杏果实发育过程中糖积累与蔗糖代谢相关酶的关系

以新世纪杏作为试材,在不同发育时期测定了果实中蔗糖、葡萄糖和果糖的质量分数以及蔗糖代谢相关酶的活性,对果实中糖积累与酶活性的关系进行了分析。结果表明,在果实发育过程中,蔗糖质量分数与蔗糖合成酶的合成方向和蔗糖磷酸合成酶呈极显著和显著相关,相关系数分别为0.934 9**和0.841 8*,而与中性转化酶活性呈显著负相关,相关系数为-0.842 5*。果实硬核期结束是果实中糖积累和蔗糖代谢相关酶的净活性变化的转折时期。硬核期结束之前果实中蔗糖代谢相关酶的净活性为负值,蔗糖积累缓慢;硬核期结束后进入着色期,蔗糖代谢相关酶的净活性转为正值,蔗糖积累迅速。     

生物技术与工程实验教学中心建设研究

以现代素质教育思想为指导，从生命科学人才创新能力培养为切入点，对实验中心建设的总体目标、建设内容、实验教学定位、师资队伍建设、实验中心管理及教学改革等问题进行了研究和教学实践，经过六年的集中建设，中心已经具备了良好的软硬件条件，实验中心的体制和功能渐趋完善，推动了生命科学类本科生专业人才的培养。     

核桃花器官变异研究

 观察胡桃花器官变异类型及其特点，制作石蜡切片对两性花变异类型的花芽分化进程进行了研究。用6个早实胡桃材料和2个晚实胡桃材料作亲本，选配10个杂交组合，得到2942个实生杂种苗。在具有早实胡桃为亲本的杂交组合和早实胡桃自然授粉的2648株实生单株中，到播种后第3a累计结实实率为20.34％，晚实胡桃294株实生后代无早结果现象。在538株早实杂种苗中，共有12个单株在2a生时发生了花器变异，变异类型包括两性花类型、穗状花类型、穗状花具分枝类型、穗状花雌雄同序类型、柱头变异类型和雌花序莲座状类型。连续5年观察表明，仅有来自于新1号×香玲杂交组合的C3单株二次花的雌雄同花变异在不同年份稳定表现。在一些早实品种（如香玲）的徒长枝上也具有两性花变异。胡桃两性花变异的形态发育进程属于向心式：花序原基－花原基－花被原基－雄蕊原基－雌蕊原基－子房原基。胡桃的花器官变异是早实胡桃二次开花过程发生的。早实胡桃花器官变异类型的存在为胡桃的早实特性和花器官发育研究提供了珍贵的材料。     

我国温室生产的现状与发展对策

温室是人类智慧与科技文明的结晶，它改变了农业生产的模式，打破了植物生长的地域和时空界限，推动了农业牛产的发展和社会文明的进步。尤其是现代温室，将计算机技术应用于温室建没与管理，已成为现代农业生产发展的生长点和助推器，是现代农业的代表模式和发展方向。     

芫荽花叶病病原病毒鉴定

 从芫荽(Coriandrum Sativum L.)花叶病株上分离到一病毒分离物(CMV-Co),汁液摩擦接种和桃蚜(Myzus Persicea)均能传毒。人工摩擦接种可侵染5科21种植物,在黄瓜、心叶烟等植物上引起系统花叶;在苋色藜、昆诺阿藜、豇豆等接种叶片上引起局部枯斑。此病毒的钝化温度为55～60℃,稀释限点为10^-3～10^-4,体外存活期2～3天。部分提纯的病毒最大紫外吸收为258nm,最小吸收为238nm,表现为典型的核蛋白吸收,A260/A280=1.26.SDS-不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳解离病毒其外壳蛋白亚基为一条多肽链,分子量约为25500道尔顿。琼脂免疫双扩散试验表明,CMV-Co与黄瓜花叶病毒有明显的血清学反应:用1.5%醋酸双氧铀负染,电镜观察病毒粒子球形(正二十面体),直径为28～30nm.根据上述特征,CMV-Co是黄瓜花叶病毒的一个株系。     

一种单子叶植物总DNA提取方法的改进及应用

本文报导了一种可用于多种单子叶植物总ＤＮＡ提取的简易方法，其特点是迅速简易、成本低、产量高、纯度好，所得粗提总ＤＮＡ产量达３００μｇＤＮＡ／ｇ组织，经ＲＮＡ酶（ＲＮａｓｅＨ）处理后，电泳检测未发现残余ＲＮＡ。该方法可用于不同用途的单子叶植物总ＤＮＡ的提取与纯化，如用于花粉管导入法分子育种的基因源植物总ＤＮＡ的提取、对转基因植物进行ＤＮＡ分析等研究。     

