拟南芥PLDα1突变体的繁殖及形态和生理特性分析

对拟南芥野生型Ws及其突变体PLDα1(phospholipase D)的种植方法和形态特征进行了比较,并研究了ABA处理对其抗氧化酶系活力和丙二醛含量的差异。结果表明,与野生型相比,突变体形态上发生了较大的变化,并表现出对ABA反应敏感性的降低。ABA处理24 h后,野生型的SOD酶和POD酶活迅速发生变化,丙二醛含量迅速升高,而突变体变化较平缓,叶绿素含量的变化相似。     

日本结缕草（Zoysia japonica）磷脂酶D基因部分 保守序列的克隆及其对机械损伤的响应

以日本结缕草Zenith为材料,通过同源克隆的方法克隆出其磷脂酶D(PLD)基因部分保守序列,序列长399 bp,并通过实时荧光定量PCR检测PLD基因在机械损伤胁迫下随时间变化的表达模式.结果表明,磷脂酶D在胁迫2h内大量表达,随后逐渐降低,在9h已接近于对照水平,说明PLD基因在损伤初期大量参与了应对机械损伤胁迫的防御与修复过程,在损伤后期其作用减弱或被代替;电导率的测定结果表明,细胞膜结构在胁迫初期遭到极大程度的破坏,胁迫9h后膜损伤程度开始减轻.结合PLD基因和电导率的表达模式,推测PLD基因在6h内会激活一系列感受信号及下游信号分子,9h后其相应防御机制发挥作用来减轻胁迫造成的损害.     

转基因三倍体毛白杨抗盐试验研究

试验设计4～11 g·kg-1 8个NaCl浓度梯度,对转PLD/AtNHXI基因抗盐碱三倍体毛白杨进行组培苗抗盐分化试验,设计2～10 g·kg-19个NaCl浓度梯度进行组培苗抗盐生根试验,设计3～12 g·kg-1 10个NaCl浓度梯度对1年生盆栽苗进行抗盐试验,结果表明:在NaCl浓度达8 g·kg-1时,转基因三倍体毛白杨分化培养37 d后,组培苗的叶色、分化芽数及新稍长度开始受到影响,随着NaCl浓度的增大将抑制组培苗分化生长,甚至枯萎死亡;在含NaCl 7 g·kg-1的生根培养基中,培养20 d后,虽然叶色没有受到盐太大的影响,但生根和新稍的生长都开始受到抑制,根系明显的减少;在含NaCl 7 g·kg-1的土壤条件下,盆栽苗培养32 d后,开始表现出盐害症状.     

热处理对黄瓜LOX和PLD活性的影响

为了研究冷害温度(2℃)下PLD和LOX活性的变化规律,以黄瓜为研究对象,对其进行采后38,45和52℃ 30 min热水处理,测定2℃贮藏期间(15 d)黄瓜的细胞膜透性、丙二醛含量、PLD活性和LOX活性.结果表明:热水处理可以抑制果实细胞膜渗透率的升高,减少低温贮藏期间丙二醛的积累,降低黄瓜低温贮藏过程中PLD及LOX的活性,且以45℃、30 min热水处理效果最显著.     

磷脂酶Dβ在拟南芥低温信号中的转导作用

磷脂酶D（PLD）不仅是植物中一类主要的磷脂水解酶,而且是一类重要的跨膜信号转导酶类。PLD的磷脂降解功能和信号转导功能均影响植物的抗冻性。本研究以PLDβ基因被敲除的拟南芥突变体及其野生型植株为材料,进行低温驯化和冻害胁迫处理,并分析其作用途径。结果表明,PLDβ基因介导低温信号转导作用,参与渗透调节途径中脯氨酸的调控和抗氧化系统中过氧化氢酶（CAT）活性的调控,并且与低温信号激素ABA不在同一条信号转导途径。本研究为探索通过调控PLD的活性提高植物抗冻性提供了新的途径,并为深入揭示植物的抗冻机理以及磷脂信号转导机制提供实验支持。     

