环丙沙星完全抗原的制备和间接竞争ELISA检测方法的初步研究

为了研究检测环丙沙星(CIP)残留的间接竞争ELISA方法,试验采用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)一步法将环丙沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫原(CIP-BSA)和包被原(CIP-OVA),用免疫原免疫Balb/c小鼠制备血清多克隆抗体(CIP pAb...     

培氟沙星阻断ELISA检测方法的建立

为了建立牛奶样品中培氟沙星的阻断ELISA检测方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成了培氟沙星的完全抗原。免疫BALB/c小鼠,制备了血清抗体,并对其血清抗体效价、半数抑制浓度、特异性、牛奶样品的添加回收率等进行了测定。结果:血清抗体的效价为1∶25 600,阻断ELISA的线性检测范围为1.79～100 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为10.12 ng/mL,抗体与其他抗生素的交叉反应率小于0.1%,牛奶样品的平均添加回收率大于85%。     

液相色谱-原子荧光光谱联用(HPLC-HG-AFS)技术对饲料及富硒酵母中硒形态的分析

实验采用液相色谱-原子荧光联用技术对饲料及富硒酵母中硒形态进行了分析。优化了色谱分离条件及原子荧光光谱检测参数。在实验条件下,有机硒的色谱分离条件:以C18色谱柱为分离柱,0.1%乙酸溶液和甲醇作为流动相。硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的最佳分离梯度洗脱条件:在时间梯度为0、3、5、15 min时,甲醇洗脱液的浓度梯度为5%、0.5%、15%、5%;原子荧光光谱检测条件:负高压300 V;灯电流80 mA;原子化器高度8 mm;载气流量400 ml/min;屏蔽气流量900 ml/min;读数时间12.0 s;延迟时间1.0 s。以此条件对收集的肉鸡饲料样品及富硒酵母进行检测,结果表明在肉鸡饲料中所含的硒均以无机硒形态存在,且90%以上都是以亚硒酸盐的形式存在;富硒酵母中Se(Ⅳ)、Se(Ⅵ)、Se-Cys以及Se-Met含量分别占样品总硒含量的2.6%、14.6%、31.1%和51.7%,方法平均回收率为70%~86.5%。     

提高《动物解剖与组织学》教学质量的研究

为了提高《动物解剖与组织学》的教学质量，笔者从启发式教学，加强实验课的学习，改革考核方法，以及充分利用多媒体课件等方面．进行了概述和总结。     

家蝇幼虫血淋巴对鸡免疫器官发育和免疫球蛋白IgA含量的影响

向15日龄的雏鸡饲料中添加0.024g·只-1·日-1的家蝇幼虫血淋巴冻干粉,连续饲喂至49日龄,试验期间每周随机抽样8只,称重,采血,解剖取法氏囊、脾脏和胸腺,测定免疫器官指数和免疫球蛋白IgA含量。试验结果显示:添加家蝇幼虫血淋巴的试验组与对照组相比,试验期内体重和脾脏的变化差异不明显,法氏囊和胸腺前期差异不显著而后期差异显著,免疫球蛋白IgA能够维持较高水平。所以,家蝇幼虫血淋巴能显著增强鸡体的免疫力。     

恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性

将恩诺沙星(ENR)偶联于载体蛋白BSA,形成完全抗原(BSA-ENR)并免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术制备分泌抗恩诺沙星的杂交瘤细胞株,用体内诱生腹水法生产ENR单克隆抗体。结果筛选出4G1-B3,4G1-G1和4G1-B9 3株敏感特异的杂交瘤。3株单抗对ENR的半数抑制浓度(IC50)分别为1.04 ng/mL,2.44 ng/mL,4.24 ng/mL。4G1-B3与环丙沙星有0.02%的交叉反应,与其他竞争物的交叉反应率均小于0.01%;4G1-G1和4G1-B9与其他竞争物的交叉反应率均小于0.01%。     

抗恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及竞争ELISA试剂盒的研制

利用合成的完全抗原(BSA-ENR)免疫小鼠,通过细胞融合技术和间接竞争ELISA筛选出了能分泌恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制恩诺沙星残留检测的竞争ELISA试剂盒(competitive ELISA ENR-Kit),并测定其性能。结果表明:筛选出的2株杂交瘤细胞,单抗亚类均为IgG1型,其中4G1-B3株的ENR mAb间接ELISA效价为1:1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/mol;竞争ELISA试剂盒的线性检测范围为0.05~101.6μg/L、灵敏度0.05μg/L、半数抑制浓度(IC50)1.1μg/L,与其他化合物的交叉反应率(CR%)均小于0.01%,鸡肉样、鸡肝样、鱼肉样和牛奶样的平均添加回收率分别为81.5%8、7.6%、84.3%和95%,不同基质添加恩诺沙星标准品做竞争ELISA对ENR-Kit检测结果影响小,试剂盒保存期6个月以上。结果说明该竞争ELISA试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适用于ENR残留的快速检测。     

鸡大肠杆菌自家苗的制备

随着养鸡业的迅速发展与高度集约化饲养,大肠杆菌病已成为鸡群重要的疾病之一[1]。鸡大肠杆菌病的致病血清型很多,并且大肠杆菌易产生耐药性,用药物控制该病不但效果不好,且会造成药物残留,影响食品安全[2]。鉴于大肠杆菌血清型复杂,各场发病的血清型不尽相同,所以,当今国内外尚未有适宜各地鸡场有效的统一菌苗[3]。据此,作者对一家污染严重的鸡场进行了大肠杆菌分离鉴定与自家苗的制备。1细菌分离与鉴定[4]1.1分离培养从患肝周炎、心包炎、卵黄性腹膜炎的病鸡体内采集心血、肝组织、输卵管等病料接种于普通营养琼脂培养基,24h后在培养基上…     

改性蒙脱石对黄曲霉毒素B_1和玉米赤霉烯酮的吸附研究

本试验旨在探究4种不同改性蒙脱石对黄曲霉B1(AFB1)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的体外吸附性能。采用体外吸附试验,在霉菌毒素污染的喷浆玉米皮中添加4种改性蒙脱石,检测AFB1和ZEN的浓度变化,以探究不同种类及不同添加比例改性蒙脱石对AFB1和ZEN的吸附作用。结果表明:4种改性蒙脱石对AFB1和ZEN均有显著吸附作用,其中膨润土经十八烷基三甲基氯化铵改性制备的复合改性蒙脱石II型对AFB1和ZEN的吸附效果最好,在添加量为1%时,对AFB1和ZEN的吸附率分别为62.60%和43.38%。在本体外试验条件下,4种改性蒙脱石对喷浆玉米皮中AFB1和ZEN均具有吸附作用,可以降低喷浆玉米皮中的霉菌毒素含量,为改性蒙脱石在饲料脱毒剂的使用提供参考。     

黄芩抗鸡大肠杆菌作用的研究

通过体外试验和体内试验两种方法研究了黄芩抗鸡大肠杆菌的作用。结果表明，黄芩水煎液对鸡大肠杆菌的最小体外抑菌浓度为2．5g／mL；当药物浓度为5g／mL时可使7日龄雏鸡获得90％以上的攻毒保护；药物浓度为10g／mL时可使100％雏鸡获得攻毒保护，说明黄芩可以对抗鸡大肠杆菌，用于防治鸡的大肠杆菌病。