IFN-γ在胚泡植入期大鼠卵巢的分布

为研究IFN-γ对妊娠的免疫调控机制,本文采用免疫组化SP法,对大鼠胚泡植入期卵巢组织内IFN-γ的分布进行了研究。结果表明,IFN-γ在不同发育阶段卵泡的颗粒细胞中均有分布,原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡的卵母细胞呈中等阳性反应,在原始卵泡、初级卵泡及次级卵泡的卵泡内膜细胞呈IFN-γ强阳性反应,成熟卵泡内膜细胞则呈弱阳性反应;在卵巢组织基质细胞、血管内皮细胞、粒性黄体细胞、生殖上皮也出现强阳性反应,卵泡液呈阳性着色。结果表明,妊娠有机体生理剂量的IFN-γ通过影响卵巢功能参与了胚泡的植入,与妊娠的建立和维持密切相关。     

IFN-α对猪黄体细胞增殖及VEGF基因表达的影响

为了探讨α干扰素(IFN-α)对体外培养猪黄体细胞增殖及VEGF基因表达的影响,试验分离猪卵巢中的黄体组织进行消化处理,制成细胞悬液,体外培养猪黄体细胞,采用MTT比色法测定猪黄体细胞的增殖,ELISA法测定培养液中孕酮的浓度;Real time PCR和Western-blot检测血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果表明:IFN-α对猪黄体细胞增殖的抑制作用随着浓度升高而增强。在IFN-α浓度低于100 IU/m L时,对猪培养黄体细胞分泌孕酮呈现抑制作用;当IFN-α浓度高于100 IU/m L时,对猪培养黄体细胞分泌孕酮呈现促进作用。IFN-α下调猪黄体细胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白表达。说明IFN-α抑制黄体细胞增殖并具有浓度依赖性,对猪黄体细胞中孕酮的分泌没有影响,下调猪黄体细胞中VEGF基因的表达。     

干扰素-γ对米非司酮诱导的流产大鼠子宫孕酮受体表达的影响

目的:探讨干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)对米非司酮诱导的流产大鼠子宫中PR表达的影响。方法:免疫组化SP法和图像分析法。结果:外源注射IFN-γ后,大鼠子宫PR的表达随IFN-γ剂量的增加而升高,除IFN-γ600U组和800U组大鼠子宫内膜中PR的表达量接近正常妊娠组(P>0.05)外,其他IFN-γ处理组大鼠子宫内膜中孕激素受体(PR)的表达量均极显著低于正常妊娠组(P<0.01);子宫肌层中PR的表达除在IFN-γ100U组极显著低于正常妊娠组(P<0.01),800U组极显著高于正常妊娠组(P<0.01)外,其他各组与正常妊娠组均无显著差异(P>0.05)。结论:在一定剂量范围内IFN-γ可以上调流产大鼠子宫中PR的表达。     

干扰素-τ(IFN-τ)的分子结构和妊娠识别机理

在反刍动物的整个妊娠失败中，早期胚胎死亡占有很大的比例，它在很大程度上是由母体妊娠识别失败造成的IFN-τ（干扰素-τ）是由反刍动物孕体附植时发出的特有的妊娠识别信号，它是建立母体妊娠识别的一种主要因子，本文阐述了IFN-τ的分子结构及其最新研究进展，即IFN-τ和PGF2α，UCRP，OTR，GM-CSF的互作机理。     

大鼠卵巢内IFN-γ样免疫反应阳性物质的表达

应用免疫组织化学SP法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵呈色法对卵巢细胞内IFN-γ的分布及表达状况进行了研究。结果显示，在卵巢的生长卵泡和成熟卵泡以及黄体内都可表达IFN-γ。在卵泡内IFN-γ存在于颗粒细胞胞质中，且在同一个卵泡中，卵母细胞周围的颗粒层细胞染色最深，最密集。在黄体内广泛分布IFN-γ样免疫反应阳性纤维，而细胞为阴性反应。阳性纤维细长，染色较弱，上有膨体。大多数纤维在膨体处分支，并弯曲、盘绕成网络样围绕在黄体细胞周围。上述结果提示，IFN-γ可能作为一种神经免疫介质参与卵巢内的免疫调节。     

