猪繁殖和呼吸综合征血清流行病学调查初报

用美国Ｈｃｒｄｃｈｃｋ猪繁殖和呼吸综合征病毒ＥＬＩＳＡ抗体检测试剂盒坚来自华北地区和华东地区８个ＰＲＲＳ可疑猪场共４７份血清进行检测。结果是；华北地区６个猪场，华东地区２个猪场ＰＲＲＳＶ抗体阳性检出率分别为５／６和０／２。８个猪场流产母猪，新生弱仔猪，有呼吸 状的育成猪及种公猪阳性栓率分别为１４／２０，５／１６，４／１０和１／１。表明ＰＲＲＳ在我国已经存在，并正在流行。     

IPMA检测猪生殖和呼吸综合征病毒抗体的研究

本研究在国内首次成功地建立了免疫过氧化物酶单层细胞试验（ＩＰＭＡ）检测猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体。应用ＩＰＭＡ检测了北京地区３个猪场９４份血清发现，英国株抗体阳性检出率为９．６％（９／９４），美国株Ｍ１的抗体阳性检出率为５１％（４８／９４）。同间接荧光抗体试验ＩＦＡ比较阳性检出率基本一致。利用ＩＦ和ＩＰＭＡ两种方法检测１８２份加拿大进口猪血清均有３头阳性，且编号相同，本试验证实了ＩＰＭＡ是一种检测ＰＲＲＳ抗体的有效方法，可应用于ＰＲＲＳ的血清学检测     

应用间接荧光抗体试验检测猪繁殖和呼吸综合征抗体

应用间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）进行了猪繁殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪场猪血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２０份，阳性率为９０９％；Ｌ猪场猪血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

应用间接接荧光抗体试验检测猪繁殖和呼吸综合征抗体

应用间接荧光抗体试验进行了猪繁殖和呼吸综合征血清抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪猪血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性性血清２０份，阳性率为９０．９％；Ｌ猪场猪血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

应用间接荧光抗体试验检测猪生殖—呼吸道综合征 固？

应用间接荧光抗体试验进行了猪生殖－呼吸道综合征病毒抗体的检测，共检测２个猪场，计２７份血清，其中Ｐ猪场血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２０份，阳性率为９０．９％，Ｌ猪场血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％，首次证实我区存在的ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

应用间接荧光抗体试验检测猪生殖-呼吸道综合征抗体

应用间接荧光抗体试验进行了猪生殖－呼吸道综合征病毒抗体的检测。共检测２个猪场，计２７份血清。其中Ｐ猪场血清２２份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２０份，阳性率为９０．９％；Ｌ猪场血清５份，检出ＰＲＲＳ阳性血清２份，阳性率为４０％。首次证实我区存在ＰＲＲＳＶ感染猪群。     

应用间接免疫荧光法从国内生殖障碍综合征猪群中检测生殖和呼吸综…

建立了间接免疫荧光抗体技术，并用此技术对国内生殖障碍综合征猪群和疑似生殖和呼吸综合征猪群进行了血清学调查，共检测了１０个地区的１０个猪场，计１５１份血清，在其中４个地区的４个猪场９９份血清样品检查出ＰＲＲＳ抗体阳性血清５８份，阳性率为５８．６％，另６个地区的６个猪场的５２份务     

用ELISA检测猪生殖和呼吸综合症血清抗体

用ＥＬＩＳＡ对青海部分猪群进行了ＰＲＲＳ血清抗体检测。检测了１１个县的３８个猪场和４乡６村３３农户，共计９７８份猪血清，检出ＰＲＲＳ阳性血清３３１份，阳性率为３３．８４％。说明青海省猪群中可能存在ＰＲＲＳ。     

斑点酶联免疫吸附试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体方法的建立

首次建立了斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ，美洲株）抗体的方法。特异性鉴定表明，ＰＲＲＳＶ不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清反应；与美国进口的ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ诊断试验盒检测结果比较，３５份猪血清的阴、阳性检出总符合率为８２．９％（２９／３５），其中Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性检出率略高于进口试剂盒的检出率。     

