归芪益母汤耐缺氧及抗氧化作用

归芪益母汤经水提醇沉制成注射液 ,给小鼠经腹腔注射给药 ,进行常压缺氧、减压缺氧、化学法缺氧和抗氧化试验 ,探讨了归芪益母汤对小鼠耐缺氧和抗氧化能力的影响。结果表明 ,归芪益母汤注射液显著延长了缺氧小鼠的存活时间 (P<0 .0 1 ) ,其中常压缺氧存活时间延长 1 1 0 .2 1 %,减压缺氧存活时间延长 76 .4 8%,化学法缺氧存活时间延长2 4 0 .87%,提示归芪益母汤能够提高小鼠的耐缺氧能力。抗氧化方面 ,体内试验表明 ,其能显著降低小鼠因急性缺氧再暴露所引起的 MDA的产生 (P<0 .0 1 ) ;体外试验表明 ,能拮抗 H2 O2 诱导的溶血 ,抑制超氧离子 (O- 2 )生成     

疲劳小鼠骨骼肌中差异表达基因的筛选和鉴定

选用 30只普通级 BAL B/ c雄性小鼠为试验对象 ,随机分成对照组、浸水组和游泳疲劳组。利用改进后的 m RNA差异显示法筛选疲劳小鼠骨骼肌中的差异表达基因 (DD- ESTs) ,经反向 Northern blot和测序鉴定后 ,获得了 4条阳性目的片段 ,其中有 3条 DD- ESTs只在游泳疲劳组表达 ,另一条呈现下调表达现象 ,登录 Gen Bank数据库获得登录号为 AY5 4 36 4 9、AY5 4 36 5 0、AY5 4 36 5 1和 AY5 4 36 5 2 ,为阐明疲劳产生的分子机制奠定了一定的理论基础     

吉林麦饭石饲喂肥育猪的试验

麦饭石在《本草纲目》中被称为药石。近年来研究证明,它含有丰富的常量元素、微量元素和稀土元素。在配合饲料中添加麦饭石喂鸡,能提高蛋鸡产蛋率,加快肉鸡生长速度,提高饲料报酬;用麦饭石浸出液喂鹅,也具有明显的效果。迄今尚未见到用麦饭石养猪的正式报道。为了探讨用麦饭石养肥育猪的可     

结核分枝杆菌H37Rv ORF的高通量克隆和表达方法的建立

以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,采用Gateway重组表达系统,以基因长度200～2500 bp为标准,选择目的基因（n=384）,以ORF的保守序列设计引物并加上正反向AttB,通过PCR扩增获得基因片段检测入门克隆,得到的克隆有效率为374/384。通过两次同源重组,这些基因片段被克隆到表达载体中,克隆效率为350/384。随后将这些重组表达质粒分别在2个表达菌株BL21和BL21-codonplus-RP中进行诱导表达,表达得率为270/384,并对其中64个进行了纯化,16个是可溶性表达。这种大规模高效率地克隆表达技术适合各种生物的开放阅读框的克隆表达,是一种高通量的克隆表达方法。     

猪IFN-β的克隆与原核表达

根据已发表的AY687281基因序列,设计1对特异性引物,采用PCR方法从长白猪白细胞基因组中扩增到猪β干扰素基因,将PCR产物克隆到pMD18-T载体,进行序列测定。序列分析表明,获得的猪β干扰素基因全长561bp,编码186个氨基酸,与GenBank中AY687281基因序列同源性达99.2%,在28、34、128位核苷酸发生了点突变,由G变为A,由C变为G,由A变为G,由C变为T,导致10、12、43位氨基酸由A变为T,L变为V,E变为G,而在177位点核苷酸的突变没有改变氨基酸。将该基因克隆到pEGX-4T-1表达载体中,转化宿主菌Rosetta,对猪β干扰素进行原核表达。重组表达菌经IPTG诱导后,得到高效表达,所表达蛋白约为43 000,占总蛋白的39.3%,表达产物主要为包涵体。纯化后的包涵体具有抗病毒的生物学活性,能抑制口蹄疫病毒（FMDV）增殖。     

