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为了获得无标签重组抗原用于非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测,本研究将B602L与类弹性蛋白多肽(ELP)基因进行融合表达,利用简单、经济的相变循环(ITC)纯化ELP-B602L融合蛋白,用烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶活性包涵体切除ELP标签,再用ITC回收重组B602L蛋白;用抗体阳性猪血清对重组B602L进行鉴定;以重组B602L蛋白为包被抗原进行ELISA鉴定。结果显示重组大肠杆菌能正确表达ELP-B602L融合蛋白,纯化融合蛋白纯度大于85%;TEV蛋白酶活性包涵体切除ELP标签的效率大于90%,回收的重组B602L蛋白纯度大于90%,能与抗体阳性猪血清反应;以重组B602L蛋白为包被抗原建立的ELISA与抗体阳性血清反应为阳性,与抗体阴性血清反应为阴性,OD450值与血清稀释倍数具有线性相关性。 相似文献
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胡桃楸体细胞胚胎发生的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
胡桃楸 ( Juglans mandshurica Max-im.)材质工艺性能极好 ,是建筑、军工等重要用材。其种子富含不饱和脂肪酸 ,是珍贵的保健食品。因其被大量采伐 ,资源日趋枯竭。体细胞胚胎发生是快速繁殖和人工种子研制的基础 ,对遗传改良有重要意义。迄今 ,未见到胡桃楸体细胞胚胎发生获得成功的报道 ,本试验通过胡桃楸未成熟胚的离体培养 ,成功地诱导了体细胞胚胎的发生。1 材料和方法胡桃楸未成熟胚及成熟胚均取自黑龙江省森林植物园试验地的无病虫害优良植株。取材分三个时期 :( 1)早期 ( 6月下旬 ) ,此时幼胚刚刚形成 ;( 2 )中期 ( 7月下旬 ) ,幼… 相似文献
23.
为探讨肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.h)感染对四氯化碳(CCl4)致BALB/c小鼠肝纤维化病程的影响,选取5~6周龄雄性BALB/c小鼠40只,随机分为4组(对照组、H.h组、CCl4组、H.h+CCl4组)。H.h和CCl4组分别采用灌胃法和腹腔注射法处理,分别于H.h感染后4和12周进行采样,检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,分别采用HE染色、天狼猩红染色、免疫组化法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测小鼠肝脏纤维化情况。结果显示:处理4周时,CCl4组和H.h+CCl4组小鼠出现轻度肝纤维化,其他组未见明显病变;处理12周时,与H.h组相比,H.h+CCl4组小鼠肝脏中H.h活菌量显著升高(P>0.01),血清中ALT和AST均显著升高(P>0.01),肝脏中大量胶原纤维沉积,炎症和纤维化相关因子转录水平显著升高(P>0.01... 相似文献
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非洲猪瘟(ASF)自2018年8月在我国暴发,对养猪业构成巨大威胁.该病是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家养猪高热、急性和高死亡率的出血症和淋巴组织坏死症;认识和了解病原ASFV与宿主的相互作用是理解致病机制的基础和疫病防控的前提.本文对ASFV与宿主细胞受体和内体系统的互作、基因转录和蛋白合成系统的互作、细胞凋亡和内质网应激系统的互作、天然免疫干扰素应答系统的互作、抗原递呈细胞的互作五个方面现有研究进展进行综述;并试图在此基础上理解ASFV的免疫保护和免疫逃逸作用,思考ASFV与宿主互作中需要回答的问题,为研制保护性疫苗和深入认识ASF致病机制提供线索. 相似文献
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为了培养强群,刘伯瑗同志早在1956年就开始饲养双王群。 1979年早春,他在江苏宜兴分水地区饲养同是2框意蜂的单、双王群。双王群满箱时,比单王群多4框;双王群可以加继箱时,单王群才8—9框蜂;双王群产王浆时间可以比单王群提前10天,春季的双王群王浆产量可达400克,比单王群多一倍;蜂蜜产量也比单王群提高40斤。由此可见,双王群在早春繁殖中有明显的优势:产子多,蜂群发展快,有利于及早获得强群,双王群内过剩的幼蜂(4—12日 相似文献
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根据发表的犬瘟热病毒基因序列设计一对引物,利用PCR方法从重组质粒pcDNA-N中扩增到CDVNP保守区基因片段,并按预定的阅读框架插入表达质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pNP-CDV并转化大肠杆菌BL21。序列测定表明,克隆到的基因片段大小为1065bp,与已发表的毒株核衣壳蛋白基因序列具有很高的同源性。通过对茵体裂解物的SDS.PAGE、Western blot鉴定以及IFA试验,证明携带重组质粒pNP-CDV的大肠杆菌的可以表达融合蛋白形式的核衣壳蛋白保守区域(命名为GST-NP,分子量约为64ku),该融合蛋白具有免疫原性和对CDV高免血清的反应活性。GST-NP的表达,将为临床检测CDV抗体提供诊断抗原。 相似文献
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草地螟是昆仑山区草场主要害虫之一。2011年4~8月,在新疆和田地区采取灯光诱杀和随机取样方法对草地螟分布进行调查。调查结果表明,海拔1984m草场草地螟成虫数量最多,依次为海拔2500m、3076m和3488m,不同海拔区草地螟成虫发生期基本相同。草地螟幼虫在海拔2950~3253m均有分布,其中海拔3055~3097m的虫口密度明显高于其他海拔区,海拔低于2800m和高于3400m的草场无草地螟幼虫分布。越冬代草地螟幼虫及蛹主要分布于海拔3028~3070m间的于田县阿羌乡塔孜克草场平均虫口密度284头/m~2,最高密度达296头/m~2。 相似文献