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11.
试验旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)在NF-κB家族p65基因敲除细胞系中的复制规律。利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因定点修饰技术构建猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)p65基因稳定敲除细胞系。通过构建p65-sgRNA重组质粒,转染至HEK293T/17细胞,收取慢病毒,感染3D4/21细胞后利用嘌呤霉素筛选获得多克隆细胞系,T7核酸酶检测敲除效率,再通过有限稀释法获得3D4/21-p65-/-的稳定细胞系。CCK-8试剂盒检测3D4/21细胞中敲除p65基因后对细胞增殖的影响;流式细胞术检测PRV-GFP感染3D4/21及3D4/21-p65-/-细胞后病毒增殖的差异;实时定量PCR检测PRV感染3D4/21及3D4/21-p65-/-细胞后PRV gB、TK基因mRNA表达水平及PRV感染细胞诱导的IL-1β和IL-6基因mRNA水平表达的变化;Western blotting检测PRV-QXX感染3D4/21及3D4/21-p65-/-细胞后PRV gB、gE蛋白的表达;滴度测定检测PRV-QXX感染3D4/21及3D4/21-p65-/-细胞后子代病毒滴度。结果表明,sgRNA2和sgRNA3的基因编辑效率较高,对其进行克隆化培养进而获得敲除p65基因的稳定表达细胞系;CCK-8试剂盒检测细胞活力表明,p65基因敲除对细胞活力无影响;流式细胞仪检测表明,同一时间点PRV-GFP在3D4/21-p65-/-中的增殖显著高于对照细胞;实时荧光定量PCR表明在3D4/21细胞中敲除p65基因促进了PRV gB、TK基因的mRNA表达水平,而抑制了IL-1β、IL-6基因的mRNA表达;Western blotting结果表明,在3D4/21细胞中敲除p65基因促进了PRV gB、gE蛋白的表达;滴度测定结果表明,同一时间点PRV-QXX在3D4/21-p65-/-细胞中子代病毒的复制显著高于对照细胞。以上结果均表明,p65基因敲除可促进PRV在3D4/21细胞中复制。 相似文献
12.
以内蒙古锡林郭勒盟苏尼特右旗短花针茅荒漠草原为对象,采用随机区组放牧试验设计,结合对比分析、线性回归分析以及结构方程模型等数据分析方法,探讨荒漠草原主要种群与植物群落地上现存量的关系及在放牧条件下的变化特点。结果表明:随放牧强度增大,短花针茅、无芒隐子草和碱韭主导种群地上现存量占植物群落地上现存量的比例下降,且主导种群与植物群落地上现存量的线性关系减弱;不同年度间主导种群占植物群落地上现存量比例以及线性关系会产生变动;短花针茅种群对荒漠草原植物群落的影响强于无芒隐子草种群和碱韭种群,但无芒隐子草种群在降雨较好年份具有补偿作用。 相似文献
13.
为了初步了解中药多糖的组成,以便于进一步对其进行提取和纯化,实验选取六种中药,并以从中提取的多糖为研究对象,通过增加乙醇的浓度,测定多糖的累积沉积量,从此揭示二者之间的关系。所有多糖的累积沉积曲线都呈现相似的形状。此方法可以为中药多糖提取和纯化提供初步的依据。 相似文献
14.
随着各高校的不断扩招,我国高等教育快步地走向了大众化。在这种改革"精英式教育"而实行"大众化教育"的同时,伴随而来了生源质量大幅度下滑,不安于学习而混文凭的、缺乏学习积极性的、自控能力较弱的学生明显增多。因而,分析影响学生学习自控水平与学习积极性的原因及解决办法,是高职院校的重要任务。因此,可以从心理、学业责任观念、自我效能感、知识传授、就业信息、教师的人格魅力几方面对学生的学习自控水平与学习积极性进行分析,并针对不同的影响因素提出了解决办法。 相似文献
15.
2021年3月下旬,吉林市永吉县一养殖户家中一头妊娠期为260 d的母牛卧地不起,表现为四肢冰冷,头左侧弯,用力牵拉颈、头部拉不直,肩部、臀部肌肉抖动,粪便稀软有酸臭味等症状,经诊断为牛产后(产前)瘫痪症,及时治疗后痊愈. 相似文献
16.
17.
18.
19.
正1危害状核桃根结线虫病又名根瘤线虫病,除危害核桃外,还危害苹果、桃、猕猴桃、枣等。核桃根结线虫病属线虫引起的病害,主要危害苗木根部的幼嫩部分。核桃苗木根部受害后,在须根及根尖处产生许多小米粒大小或绿豆大小的瘤状物,随后侧根上也出现大小不等的近圆形瘤状物,表面粗糙,褐色至深褐色,瘤状物内有白色颗粒状物一至数粒,即为病原线虫的雌虫。发生严重时,根上长满瘤状物,致使根系不能正常吸收营养物质和水分,造成核桃苗木根结腐烂,根系减少,地上部叶片黄萎凋萎,生长矮小,甚至整株枯死。 相似文献
20.
为了解吉林省牛瑟氏泰勒虫病感染情况,本试验根据牛瑟氏泰勒虫18S rRNA基因序列设计引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法对吉林省珲春、通化、安图、舒兰、龙井、辽源、白山共7个县市采集的247份血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病分子流行病学调查,并进行不同地区、不同饲养方式、不同性别及不同年龄之间的比较。结果显示,牛瑟氏泰勒虫总体阳性率为39.68%(98/247),其中通化阳性率最高为70.00%(14/20),龙井阳性率最低为20.00%(8/40),地区之间除安图和白山差异不显著(P>0.05)外,其他各地区之间均差异显著(P<0.05);散养牛阳性率64.44%(58/90)与规模化养殖牛阳性率25.48%(40/157)之间差异极显著(P<0.01);母牛阳性率38.46%(50/130)与公牛阳性率41.03%(48/117)之间差异不显著(P>0.05);1岁以内牛阳性率为56.67%(34/60),1~3岁牛阳性率为42.22%(38/90),3岁以上牛阳性率为26.80%(26/97),不同年龄间差异显著(P<0.05)。结果表明,吉林省牛瑟... 相似文献