一种新的快速鉴定蛋白与靶DNA结合位点的方法

DREB转录因子在植物逆境胁迫响应中起非常重要的作用, 对植物的生长发育起重要的调控作用。传统的DNA酶I足迹法应用同位素标记DNA, 采用序列胶分离DNase I酶切片段, 操作较复杂, 分辨率较低, 不适用于高通量的样品检测。为阐明植物体内DREB转录因子的调控机制, 本研究利用改进的DNA酶I足迹法(DNase I Foot-printing)结合凝胶阻滞法(electrophoretic mobility shift assay, EMSA), 选用荧光色素代替同位素标记, 毛细管电泳技术代替序列胶检测DNase I酶切片段, 判定GmMYB1蛋白与GmDREB3启动子DNA结合的区域。采用限制性内切酶酶切GmDREB3启动子DNA验证以上结果。同时, 在判定的GmMYB1结合区域的基础上, 选择可能的DNA结合元件与GmMYB1进行EMSA试验, 证明GmMYB1可以与相应元件结合。该方法比传统的DNA酶I足迹法快速、简便、准确并可靠, 作为一种高通量的鉴定方法可用于大规模鉴定蛋白质的DNA结合位点。     

小麦TaYAB2基因的过量表达造成转基因拟南芥叶片近轴面特征趋向远轴面

叶片极性的建立在叶片形态建成过程中有重要作用。探讨小麦叶片发育的调控机制不仅可以丰富植株形态建成的基础知识, 也可以为小麦株型的设计提供理论依据。本研究从小麦中分离出一个YABBY基因家族成员TaYAB2, 对其序列特征、表达模式及功能进行了分析。该基因编码的蛋白在N端含有C₂C₂锌指结构域, C端含有YABBY结构域, 与拟南芥中AtYAB2和水稻中OsYAB2同源关系较近。RT-PCR结果显示, 该基因在大部分组织器官中广泛表达。进一步的原位杂交分析证实TaYAB2基因的转录产物在小麦苗端、幼叶、侧芽、幼穗等组织器官中高水平积累。在拟南芥中过量表达该基因能够引起转基因拟南芥叶片近轴面特征趋向远轴面。与对照相比, 转基因植株中远轴面特征决定基因FIL/YAB1、YAB3、KAN1的表达均呈不同程度的上调, 表明TaYAB2基因可能通过调节远轴面特征决定基因FIL/YAB1、YAB3、KAN1等调控叶片近-远轴极性。本研究结果有助于揭示YABBY类基因在小麦侧生器官近-远轴极性建立中的分子机制。     

紫花苜蓿Na+/H+ 逆向转运蛋白基因在拟南芥中表达提高转基因植株的耐盐性

以紫花苜蓿(Medicago sativa)为材料, 利用反转录PCR方法分离了NHX1全长cDNA(命名为MsNHX1)。Southern杂交结果表明, 在紫花苜蓿中存在一个小的液泡型Na⁺/H⁺逆向转运蛋白基因家族。序列分析表明, 该基因所编码的蛋白与拟南芥、水稻和棉花中液泡型Na⁺/H⁺逆向转运蛋白具有较高的同源性。在洋葱表皮细胞中瞬时表达MsNHX1-GFP融合基因的结果表明, MsNHX1定位在液泡膜上。Northern杂交发现该基因的表达受高浓度NaCl诱导。MsNHX1在盐敏感酵母突变体中表达可以提高转化子对NaCl的耐受性, 说明MsNHX1具有转运Na⁺的功能。在拟南芥中表达MsNHX1能显著提高植株耐受盐胁迫的能力; 而且在受到盐胁迫时, 转基因植株比野生型的渗透调节能力更强, 生物膜受破坏程度降低, 光合能力增强。以上研究结果表明MsNHX1是一个液泡膜Na⁺/H⁺逆向转运蛋白, 在植物耐受盐胁迫过程中起重要作用。     

生物技术专业实验集成教学体系的优化与创新

在生物技术专业实验教学实践中，不断探索、优化、创新，初步构建了一套生物技术专业实验的集成教学体系，实验教学的试运行表现出了良好的教学效果。