大力发展高效生态农业——鄱阳湖生态经济区现代农业发展思考

介绍了鄱阳湖生态经济区高效生态农业的内涵,制定了鄱阳湖生态经济区高效生态农业发展框架,并提出了鄱阳湖生态经济区高效生态农业运行的保障措施。     

冷应激对猪脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织中PPARγ2 mRNA及蛋白表达的影响

为了研究冷应激对机体的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）在冷应激中的作用,本试验选用30头军牧一号猪,并随机分成5组,包括常温对照组和4个冷应激组。常温组在（21±2）℃饲养,冷应激组的温度设置分别为：（-10±2）、（-5±2）、（0±2）、（5±2）℃。冷应激2h屠宰后分别采集猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织样品提取总RNA与总蛋白。通过荧光定量PCR技术检测了PPARγ2mR-NA的表达量;通过Western blot检测PPARγ2蛋白表达量。结果显示,各温度组猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏PPARγ2mRNA及蛋白表达量总体上差异显著（P〈0.01）,肾脏PPARγ2mRNA表达量总体显著升高,但其蛋白表达量总体呈下降趋势。结果表明,PPARγ2对冷刺激非常敏感,它除了可以调节冷应激时的脂肪代谢平衡,还对心脏有较好的保护作用,但是对肾脏的作用有限。本试验显示了冷应激中PPARγ2在脂肪代谢与能量代谢中作用,为研究冷应激对机体的影响及畜禽品质的提高奠定了基础。     

禽流感病毒H7亚型血凝素单克隆抗体的制备

本实验用核酸疫苗免疫BALB/C小鼠.取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经三次克隆和间接ELISA筛选,获得ⅠA3、ⅠB3、ⅠC4和ⅠF7四株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株.通过间接ELISA测定,单抗效价范围是:细胞培养上清1:160～1:640,腹水为1:5×104～1:4×105;经ELISA法测定,四种单克隆抗体仅与试验的H7病毒株反应,而不能与禽流感H5亚型病毒、禽流感H9亚型病毒等反应;单抗的亚类鉴定结果表明,ⅠA3、Ⅰ B3、ⅠC4分泌的抗体为IgG1亚类,ⅠF7分泌的抗体为IgG2b亚类.     

大肠杆菌acrA基因的克隆、表达、抗体制备及不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平的检测

检测不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平，探讨耐药水平与AcrA蛋白表达水平之间的关系。对acrA基因进行克隆、表达、制备抗AcrA抗体，Western blot方法比较同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平。结果表明，多重耐药株SEMR的AcrA表达明显高于单药耐药株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922。因此SEMR多重耐药性的产生与AcrA的高效表达直接有关。     

中药复方制剂对大鼠耐缺氧能力的影响及其作用机制的研究

选用健康成年 Wistar大鼠 72只 ,随机分为 6组 ,分别为中药复方 I、II、III组、阳性对照组、空白对照组和正常组。给药 2周后 ,进行常压耐缺氧实验 ,测定存活时间、血清皮质酮、促肾上腺皮质激素 (ACTH)和胰岛素水平的变化以及对肾上腺皮质束状带细胞超微结构观察。结果表明 :各复方组和阳性对照组均能显著延长大鼠的常压耐缺氧时间 (P<0 .0 5 ) ,其中复方 III组作用效果最好 (P<0 .0 1) ;各复方组和阳性对照组胰岛素浓度均显著高于空白对照组 (P<0 .0 5 ) ;各复方组和阳性对照组血清皮质酮、促肾上腺皮质激素 (ACTH)浓度均显著低于空白对照组 (P<0 .0 5 ) ;各中药复方组和阳性对照组对肾上腺皮质束状带细胞具有保护作用。结果表明 ,各中药复方和阳性对照药物均能提高机体耐缺氧能力 ,减轻缺氧对机体造成的损伤。