用单克隆抗体鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株

应用ＰＲＲＳＶ单克隆抗体,采用直接与间接免疫荧光抗体试验对分离获得的ＰＲＲＳＶ６个毒株进行了鉴定,结果所有分离毒株均能被单克隆抗体（ＳＤＯＷ１７、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ）所识别,呈现特异荧光,６个分离毒株均能与仅识别美洲型ＰＲＲＳＶ的单克隆抗体Ｆ反应,结果表明６个分离毒株均属于美洲型ＰＲＲＳＶ。利用微量细胞培养对分离毒株ＴＣＩＤ５０测定结果表明,６个分离毒株的ＴＣＩＤ５０分别为１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．５／０．１ｍｌ、１０－７．７５／０．１ｍｌ、１０－７．２５／０．１ｍｌ、１０－６．２５／０．１ｍｌ。病毒感染细胞的超薄切片电镜观察表明,在感染细胞浆内可见典型的ＰＲＲＳＶ病毒粒子,呈球形或椭圆形,直径约为６０ｎｍ左右,可见囊膜。     

鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗免疫期的试验研究

用三批减蛋综合征（ＥＤＳ）蜂胶佐剂灭活苗（９４０９１２、９４１０２４、９４１１２１）分别免疫成年产蛋母鸡，定期采血，连续检测ＨＩ抗体动态变化，这三批苗６个月的平均ＨＩ抗体滴度分别为７．７、８和７．７（Ｌｏｇ２）；用鸭胚做ＥＤＳＶ血清中和试验，其保护率均为１００％（５／５，５／５，５／５）；用ＥＤＳ２０６油苗和ＥＤＳ白油苗同时分别免疫蛋鸡，做平行对比ＨＩ抗体检测，其６个月的平均ＨＩ抗体效价分别为７．     

应用重组猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白为抗原建立I—ELISA检？…

用重组杆状病毒表达的钎生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）Ｎ蛋白作为抗原，建立了诊断猪生殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）的Ｉ－ＥＬＩＳＡ，与ＩＤＥＸＸ公司试剂盒检测结果的符合率为９７．３％，与间接 光抗体试验９ＩＦＡ）的符合率为１００％。用该方法的检测国内猪血清８５份，阳性率为１８．８％；能检出ＰＲＲＳ疫苗免疫猪６ｄ的血清抗体，；与猪瘟、伪狂犬病、猪巴氏杆菌病、猪霉形体病阳性血清无交叉反应。     

猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)单克隆抗体的研制

利用猪繁殖与呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）国内分离株Ｊ１,采用反复差速离心法制备免疫抗原,长程免疫法免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,用间接ＥＬＩＳＡ方法检测抗体,通过细胞融合技术,并经３次亚克隆获得了１０株能稳定分泌抗ＰＲＲＳＶ单抗的杂交瘤细胞单克隆株（Ａ１Ｄ７Ｈ１０,Ａ１Ｄ７Ｈ１１,Ａ１Ｅ７Ｈ９,Ａ１Ｅ７Ｄ９,Ａ２Ｄ８Ｅ７,Ａ２Ｄ８Ｂ１１,Ｂ３Ｄ１１Ｄ６,Ｂ２Ｇ９Ａ９,Ｂ２Ｇ９Ｆ２）。这些细胞经体外连续传     

中国结东地区猪生殖—呼吸道综合征病毒（S1株）ORF5—7基因特？…

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒分离株Ｓ１主要结构蛋白基因进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐ ＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５，ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲一美洲型ＰＲＲＳＶ相似。     

猪生殖与呼吸综合症研究进展（2）

猪生殖与呼吸综合症研究进展（２）陈书琨，王贵平（深圳动植物检疫局深圳５１８０１０）（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）１ＰＲＲＳ的流行病学１．１ＰＲＲＳ的发生和流行ＰＲＲＳ最初发生于美国。美国国家兽医服务实验室应用间接免疫荧光抗体试验（ＩＦＡ）...     