干扰素-τ对绵羊妊娠识别影响的研究进展

干扰素-τ是羊孕体附植时发出的特有的妊娠识别信号,它是建立母体妊娠识别的一种主要因子。本文阐述了IFN-τ的分子结构及其最新的研究进展,即IFN-τ和PGF2α、U-CRP、OTR、GM-CSF的互作机理。     

饲粮添加益生菌和合生元对妊娠-哺乳期母猪免疫功能与抗氧化能力的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮添加益生菌和合生元对妊娠-哺乳期母猪免疫功能与抗氧化能力的影响。选用64头妊娠巴马香猪,随机分为对照组(饲喂基础饲粮)、抗生素组(在基础饲粮中添加50 g/t维吉尼亚霉素)、益生菌组[在基础饲粮中添加200 mL/(头·d)益生菌发酵液]和合生元组[在基础饲粮中添加200 mL/(头·d)上述益生菌发酵液和500 g/t低聚木糖],每组16头,单栏饲喂。分别于妊娠第45、75和105天以及分娩后第7和21天,每组选取6头母猪,前腔静脉采血,离心分离血浆,测定免疫球蛋白、免疫细胞因子含量和氧化-抗氧化指标。结果表明:与对照组相比,1)饲粮添加益生菌显著降低了哺乳第7天免疫球蛋白G(IgG)含量(P<0.05);饲粮添加合生元显著降低了妊娠第45和75天以及哺乳第7天免疫球蛋白M(IgM)含量(P<0.05);饲粮添加抗生素显著降低了妊娠第45、75和105天以及哺乳第7天IgM含量(P<0.05);饲粮添加益生菌和合生元显著提高了哺乳第21天IgM含量(P<0.05)。2)饲粮添加益生菌显著降低了妊娠第105天干扰素-γ(IFN-γ)含量以及哺乳第7天白细胞介素-2(IL-2)、IFN-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(P<0.05),显著提高了哺乳第7天白细胞介素-10(IL-10)含量(P<0.05);饲粮添加合生元显著降低了妊娠第45天促炎细胞因子[(IL-2、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、IFN-γ和TNF-α]含量,妊娠第75天IFN-γ和TNF-α含量,妊娠第105天IL-10、IFN-γ和TNF-α含量,哺乳第7天促炎细胞因子(IL-2、IL-8、IFN-γ和TNF-α)含量以及哺乳第21天IL-8含量(P<0.05);饲粮添加抗生素显著降低了各时间点IL-8含量,妊娠第45和75天及哺乳第7和21天IFN-γ含量以及妊娠第45、75和105天TNF-α含量(P<0.05)。3)饲粮添加益生菌和合生元显著提高了哺乳第7和21天过氧化氢(H2O2)含量,以及哺乳第21天还原型谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.05)。综上所述,饲粮添加益生菌和合生元可降低妊娠-哺乳期母猪血浆促炎细胞因子含量,增强妊娠至哺乳阶段母猪体液免疫功能,改善哺乳后期母猪抗氧化能力,这有利于母猪的机体健康。     

IFN-τ研究进展

干扰素tau(IFN-τ)是反刍动物特有的一种新型Ⅰ型干扰素,通常被认为是反刍动物的妊娠识别信号,在胚胎与子宫内膜的相互作用中调节一系列相关基因的表达。近年来,随着对IFN-τ研究的深入开展,发现其除了参与调节反刍动物妊娠着床外,在其他物种中还具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种生理功能。基于此,文章围绕IFN-τ的主要生理作用展开综述。     

