紫花苜蓿MsWRKY42的分离、鉴定及其对非生物胁迫的响应

【目的】WRKY是转录因子大家族,在植物生长发育及逆境胁迫应答中发挥着核心调控作用。通过分析转录因子MsWRKY42在紫花苜蓿抗逆境过程中的作用,为进一步研究WRKY转录因子在紫花苜蓿抗逆分子调控中的作用奠定基础。【方法】通过同源比对方法从紫花苜蓿转录组基础数据库中获得MsWRKY42序列。使用MEGA-X对MsWRKY42蛋白序列及拟南芥序列进行多序列比对,构建系统发育树。通过PlantCARE预测分析MsWRKY42启动子的顺式作用元件。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法分析MsWRKY42在紫花苜蓿不同组织中的表达量及其在NaCl（0.3 mol·L^-1）、PEG（15%）、4℃、40℃、低磷以及ABA（0.1×10^-3mol·L^-1）处理后的表达量变化。构建pCAMBIA1300-WRKY-GFP融合表达载体,通过农杆菌转化本氏烟草（Nicotiana benthamiana）,确定MsWRKY42蛋白的亚细胞定位。利用酵母单杂交系统检测MsWRKY42和启动子区域顺式作用元件W-box的体外结合活性。【结果】该基因包含1个1 692 bp的开放阅读框,编码563个氨基酸。多序列比对及系统进化树分析表明,该蛋白属于Ⅱb类WRKY家族成员,含有1个WRKY保守结构域和1个C₂H₂锌指基序,与拟南芥WRKY家族中的AtWRKY42相似度最高,故将其命名为MsWRKY42。在紫花苜蓿MsWRKY42启动子区域鉴定到多个顺式作用元件,主要包括胁迫响应、激素响应、生长发育等不同生命活动相关的调控作用元件。实时荧光定量PCR结果表明,MsWRKY42在紫花苜蓿各组织中均有不同程度的表达,其中根、叶中的表达量最高,茎、花、荚果中次之,芽中最低。经NaCl、PEG、低温、高温、低磷和ABA处理后的MsWRKY42表达量均有不同程度的上调。亚细胞定位结果显示,MsWRKY42蛋白定位在细胞核上。酵母单杂交系统检测结果显示,MsWRKY42能够与W-box顺式作用元件特异性结合。【结论】MsWRKY42为典型的WRKY转录因子,蛋白质定位在细胞核,能够与W-box顺式作用元件特异性结合;该基因在紫花苜蓿不同组织部位中均有表达,在根和叶中的表达量最高,且表达受NaCl、PEG、低温、高温胁迫和ABA激素的正向诱导。在紫花苜蓿中,该基因可能参与多种非生物胁迫反应。     

发酵床猪舍的改良设计与应用效果

为解决育肥猪后期粪尿量剧增造成发酵床死床的问题,对普通发酵床的布局进行了改良,在每个发酵床单元内增设1个定点排泄区,经测定有70%以上的猪粪尿经定点排泄区的漏粪地板排出发酵床外,从而可以提高发酵床养猪的密度,减少垫料用量。饲养试验结果表明,锯屑、稻壳和菌糠复合型垫料对猪粪的适宜承载量为1.40～1.86 kg/m~3,对尿的承载量为2.70～2.98 kg/m~3,垫料铺设厚度为60 cm的普通发酵床,在每头猪的最低占床面积2.24 m~2、占圈面积2.72 m~2时已出现轻度死床;而垫料铺设厚度为40 cm的改良型发酵床,每头猪占床面积为1.08 m~2、占圈面积1.36 m~2时,仍未出现死床。改良型发酵床单位面积及每头猪的一次性垫料投入量分别为普通发酵床的2/3和32%～64%,饲养过程中每头需添加的垫料量仅为普通发酵床的10.7%～16.0%,一次性垫料投入和饲养过程中的垫料添加均大幅下降。改良型发酵床提高了猪的增质量(10.2%～34.9%),提供了猪群清洁的拱翻和活动场地,保证了动物福利,有利于发酵床饲养方式的推广应用。     

影响生产实习效果的主要因素及其对策

影响生产实习效果的主要因素及其对策内蒙古林学院王学敏生产实习是高等院校工科学生参加生产实践、理论联系实际、进行基本训练的一个重要实践性教学环节。当前社会上对高校毕业生的评价，在轻视实践、理论脱离实际等方面反映较强烈，表现在组织能力、动手能力、表达能力...     

