猪带绦虫不同发育阶段的cDNA合成及含量测定

本文以猪带绦虫成熟虫卵、孵化激活的六钩蚴以及人工感染的囊尾蚴为原始材料，采用Promega试剂盒法分别分离提取总RNA和mRNA，反转录合成cDNA，并用a-^32P CTP掺入法放射测定其含量。实验表明：合成的猪带绦虫虫卵、六钩蚴和囊尾蚴的cDNA含量高，均可达2500ng，片段大小在300bp以上，可满足构建不同发育阶段cDNA基因文库的需要。     

黄牛静注、肌注和内服吡喹酮的药动学与生物利用度

6头成年健康黄牛按10 mg/kg剂量单次快速静注吡喹酮,另6头成年健康黄牛根据交叉试验设计法按10 mg/kg剂量单次肌注、30 mg/kg剂量内服吡喹酮进行药动学与生物利用度试验.利用高效液相色谱法测定血浆中吡喹酮原药的质量浓度,其检测限为25μg/L.房室模型分析表明,静注给药后的药时数据符合无吸收二室开放模型,其分布半衰期(t1/2a)、消除半衰期(t1/2β)、表观分布容积(Vd)、总体清除率(ClB)、药时曲线下面积(AUC)分别为(0.25±0.03)h、(1.28±0.20)h、(2.11±0.38)L/kg、(1.14±0.10)L/(kg·h)和(8.79±0.74)mg/(L·h).肌注的药时数据符合有吸收一室开放模型,主要药动学参数吸收半衰期(t 1/2ka)、消除半衰期(t1/2ke)、药时曲线下面积(AUC)、达峰时间(tmax)、峰浓度(Gmax)和生物利用度(F)分别为(0.40±0.17)h、(4.65±0.91) h、(6.85±1.02)mg/(L·h)、(1.33±0.52)h、(0.83±0.08)mg/L和77.93%.内服给药后符合有吸收一室开放模型,吸收不规则,其药动学参数t 1/2ka、t1/2ke、AUC、tmax、Cmax和F分别为(1.08±0.13)h、(6.81±1.26)h、(8.51±1.78)mg/(L·     

Genetic Diversity Analysis of Three Newly Discovered Native Chicken Breeds in Yunnan Using mtDNA D-loop Region Sequences

This study was aimed to evaluate the information of their genetic background of Frizzle chicken (FM),Naked-neck chicken (CB) and YN chicken (YN) that were three newly discovered native chicken genetic resources with excellent characteristics,which had been found in Nujiang prefecture and mountainous area of Yunnan province.The variation in a total of 168 individuals sampled from the three chicken populations was assessed using the mitochondrial DNA (mtDNA) D-loop region sequences as genetic marker.The results showed that there were a total of 27 haplotypes were defined in the three native chicken as well as the haplotype diversity of these three chicken were 0.947,0.938 and 0.596,respectively.The nucleotide diversity of these three chicken were 0.01268,0.01434 and 0.00239,respectively.Phylogenetic tree displayed that all 168 individuals distributed in maternal lineage A,B,C,E,F and G.Frizzle chicken contained lineages E,F and G,and Naked-neck chicken contained all 6 lineages,of which the main lineages were E,F and G.YN chicken included lineages E,F and G,and lineage E was the highest percentage in this population.Also,it found that YN chicken was closely related to Gallus gallus murghi,White Plymouth Rock chicken,White Leghorn chicken and New Hampshires chicken,while Naked-neck chicken was closely related to Gallus gallus spadiceus,Gallus gallus jabouillei,Gallus gallus gallus Linnaeus,Indonesian cockfight and Laos chicken.The Frizzle chickens shared more haplotypes with Naked-neck chicken,and the evolutionary relationship between the two species was closer.This study provided a basis for the origin and genetic assessment of three newly discovered Yunnan local chicken breeds.     

电算化条件下会计工作的内部管理控制

随着计算机在财会工作中的普遍应用,会计电算化已经逐渐在全球范围内取代了手工记账。我国企业从上世纪八十年代中期开始推行会计电算化,目前已初见成效,但实际操作过程中还存在许多不如人意的地方。企业中会计工作的电算化缺乏硬性规定和明确要求,许多主管人员对电算化不甚了解,使得舞弊现象难以完全杜绝。更重要的是,企业的注意力还停留在会计核算的范畴内,工作重心置于保证会计信息的真实性和会计账簿及报表的处理上,强调事后的计量与确认,对过程的参与度较浅,导致了事前控制几乎处于空白状态,这其中深层次的原因就在于目前大部分企业对…     

