猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒2型共感染猪组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原的分布

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)同时感染猪50 d后,用免疫组化方法观察PRRSV抗原的分布.结果显示,单感染和共感染组在肺脏、脾脏、胸腺、扁桃体、颌下淋巴结、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、回肠和直肠中均可观察到PRRSV抗原阳性信号,且信号强度无显著差异;抗原信号的细胞分布范围也无差异,主要位于结缔组织的巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞和淋巴细胞中.     

用于DNA转染的PRRSV全长感染性cDNA克隆改建及应用

[目的]利用核酶自我剪切功能使PRRSV的基因组获得1个精确的基因组3′末端,提高全长感染性cDNA克隆的病毒拯救效率。[方法]用3步PCR方法将获得含有丁型肝炎病毒核酶序列的片段并将其克隆到PRRSV全长cDNA克隆pAPRRS的poly（A）下游,再通过酶切,连接将牛生长激素多聚腺甘酸转录终止序列插入到核酶序列后,构建成全长感染性cDNA克隆pAPRRS-HB,新构建的克隆转染MARC-145细胞,72h后用间接免疫荧光检测病毒N蛋白和非结构蛋白2（nsp2）的表达,并检测细胞上清中病毒的滴度。[结果]成功构建了含有核酶序列的PRRSV基因组全长感染性cDNA克隆pAPRRS-HB。新构建的全长感染性cDNA克隆能够较好地拯救出病毒,拯救效率比pAPRRS提高10倍左右。[结论]该结果为研究PRRSV基因结构与功能奠定了基础。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞传代毒株反向遗传系统的优化

反向遗传系统已成为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV）结构与功能非常重要的手段,并且在设计基因工程疫苗中发挥不可替代的作用。因而,有效提高感染性克隆拯救病毒的效率和稳定性以及降低经济成本是一个急需解决的课题。本研究在已构建完成的高致病性PRRSV细胞传代毒株反向遗传系统（pAJXM）的基础上,做了以下三方面的工作：（1）将T7启动子换成hCMV（人类巨细胞病毒,Human cytomegalovirus）启动子,从而全长cDNA克隆不需经过体外转录成mRNA的过程,直接通过DNA转染MARC-145细胞拯救病毒;（2）研究hCMV启动子的TATA框与病毒基因组5末端之间最佳的碱基数目,使体内转染获得的病毒基因组5末端序列为病毒的真实序列;（3）在病毒基因组3末端添加丁型肝炎病毒核酶（delta hepatitis virus ribozyme,HDVr）序列,体内转染获得的病毒基因组3末端的非病毒序列通过核酶自动去除。研究发现,基于DNA转染的反向操作系统是可行的,并且hCMV启动子的TATA框与病毒基因组5末端之间的碱基数目设置为25和在病毒基因组3末端添加HDVr序列后,能够有效地提高全长感染性cDNA克隆的病毒拯救效率和稳定性。     

大刺鳅消化道结构及食性研究

为了解大刺鳅(Mastacembelus armatus)消化道结构特点及其功能与食性的关系,以采自东江和桃江水域的大刺鳅为研究对象,采用解剖、石蜡切片、HE染色和胃含物分析等方法,研究了大刺鳅消化道的形态学、组织学结构及食性特征。结果显示,大刺鳅消化道由口咽腔、食道、胃和肠构成;口咽腔具舌、咽骨和咽磨;食道黏膜上皮为复层扁平上皮,含有丰富的杯状细胞,内壁具纵行褶皱和次级分支,肌层由横纹肌和平滑肌共同组成;胃壁和肠壁均由黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层构成,肌层为平滑肌,分为环肌和纵肌;胃呈“V”型,分为贲门部、胃体部、幽门部3个部分,各部分的肌层厚度相比差异显著(P<0.05),贲门部向胃体部逐渐增粗,且含有胃腺细胞,幽门部肌层极为发达,形成幽门括约肌;肠较短,具一个弯曲,肠道系数为0.325±0.050,肠绒毛丰富,前肠、中肠和后肠的肠绒毛高度相比差异显著(P<0.05);胃幽门部和前肠间有2个幽门盲囊。大刺鳅食谱较广,消化道中鉴定出虾类、水生昆虫、鱼类、螺、卵和植物碎屑6大类饵料,摄食时食物不经咀嚼直接吞入;食物多样性指数(H′)为2.19, 不确定性较低,饵料优势指数(D)为0.33,集中性较高;虾类为大刺鳅的主要食物,其相对重要性指数百分比(IRI%)、质量百分比(W%)和数量百分比(N%)分别为97.75%、92.29%和73.07%。研究表明,大刺鳅属肉食性鱼类,其消化道形态和组织学结构表现出与食性相适应的特点,该研究可为大刺鳅人工养殖和饲料开发提供理论参考。     

非对称密码体制RSA的原理与实现

RSA算法在公钥密码体制中占有重要的地位.本文首先介绍了加密算法的数学基础,进而从数学理论上分析了RSA算法的原理,给出了RSA加密算法的实例,分析了RSA算法的安全性以及在实际应用中遇到的问题,以及RSA中对参数的选择,最后给出了用java语官编写的程序实现了该算法.     

李树花芽形态分化时期的观察

李树是我省栽培果树中适应性最强的树种之一。花芽分化是李树周年生命活动中一个重要的物候期,是开花结果的基础。研究李树的花芽分化,掌握其规律,为制定丰产栽培技术措施提供理论依据。通过本试验看出,哈尔滨地区李树花芽形态分化始期为六月下旬至七月上旬,集中分化期为七月上旬至八月上旬。花芽形态分化期与枝条停长期有关,李子花束状果枝停长后四至五周开始花芽形态分化。初花期后八至九周开始花芽形态分化。从花芽形态分化始期到雌蕊形成所需的时间,绥棱红为四十天左右。花芽分化要在一定的物质基础上,需要一定的环境条件,李树达到花芽形态分化始期,前10天前的平均气温为22～23℃,前一个月间的平均日照时数为10小时以上,需要450～570℃的有效积温。     

青春无悔话当年

青春无悔话当年李燕华雨过天晴，置身于凉爽清新的校园，漫步在侧柏与丁香掩映的小路，青春岁月的记忆，又浮现在眼前。１９８２年初春，我大学毕业走向了工作岗位——内蒙古林学院。当时的内林很简陋，从繁华市区延伸过来的一条土路将学院推向草深林茂的幽静之中。院外是...     

江西省鳅苗气泡病调查与组织病理学观察

采用区域与典型调查相结合的鱼病学调查方法,系统全面地掌握了江西省鳅苗气泡病流行与危害情况;采用病鱼检查和组织压片镜检方法,观察记录了患病鳅苗的体表典型症状和皮肤、鳍条、肠道的组织病理学特征;采用病因学分析方法,将发病池塘水质与浮游生物检测结果与鳅苗气泡病发病情况进行关联分析,发现鳅苗气泡病除池塘溶解氧含量过高等水质因素外,还与育苗池水质培肥与鳅苗水花下塘不同步、天然饵料生物不适口或数量不足有关。针对鳅苗气泡病调查结果,提出了施肥调水、换注新水、泼洒药物和开启增氧机等针对性的防治方法。