优化反向PCR法分离转基因油菜外源T-DNA侧翼序列的研究(英文)

[目的]优化反向PCR(IPCR)条件分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。[方法]以单拷贝的转基因油菜FS4为研究材料,用SDS法和改良CTAB法(包括低温操作、增加酚氯仿的抽提次数以及延长低温沉淀时间等)提取转基因油菜总DNA,并进行酶切、纯化、自连接,再使用普通聚合酶与热启动高保真的ExTaqHS聚合酶进行两轮巢式PCR扩增,进行序列对比。油菜数据库比对搜索采用BBSRCBrassicaDB上WU-BLAST2.0工具,拟南芥数据库比对分析采用TAIR数据库中WU-BLAST2.0工具。为验证FS4转基因中T-DNA插入位点的真实性,根据序列比对分析结果在T-DNA插入位点的左右两端分别设计引物FS4-L与FS4-R。分别采用3对引物pS2/FS4-L、pA2/FS4-R、FS4-L/FS4-R同时对T1代转基因FS4杂合体和非转基因对照植株的基因组进行PCR验证。[结果]两轮巢式PCR扩增得到1个大小为4.0kb的片段,其序列与油菜数据库中BH652424和BZ044084两序列同源性分别高达97.8%和63.4%。根据序列比对结果设计特异引物对进行PCR验证的结果,也证明了FS4转基因油菜中T-DNA的确插入在该位点。[结论]优化后的IPCR条件能成功分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。     

生产美味牛奶

牛奶品质可分为成分性品质和卫生性品质两种。提高牛奶品质一般注意这两方面,但最近又出现追求美味牛奶的倾向。1 牛奶的美味对牛奶的美味没有明确定义,其与牛奶成分的关系还有许多方面不太清楚。牛奶中的脂肪赋予牛奶滑腻感和浓郁的香味;蛋白质提供浓郁性;乳糖赋予清淡的甜味;盐类具有咸味、苦味、涩味;游离脂肪酸和羰基化合物则发出臭味。现已查明,牛奶中发出臭味的成分达400多种。以上成分有的味重、有的味轻,构成牛奶风味。低温灭菌牛奶     

不同蒸热条件下蒸叶色泽的变化

蒸热(青)是煎茶制造的第一道工序,也是影响茶叶品质的重要工序,蒸热适宜程度根据蒸叶的色泽,茎、叶的软硬度及香气的发挥程度等综合进行评价,均由有经验人员感官判定。所以,建立一个客观的判定法,这是茶业界当前最重要的课题之一。客观判定蒸热程度,较容易的是观察蒸叶叶色的变化。本文研究了不同蒸热条件对蒸     

木材过热蒸汽干燥过程中的收缩应力(Ⅰ)--径向收缩应力特征

试验研究了日本柳杉在120—180℃高温高压过热蒸汽条件下，干燥过程中所伴随的收缩应力的发生发展特征，以及温度和相对湿度对径向收缩应力的影响。试验采用夹具束缚试件在干燥过程中的收缩变形，利用应力传感器连续测定饱水试件在高温高压过热蒸汽条件下，从试件达到环境平衡条件开始直到全干状态或明显开裂为止的径向收缩应力。对温度80—180℃，相对湿度0—80％干燥条件下收缩应力的研究结果表明，温度140℃、相对湿度60％以上的条件下，收缩应力得到有效抑制。在温度140℃以上的条件下，即使相对湿度达到100％仍然存在收缩应力，此收缩应力的发生与木材细胞壁组成的结构变化有关。     

鲁梅克斯牧草在我市生长表现及栽培要点

鲁梅克斯K-1杂交酸模是国外引进品种,其原品种名称为酸模K-1(Pymekck-1,直译),也称为饲料酸模.该品种由新疆明大教育实业发展公司于1995年从乌克兰引进.它填补了我国蓼科酸模属品种的空白,是目前我国单位面积粗蛋白产量最高的牧草品种之一,为解决我国人多地少、蛋白质资源缺乏矛盾提供了一个优良的品种.     

基于C2C网站的农产品网络营销实现

本文首先介绍了网络营销的含义,并说明采用网络营销的方法推销农产品的意义,然后对当前重要的网络营销网站淘宝网、易趣网及拍拍网上农产品的销售情况进行说明,最后说明采用C2C网站进行网络营销时如何解决安全问题.     

银杏超小卷叶蛾的发生与防治

本文论述了银杏超小卷叶蛾的发生规律与防治方法.     

利用外源晶体氨基酸优化吉富罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)饲料氨基酸水平的池塘试验

以平均初始体重18.2g左右的吉富罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)为试验对象,利用淡水鱼粉(罗非鱼加工下脚料)、豆粕和菜粕为主要蛋白源配制3组饲料(饲料1、饲料2和饲料3),使3组饲料粗蛋白水平保持一致,在池塘环境条件下,研究添加外源晶体氨基酸优化氨基酸水平对罗非鱼生长和饲料利用的影响。结果表明:养殖112 d后,罗非鱼成活率大于99%,没有疾病发生,平均体重从摄食饲料1(含8%淡水鱼粉)的574 g/尾降低至摄食饲料2(含3%淡水鱼粉)的555 g/尾,相应的平均饲料系数从1.33增加到1.47,平均增重率从3 036%降低至2 925%,收益减少272元/亩。但摄食饲料3(含3%淡水鱼粉,补充外源晶体DL-蛋氨酸)的罗非鱼平均体重则达到595 g/尾,与饲料1组比,平均增重率从3 036%提高至3 146%,每亩塘养殖收益增加142元;和不补充晶体DL-蛋氨酸的饲料2相比,平均增重率从2 925%,提高至3 146%,每亩塘养殖收益增加414元。试验结果表明,在实际养殖环境下,利用外源晶体DL-蛋氨酸优化氨基酸可以提高养殖效益,降低饲料生产成本。     

简评水土保持研究中的回归分析

回归分析已成为水土保持研究重要的数学处理手段。但在水土保持回归研究中 ,存在多元回归偏少、不重视回归检验、数学概念理解不清等问题 ,提出在研究过程中 ,当量纲不一的情况下 ,应该用回归系数进行比较。在非线性回归中 ,应列出相关指数 ,而不是相关系数。对试验中未预见到的干扰情况或正常试验出现的异常值 ,做好重点记录 ,并对此测定数据进行重点处理 ,分析其出现的原因 ,判断其属性 ,或对其消除 ,或对其进行重复测定补充验证 ,加大样本量后 ,再决定取舍。当试验完成后 ,对数据进行回归分析时 ,要进行检验 ,若检验通过 ,方可记录于技术报告。否则要分析原因 ,从另一角度进行阐释 ,有待于进一步研究 ,有助于研究的正确发展以及新问题的发现