猪白细胞介素-15基因的克隆及生物信息学分析

参照GenBank登录的猪白细胞介素-15(IL-15)基因序列自行设计1对特异性引物，运用RT PCR技术从由刀豆蛋白A(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞扩增出猪IL-15基因的完整CDS序列，全长489 bp。同源比对结果表明，荣昌猪IL-15基因与已公布的2个猪种IL-15基因核苷酸同源性均为99.4%,与哺乳动物的同源性较高，与鸡的同源性较低。密码子偏爱性分析显示，荣昌猪IL-15基因在密码子使用上存在一定的偏爱性；分子进化分析结果表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近，而与禽类鸡的IL-15基因进化距离较远；结构域预测分析显示其与人的IL-15存在很大的相似性，可能在功能上有相似性。     

降低仔猪断奶前死亡率的对策初探

哺乳仔猪是猪场的基础,其成活率是影响规模化猪场的生产力水平及经济效益的重要因素。但仔猪处于哺乳期时,易受各种因素的影响,常出现较多     

一起特种野猪蓝耳病继发猪链球菌感染的诊疗体会

2009年7月，四川某特种野猪养殖场发生一起以厌食、呼吸困难、胸膜粘连为主要特征的传染病。经流行病学调查、临床症状观察、尸体剖检和实验室诊断，确诊为蓝耳病继发猪链球菌感染。根据诊断结果采取了积极的防制措施，取得较好效果，大大减少了经济损失。     

猪痢疾的实验室诊断

猪痢疾（Swine Dysentery,SD）又称血痢,是一种主要感染生长育肥期猪、以黏液性出血性结肠炎为主要特征的肠道传染病。SD的病原是猪痢疾短螺旋体（Brachyspira hyodysenteriae B．hyodysenteriae）,最早是1921年在美国发现,但直到1972年才认定其病原为呈强β-溶血的厌氧的肠道螺旋体,被命名为猪痢疾密螺旋体,1991年将其归入蛇形螺旋体属,现将其归入短螺旋体属,为该属中对猪具有肠致病性的重要成员,     

荣昌猪白细胞介素15成熟肽基因的克隆、表达及其表达产物活性检测

运用RT—PCR技术从由刀豆蛋白（ConA）诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞（PBMC）扩增出猪白细胞介素15（pIL-15）完整开放阅读框（ORF），共489bp，编码162aa。与已公布的2个猪IL-15基因核苷酸同源性均为99．4％。分子进化分析表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近，而与鸡的IL-15基因进化距离较远。运用PCR技术从含荣昌猪IL-15开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因，共345bp。将其定向克隆于原核表达载体pET-32a（＋）后在E．coli BL21中诱导表达，SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白约为34ku，重组蛋白以包涵体形式表达，表达产物约占菌体总蛋白的38．7％；Western blot分析表明，在相对分子质量34ku处有一条特异性带；对诱导重组菌进行转录检测得到约356bp的特异性片段。MTT法试验证实，表达产物初步纯化、透析复性后，可明显增强淋巴细胞的增殖。荣昌猪IL-15成熟肽成功在体外表达，获得的高效表达的产物具有一定的生物学活性。     

猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株N基因的克隆及原核表达

通过PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株核衣壳蛋白(N)基因,然后将重组到pMD18-T载体中的约1174 bp的基因片段亚克隆到PET-32a( )表达载体上,通过酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒命名为PET-N,核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,将阳性重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约66 kD的融合蛋白,N基因的表达可为传染性胃肠炎病毒的诊断提供良好的物质材料。     

PCR技术在猪肉中微生物检测的应用

当前,我国在食品中微生物的检测方面飞速发展,检测能力也由传统的培养方法向分子水平过渡。通过对聚合酶链式反应(PCR)技术的发展历史进行研究分析,归纳总结了PCR技术对4种常见猪肉中微生物的检测应用现状,旨在提供一些关于猪肉微生物快速检测技术的研究资料。