反义磷脂酶Dγ基因转化悬铃木的研究

我们已经建立了利用悬铃木叶片培养诱导植株的高频再生体系。本研究是在这一体系的基础上，以继代生长40天左右的组培苗顶部充分展开的叶片为受体，用含有反义磷脂酶Dγ（PLDγ）基因的农杆菌浸染叶片，通过在含有卡那霉素的培养基上进行抗性筛选，获得了抗性植株。对抗性植株进行了PCR和PCR—Southern杂交鉴定，证明反义PLDY基因已整合进悬铃木核基因组中。     

A critical analysis of phosphatidic acid mediated resistance response in Sinapis alba against Alternaria brassicicola

The enhanced expression of PLD genes and the quantitative increase in the level of phosphatidic acid (PA) in resistant Sinapis alba compared to the downregulated or unchanged expression of the PLD genes and decreased PA level in susceptible Brassica juncea when challenged with Alternaria brassicicola, indicated a positive relationship between PA-mediated signalling and resistance against this necrotrophic pathogen. Furthermore, spraying PA onto the susceptible species B. juncea increased resistance and enhanced expression of ABA-responsive genes, which was comparable to the expression of these genes in S. alba when challenged with A. brassicicola.

• •The enhanced expression of several PLD genes in resistant S. alba was observed compared to B. juncea upon challenge with A. brassicicola.
• •An increase in the PA level in S. alba compared to B. juncea following interaction with the pathogen.
• •Leaves of B. juncea incubated on PA-soaked filter paper did not show resistance.
• •Spraying B. juncea leaves with PA led to resistance as well as to the enhanced expression of ABA-responsive genes.
• •A temporal increase in the PA level is associated with increased resistance against A. brassicicola.

     

渗透胁迫下扁穗冰草生理变化与PLD基因的表达差异

为分析扁穗冰草（Agropyron cristatum）抗旱特性,以扁穗冰草实生苗为研究材料,进行干旱胁迫条件下脯氨酸、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、可溶性糖生理指标的测定及用Real-time qPCR方法分析扁穗冰草PLD基因表达差异。结果表明,不同渗透胁迫条件下扁穗冰草的脯氨酸、POD和可溶性糖含量的变化以及扁穗冰草PLD基因表达量都与扁穗冰草渗透胁迫相关。     

黄瓜果实不同部位的耐冷性差异

 为了研究黄瓜果实采后的耐冷性,'津优1号'黄瓜（Cucumis sativus L.）果实在2 ℃下贮藏9 d后,转移到20 ℃下放置2 d,分别测定果脐（靠近花萼）、中部、果肩（靠近果梗）三个部位的冷害指数、电导率、磷脂酶D（PLD）和脂氧合酶（LOX）活性、膜结合Ca2+含量。黄瓜果实的冷害最初在脐部出现,再逐渐漫延到中部和肩部。冷藏以后的黄瓜果实冷害指数、电导率、PLD活性、LOX活性均呈现为脐部最高,中部次之,肩部最低。与膜结合的Ca2+含量则从黄瓜脐部到肩部逐渐递增。结果表明,黄瓜果实从果肩到果脐的耐低温能力逐渐降低,果实冷害程度与PLD和LOX活性提高和膜结合钙离子浓度下降显著相关。     

磷脂酶D抑制剂处理对采后龙眼果实贮藏性质的影响

[目的]研究不同磷脂酶D（PLD）抑制剂处理对采后龙眼果实贮藏性质的影响,为龙眼保鲜新方法的开发应用提供理论依据。[方法]以采后“石硖”龙眼果实为试验材料,分别用25mg／kg的PLD抑制剂正丁醇、仲丁醇、溶血磷脂酰乙醇胺、2,3-二磷酸甘油酸、Wortmannin、沙丁胺醇、色甘酸钠进行处理,分析在常温（25±0．5）oC贮藏过程中龙眼果实的品质变化。[结果]仲丁醇处理后的龙眼果实褐变指数及自溶指数上升慢于对照果,可溶性固形物含量高于对照果,果实失重率低于对照果;与其他抑制剂处理果和对照果相比,较好地保持了龙眼果实采后品质。[结论]PLD抑制剂仲丁醇处理能有效减缓贮藏过程中龙眼果实的品质劣变,具有一定的保鲜效果。