妊娠期山羊卵巢中雄激素受体的免疫组化定位

用免疫组织化学技术对不同妊娠时期山羊卵巢组织中雄激素受体的表达及其变化规律进行研究,以探讨雄激素受体在卵巢生殖功能中的调节作用。结果显示,妊娠期黄体细胞的形态结构随所处妊娠的不同阶段而变化,退化黄体细胞数量随周期进程逐渐增多。在妊娠各时期卵巢的被膜、次级卵泡颗粒层细胞和黄体细胞均存在雄激素受体的阳性表达,从阳性反应产物定位来看,阳性反应主要位于细胞膜和细胞质内;随妊娠进程雄激素受体的表达强度逐渐减弱。     

妊娠早期蒙古绵羊子宫内膜enJSRV及IFN-τ基因表达水平的分析

本研究旨在检测内源性绵羊肺腺瘤反转录病毒(enJSRV)与干扰素-τ(IFN-τ)在妊娠早期蒙古绵羊子宫内膜组织的表达以及enJSRV的表达与外周血孕酮水平变化的关系。运用TaqMan实时荧光定量PCR技术和电化学发光法对enJSRV和IFN-τ在妊娠早期蒙古绵羊子宫内膜组织相对表达及孕酮水平进行了测定。实时荧光定量PCR结果显示,enJSRV和IFN-τmRNA在妊娠早期绵羊子宫内膜组织有不同程度的表达。SAS统计学软件分析得出,子宫内膜组织中enJSRV mRNA在妊娠12～14d(交配日为0d)表达较高,2～10、16～30d的表达均低于前者。IFN-τmRNA仅在妊娠12～25d表达,14d达其峰值,30d就不能检出,且差异都极显著(P<0.01)。电化学发光法结果显示,孕酮水平在妊娠2d为0.4ng·mL-1,以后升高,妊娠8～16d维持在8.3ng·mL-1左右,在妊娠19～30d孕酮水平有所下降,30d为2.5ng·mL-1。以上结果提示,子宫内膜组织中enJSRV mRNA的表达与外周血孕酮含量及IFN-τ的变化高度相关,且enJSRV在胎盘的形态发生及生殖生物学方面发挥重要作用。     

妊娠山羊黄体组织中ghrelin的表达

运用组织学和免疫组化方法对不同妊娠时期山羊黄体的组织学结构及ghrelin的分布规律进行了研究,结果表明:黄体外覆结缔组织性被膜,实质主要由粒性(大)黄体细胞和膜性(小)黄体细胞组成;在各时期均存在大黄体细胞的退化现象,退化黄体细胞数量随周期进程逐渐增多,结构变化表现为:细胞形态多变,胞质呈强嗜酸性,胞核固缩或碎裂.ghrelin阳性反应主要位于被膜和黄体细胞,各阶段被膜上均存在ghrelin表达,主要为纤维及血管的着色;黄体内ghrelin主要定位于大黄体细胞,另外部分小细胞也有表达,从分布范围和染色强度看,呈现出少-多再渐少的变化趋势;结合各周龄山羊黄体组织中ghrelin阳性产物相对表达量的分析,表明在妊娠早中期,黄体组织内有较高的ghrelin表达,而在妊娠后期表达较低.不同妊娠时期山羊黄体组织中ghrelin的这种周期性表达模式与黄体的功能相适应,提示ghrelin的表达与黄体的功能密切相关.     

荣昌猪IFN-ω基因的克隆与序列分析

干扰素(IFN)是机体天然免疫防御系统中的一类细胞因子,是一类具有广谱抗病毒、增强动物对各种疾病的免疫力等多种生物学功能的蛋白质.目前发现的猪干扰素包括IFN-α、β、γ、δ、ω等 [1],其中研究较热的有IFN-α,IFN-γ,对IFN-ω的研究鲜有报道.IFN-ω是由5个以上的相关功能基因编码的 [2],蛋白质家族中与IFN-α亚型之间同源性很高,天然的IFN-α常常是IFN-α与IFN-ω功能基因表达产物的混合体.     