小鼠胚胎干细胞体外定向诱导分化成骨细胞

将小鼠5d龄ES-D3细胞源的类胚体(EBs)单细胞,按5×104/mL接种6孔细胞培养板,在DMEM基础培养基中使EBs单细胞贴壁培养。于第14!21天时,分别添加60%成骨细胞条件培养液(A组)、50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油(B组)和50μg/mL维生素C"50mmol/Lβ-磷酸甘油"1μmol/L地塞米松(C组),并设不添加诱导剂对照组(D组)。第22天时用1%茜素红染色显示阳性细胞,计算成骨细胞诱导形成率,数据用方差分析和多重比较检验。结果表明,A组细胞增殖呈团状聚集,茜素红染色阳性细胞结节多分布于聚集的细胞群内及其边缘,成骨细胞诱导形成率为10.04%,与对照组比较,差异极显著(P<0.01);B组诱导分化的细胞分泌物形成网状结构,茜素红染色阳性细胞分布在这些网状结构中,成骨诱导形成率为7.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05);C组茜素红染色阳性细胞分散而均匀,但未出现网状结构,成骨细胞诱导形成率提高至27.57%,与对照组比较差异极显著(P<0.01)。     

兔胰腺干/祖细胞的分离培养和鉴定

采取1～9日龄的实验仔兔胰腺,1 mg/mLⅣ型胶原酶消化,低糖DMEM培养.细胞铺满后进行传代20代以上冻存.对2～3代的细胞进行免疫组化染色,诱导向β细胞分化并进行高糖刺激胰岛素分泌.结果表明,兔的胰腺干/祖细胞具有较强的增殖能力;免疫组化染色表现为PDX-1、CK19、nestin和胰高血糖素阳性;分化诱导2 d后,双硫腙染色（DTZ）20%阳性,6 d后迅速增加到80%;高糖刺激诱导细胞具有胰岛素释放能力.通过免疫组化染色和诱导细胞胰岛素分泌实验证明分离的是兔胰腺干/祖细胞.首次报道兔胰腺干/祖细胞分离培养方法.     

ES-D3细胞nanog基因干扰载体的构建 及其干涉效果*

选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA（小分子干涉RNA）表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA表达载体中有3个可以在细胞内转录出siRNA或shRNA（短发夹RNA）,诱发RNA干涉（RNAinterference,RNAi）,能显著抑制目的基因nanog的表达;同时发现,干扰的ES-D3细胞生长48 h后,集落形态与未干扰细胞相比差别不大,但隆起不如后者明显,形态也不如后者规则,生长速度也较慢,AKP染色阳性,与未转染细胞相比没有差别.     

云南省甘蔗增施黄磷炉渣肥的肥效

云南省甘蔗区主要分布在南亚热带、热带北缘,土壤多为砖红壤、赤红壤等,是易受冲刷淋洗的地区;加上多年连作,又未施硅肥,造成土壤缺硅面积日益扩大.     

云南省主要农作物肥料施用现状与发展研究

通过对云南省化肥施用情况调查结果的统计,深入分析了我省肥料施用现状及存在问题,并对今后的发展提出了建议。     

重庆市城乡要素流动赋能乡村多元价值实现机制

准确认知城乡要素流动赋能乡村多元价值实现机制，既能激发乡村内生动力又能确保农民持续增收，对于建设宜居宜业和美乡村具有重要的理论价值和现实意义。该研究以城乡界面间要素流动的吸纳、融合和冲突作用为介质，解析城乡要素流动与乡村多元价值实现的逻辑关联，以重庆市为研究区，分别构建指标体系测度城乡要素流动和乡村多元价值实现，进而解析其相关关系以理清其赋能过程与实现机制，结果表明：1）城乡要素人口流动、资源转移和社会互动综合作用赋能乡村多元价值，表征为供给价值、调节价值、传承价值和服务价值的实现，其中人口流动是核心，资源转移是重点，社会互动是动力；2）重庆市乡村多元价值实现程度总体上呈正态分布，其中，人口流动对供给价值和调节价值具有正向促进作用、对传承价值具有反向抑制作用，相关系数分别为0.40、0.37、-0.56；资源转移对供给价值、调节价值和服务价值具有正向促进作用，相关系数分别为0.31、0.37、0.39；社会互动对调节价值、服务价值具有正向促进作用、对传承价值具有反向抑制作用，相关系数分别为0.42、0.46、-0.57；3）针对重庆市城乡人口流动频繁、资源转移和社会互动较少的现实情景，从以县域为重要载体构建新型城乡关系、全要素流动为核心的要素自由流动制度性通道、高质量提升乡村价值实现能力3个层次提出了加快乡村价值实现的路径。