抗IBDV独特型抗体疫苗的制备与应用

应用提取纯化的抗ＩＢＤＶＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得２株（２Ｂ６株，５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，其能诱生ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独特型抗体的腹水。用此独特型抗体分别与福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂按１∶１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗，免疫接种ＳＰＦ鸡和普通京白公鸡，然后用ＩＢＤＶ野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒，保护率分别为８／８、１４／１４，从而证实抗独特型抗体疫苗有潜在的研究和应用价值。     

酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

建立的检测猪生殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为１．７ｍｇ／Ｌ，血清的最适稀释度为１：１００，酶标兔抗猪ＩｇＧ的家访工为１：２０００。比较试验表明，ＥＬＩＳＡ的敏感性优于间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）。用ＥＬＩＳＡ检测１９９１年从美国进口猪的血清７６份，阳性率为零；１９９５年从加拿大进口猪的血清１６３份，阳性率为５．５２％；北京地区甲猪场的血清１２１份，阳     

防制猪痢疾的新疫苗

通过两批试验猪检测的猪痢疾（ＳＤ）原型疫苗可产生抗猪痢疾密螺旋体（Ｔｈ）的高效价循环抗体。试验１在口服攻毒前免疫２次。攻毒后２周内，５／６的未免疫猪发生痢疾，而免疫猪只１／６发病。但攻毒后１个月。存活的那头未免疫猪和２头免疫猪却死于痢疾。试验２，将８头免疫３次的猪同感染猪混养后只有２头（２５％）发生严重痢疾，而未免疫猪却有７／８发病。表明ＳＤ原型苗能提供保护，并已实用于澳大利亚的猪痢疾防制? ?     

2001年猪病诊断和回顾

20 0 1年 ,我们对来自全国 2 0多个省市 3 0 0多个猪场的血清和组织器官样品进行了检测 ,共计检测样品数达 2万多份次 ,并到部分猪场现场临床检查和流行病学调查。现将我们对 2 0 0 1年规模猪场常见病的诊断和建议的防制对策及其效果总结如下 ,供参考。1　猪繁殖与呼吸综合征 (ＰＲＲＳ)全年共有 1 70个猪场送检 ,其中抗体阳性 1 3 0个场(未免疫 ) ,阳性率 76.5 %。检测样品 2 2 0 2份 ,其中抗体阳性 1 1 62份 ,阳性率 5 2 .8%。在这些送检猪场中 ,ＰＲＲＳ引起母猪早产、死胎等繁殖障碍的现象有所减少 ,而主要表现为 1 0日龄以上哺乳仔猪和…     

中国华东地区猪生殖-呼吸道综合征病毒(S_1株)ORF_(5～7)基因特征研究

本研究对我国华东地区猪生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）分离株Ｓ１主要结构蛋白基因（ＯＲＦ５～７）进行了ＰＣＲ扩增和ＤＮＡ测序分析。结果表明，长度为１５２０ｂｐＤＮＡ序列含有３个阅读框ＯＲＦｓ，即ＯＲＦ５、ＯＲＦ６和ＯＲＦ７，ＯＲＦ５和ＯＲＦ６及ＯＲＦ６和ＯＲＦ７间有部分碱基重叠，且与欧洲型和美洲型ＰＲＲＳＶ相似。ＯＲＦｓ推导的氨基酸序列与美国ＶＲ２３３２和欧洲ＬＶ毒株同源性分析为９９％～１００％和５９％～７８％。ＯＲＦｓ预测的蛋白质分子量、等电点、糖基化位点、亲水性分布图及跨膜螺旋区与ＶＲ２３３２毒株相似。