不同来源牛囊胚IFN-τ分泌水平的比较

干扰素-tau(IFN-)τ在妊娠建立中有重要生物学功能,对提高体外胚胎移植成功率有重要意义。为了探明不同来源的牛囊胚分泌的IFN-τ水平,本实验用细胞病变抑制法对牛孤雌发育(PA)、体外受精(IVF)、体外受精冷冻解冻(FT-IVF)及体细胞核移植(SC N T)等4种囊胚进行了检测。结果表明:在C R 1aa体系中培养7 d的PA、IVF、FT-IVF囊胚分泌的IFN-τ量没有显著性差异(P>0.05),但它们都显著高于相同日龄SC N T囊胚的分泌量(P<0.05)。分别在C R 1aa和SO FaaBSA体系中生产的PA囊胚分泌的IFN-τ量没有显著性差异(P>0.05),即2种体系对牛孤雌发育囊胚分泌IFN-τ量没有影响。在C R 1aa培养体系中生产的PA和IVF囊胚分泌的IFN-τ量与囊胚细胞数均无相关性。PA囊胚分泌的IFN-τ与囊胚直径平方无相关性,IVF囊胚的IFN-τ的分泌量与囊胚直径平方中等相关。     

羊干扰素Tau基因克隆与序列分析

本文应用 PCR扩增技术 ,以国外已发表羊干扰素 Tau(IFN- τ)基因序列为基础设计引物 ,在国内首次从北京绵羊、南江黄羊这两种国产羊的血液中分别扩增出 IFN- τ基因 ,并将 IFN- τ基因插入 PQE- 30载体构建重组质粒 ,经 PCR鉴定及 Sph 、H ind 双酶切鉴定证实为羊 IFN- τ基因的重组质粒。重组表达质粒测序结果表明 IFN- τ(p3)基因全长 5 16 bp,编码 172个氨基酸。实验发现 ,从北京绵羊、南江黄羊扩增出来的 IFN- τ基因序列与已发表的序列相比 ,其碱基同源性分别为 96 .3%、99.0 4 % ,氨基酸同源性分别为 :92 .4 %、97.1%。     

妊娠期激素对Th1和Th2细胞因子的调控

妊娠是一个复杂的生理过程,受到神经、免疫和内分泌的共同调节。作为半自体抗原的胎儿不被母体排斥是子宫局部免疫水平调节的结果。其中激素对辅助性淋巴细胞(Th)发生、分化的调节作用愈来愈受到重视。辅助T淋巴细胞能分化为不同的亚型(Th1和Th2),孕酮可促进Th2型细胞因子(IL-4,IL-5)的产生,有利于妊娠的正常发生;松弛肽促进Th1型细胞因子(IFN-γ)的产生,对妊娠有害。在母胎界面存在激素-细胞因子网络,淋巴细胞产生的细胞因子还能够影响其他细胞因子的产生。由Th2样细胞产生的,对胚泡着床具有非常重要作用的白血病抑制因子(LIF),其表达受Th1细胞诱导因子的下调,如IL-12,IFN-α,IFN-γ,受IL-4和孕酮(诱导T淋巴细胞向Th2细胞分化)的上调。激素通过调控淋巴细胞分泌的细胞因子来调控免疫系统,保持一个动态的平衡,有利于维持妊娠。     

牛干扰素的研究与应用进展

干扰素(IFN)是一类具有广泛生物学活性的蛋白质,具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。主要阐述了干扰素的诱生和功能研究,对牛IFN-α、IFN-γ和IFN-τ的生物学特性及应用研究进行概括综述。     

