含量为26.82%;对A549肺癌细胞的抑制率以第1天为最高;抑制率不与多糖浓度成比例,最佳作用浓度为14.42μg/mL,抑制率为87.63%(P<0.01),IC50为1.073mg/mL(24h)。PG23发酵液多糖对肺癌A549细胞具有较强的抑制能力。 相似文献
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将抗病性中草药专利制成绿色饲料添加剂,添加到肉鸡饲料中制成颗粒饲料。将300只科宝500肉鸡随机分成5组,I组为对照组饲喂基础日粮,Ⅱ组为阳性对照组,饲喂基础日粮+120 mg/kg黄霉素,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组分别在基础日粮中加入0.2、1.0和5.0g/kg中草药粉,全程饲喂42d后,结果表明:以不同比例的中草药添加剂饲喂科宝500肉鸡,可提高成活率和增质量,降低料重比。其中,以1.0 g/kg添加量的效果较好。可提高成活率3.34%,增加体质量13.6%以上(P0.05)、增加骨骼(胫骨)生长8.1%(P0.05)。综合考虑,以1.0g/kg添加剂量对肉鸡生产性能的促进作用最佳。 相似文献