白黎芦醇诱导的去乙酰化酶SIRT1高表达对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响

本研究旨在分析体外白藜芦醇对去乙酰化酶SIRT1表达量的影响,探讨去乙酰化酶SIRT1表达量与颗粒细胞凋亡间的相关性。采用qRT-PCR方法进行SIRT1 mRNA分析,Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测猪卵巢颗粒细胞凋亡率。结果表明:培养液中白黎芦醇浓度达到50μmol/L时,处理组颗粒细胞中SIRT1 mRNA表达量极显著高于空白对照组(P<0.01);与颗粒细胞中SIRT1表达量规律相同,随着白黎芦醇浓度的升高,颗粒细胞活力逐渐降低,凋亡率逐渐升高。综合分析,白藜芦醇可诱导猪卵巢颗粒细胞中去乙酰化酶SIRT1的表达,加速猪卵巢颗粒细胞凋亡,SIRT1表达与猪卵巢颗粒细胞凋亡存在一定相关性。     

苏钟猪原种场规划设计与建设

为了推进苏钟猪良种繁育体系的完善,实现苏钟猪产业化养殖,进行了苏钟猪原种场的规划设计与建设.原种场规划设计与建设中应用了工厂化流水式作业、单元式全进全出、干清粪、雨污分离及生态循环等现代先进的养猪工艺与模式.苏钟猪原种场的建成对于提高我省良种猪水平和生猪竞争力具有重要意义,同时也为我省养猪业向集约化、科学化、现代化发展起着示范和带头作用.     

基于虚拟水流动均衡性的农业用水综合调控

为了解决密不可分的干旱区水资源和农业问题,使虚拟水流动与水资源量和经济规模相适应,该文借鉴基尼系数概念评价虚拟水流动的区域均衡性,并以尽量提高区域均衡性为目标,建立融合了粮食流通模型的农业用水综合调控模型,从而在控制灌溉水使用总量的前提下,通过调整粮食生产耗水和产量来改变粮食流通格局,进而优化虚拟水流动状态。在甘肃的应用研究证明该方法可在满足用水总量限制要求前提下,使虚拟水流动均衡性较调控前有明显改善,实现了干旱区实体水和虚拟水的统一管理。这对促进干旱区不同地区间的协作、缓解水资源利用与粮食生产间的矛盾,具有重要的理论指导意义。     

有机肥推广“堵”在哪儿了

如今,我国农业生产中长期施用化肥带来的土壤板结、农产品品质下降等问题日益凸现,而有机肥的运用可以破解这一难题。那么有机肥在实际的推广应用中处境如何呢?     

静乐县汾河干流两侧坡面治理的经验

为保证引黄水安全清洁到达太原,在汾河水库上游水土保持重点治理的基础上,省委、省政府决定对汾河水库上游河道及汾河干流两侧坡面进行为期两年的治理。两年间,静乐县完成乔灌混交林1 168.2 hm2,小苗乔木18.5 hm2,灌木1 165 hm2,大苗乔木197.1 hm2,经济林16.1 hm2,道路绿化12 km,开发滩地30.6 hm2,林草覆盖率明显提高。其主要治理经验是:领导重视,责任落实;全部工程,基建管理;严把质量,封造结合。     

河套蜜瓜整枝技术研究

试验对河套蜜瓜整枝技术进行初步分析，结果表明：在通用的10种方式中，采用双蔓整枝，在子蔓的3或4节上所发孙蔓留瓜，更加符合其生长特性，有利于提高河套蜜瓜品质、产量和增加经济效益。