干扰素的新家族--IFN-λs研究现状

干扰素λ(IFN-λ)家族是干扰素的一个新家族,不同于Ⅰ型IFN和Ⅱ型IFN,包括IFN-λ1、IFN-λ2和IFN-λ3(又称IL-29、IL-28A和IL-28B)。IFN-λs的信号转导机制类似于IFN-α,两者都是通过诱导受体异二聚体化,活化Jak-STAT信号通路,进而发挥抗病毒、抗细胞增殖等生物学作用。所不同的是IFN-λs是通过诱导其独特的Ⅱ型细胞因子受体CRF2-12/IFNLR1/IL-28Rα和CRF2-4/IL-10Rβ异二聚体化。IFN是第一个应用于临床的基因工程产品,IFN-α/β在治疗肿瘤和病毒性疾病等方面都取得了显著的疗效。IFN-λs与Ⅰ型IFN有着几乎相同的功能,是否具有独特功能,正在进一步的研究之中。     

γ-干扰素的研究进展及在畜牧中的应用

γ-干扰素(interferon gamma,IFN-γ)也叫免疫干扰素,在抗病毒、抗肿瘤和免疫调节上作用强大。针对IFN-γ及其受体、IFN-γ的基因表达调控、生物学功能及在畜牧生产中的应用作一概述。     

TH1细胞因子及NO含量对山羊胚胎移植妊娠的影响

为解决胚胎移植妊娠率低的问题,应用胚胎移植技术对8只供体波尔山羊进行超排处理,将获得的胚胎植入92只受体关中奶山羊,其中61只妊娠,妊娠率为66.3%;随机选择受体羊20只,于植入胚胎当日和40天时采集外周血样,并采集胚胎移植当日供体羊外周血样,用ELISA方法检测血浆中TNF-α、IFN-γ、IL-2的含量,用硝酸还原酶法检测NO含量.结果显示:植入胚胎当日受体妊娠羊血浆中各细胞因子和NO含量与供体羊差异不显著(P＞0.05),而受体返情羊则显著高于受体妊娠羊和供体羊(P＜0.05);植入胚胎40天时妊娠羊TNF-α含量显著低于返情羊(P＜0.05),IFN-γ、IL-2含量极显著低于返情羊(P＜0.01),NO含量显著低于返情羊(P＜0.05),但又显著高于植入胚胎当日妊娠羊和供体羊(P＜0.05).结论:植入胚胎当日,受体羊Th1细胞因子含量显著高于供体羊时妊娠失败;受体羊妊娠后Th1细胞因子适当下调利于妊娠维持;受体羊妊娠后NO含量适当升高为妊娠所必需,但含量过高时则妊娠失败.     

营养水平对妊娠早期母猪免疫状况及胚胎存活的影响

选用63头长白×大白杂交初产母猪,研究营养水平对初产母猪妊娠早期血清免疫球蛋白、子宫和胚胎干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β(IFN-β)、干扰素-γ(IFN-γ)、抗病毒蛋白(Mx1)、Toll样受体4(TLR4)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达及胚胎存活的影响.将配种后的母猪随机分到高、中、低3个营养水平组(采食量水平分别为2.73、1.64和0.82 kg·d-1).在妊娠第12、25和35天屠宰母猪收集血清、子宫组织及胚胎,利用免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白含量,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测目的基因在子宫和胚胎中的表达量.结果表明:①高、中营养水平组母猪血清免疫球蛋白含最显著高于低营养水平组(P<0.05),高、中水平组间差异不显著(P>0.05);②中水平组IFN-α、IFN-β、IFN-γ、Mx1、TLR4、IL-10在子宫和胚胎中的基因表达量显著高于低水平组(P<0.05),但低水平组TNF-α基因表达量显著高于中水平组(P<0.05),高、中水平组间差异不显著(P>0.05);③妊娠第12天,中水平组胚胎存活率显著高于高水平组(P<0.05),中、低水平组间差异不显著(P>0.05);妊娠第25和35天,中水平组胚胎存活率显著高于高、低水平组(P<0.05),高、低水平组间差异不显著(P>0.05).结论:高、中营养水平有利于妊娠早期母体对胚胎的免疫保护,严重限饲则显著降低母猪体液免疫水平,并下调子宫和胚胎中免疫相关基因表达,从而减弱母体对胚胎的免疫保护作用,不利于胚胎存活.