ELISA技术及其在禽病诊断中的应用

ELISA,在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay),在国内有人译作酶联免疫吸附试验,它是一种免疫测定,是把抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种非放射性标记免疫检测技术。近年来,随着单克隆抗体技术和酶标记技术的发展与应用,市场上已出现了各种各样的商品化ELISA试剂盒,广泛应用于临床医学、动植物食品检验、生物学研究等领域。本文主要是对ELISA技术的基本原理、类型、影响因素及其目前在禽病诊断中的应用加以综述。1ELISA技术简介1.1ELISA基本原理ELISA是以免疫…     

免疫酶技术在弓形虫病诊断和流行病学调查中的应用

近年来,免疫酶技术以其高度的特异性和敏感性,在弓形虫病诊断和流行病学调查中得到了广泛应用,从而推动了弓形虫病的防治研究进入了一个新阶段。本文就几种常用的免疫酶方法在弓形虫病的应用概述如下: 一、酶联免疫吸附试验(ELISA) 1971年Engvall和Van Weeman等首次创立ELISA技术。其基本原理就是用酶催化底物反应的生物放大作用,提高抗原抗体免疫学反应的检测敏感性。Volley等首先将ELISA用于检测弓形虫病患     

酶联免疫吸附试验(ELISA)在畜禽饲养及疾病诊断中的应用

酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)是把抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种非放射性标记免疫检测技术。自1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weeman和Schuurs建立这种检测方法以来,随着单克隆抗体技术和酶标记技术的发展与应用,市场上已出现了各种各样的商品化ELISA试剂盒,广泛应用于临床医学、动植物食品检验、生物学研究等领域。本文主要是对ELISA的方法及其应用作一介绍,旨在促进该技术在畜禽饲养及传染病诊断方面的应用和推广。1ELISA简介1.1ELISA基本原理EL…     

三种检测禽副粘病毒2型(PMV-2)抗体方法的建立及其与HI方法的比较

建立了检测血清中禽副粘病毒2型（PMV-2）抗体的间接免疫荧光试验（IFA）、间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）以及斑点酶联免疫吸附试验（Dot—ELISA）方法，并将三种方法同血凝抑制试验（HI）进行了比较。结果表明，建立的IFA、间接ELISA和Dot—ELISA等三种抗体检测方法其敏感性、特异性均很好，与HI方法相比，敏感性也大大增强。     

酶联免疫吸附试验（ELISA）在畜禽饲养及疾病诊断中的应用

酶联免疫吸附试验（enzyme-1inked immunosorbent assay，ELISA）是把抗原抗体反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种非放射性标记免疫检测技术。自1971年瑞典学者Engval1和Perlmann,荷兰学者Van Weeman和Schuurs建立这种检测方法以来，随着单克隆抗体技术和酶标记技术的发展与应用，市场上已出现了各种各样的商品化ELISA试剂盒，广泛应用于临床医学、动植物食品检验、生物学研究等领域。本文主要是对ELISA的方法及其应用作一介绍，旨在促进该技术在畜禽饲养及传染病诊断方面的应用和推广。     

猪胸膜肺炎放线杆菌间接ELISA检测方法的建立

【摘 要】用纯化的重组蛋白抗原作为ELISA包被抗原,通过对抗原包被浓度、血清稀释倍数、酶标二抗稀释倍数、抗原和血清反应时间、血清和酶标二抗反应时间、显色剂作用时间和中止液滴加量的优化,建立了检测胸膜肺炎放线杆菌抗体的间接ELISA方法。通过特异性实验证明该ELISA方法特异性较强。将建立的ELISA方法与IDEXX公司的标准试剂盒进行了比较,二者的符合率较高,说明建立的ELISA方法比较敏感,为ELISA检测方法的商品化奠定了基础。     

用酶联免疫吸附法检测进口奶牛血清中抗牛传染性鼻气管炎病毒抗体试验报告

酶联免疫吸附试验(ELISA)具有较高的灵敏度、快速,经济、便于自动化等优点,已广泛运用于病毒病的快速诊断。国外用ELISA测定牛血清中抗牛传染性鼻气管     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

酶联免疫测定法在生殖激素测定及兽医产科中应用的研究进展

本文根据最新资料,对酶联免疫测定的方法及其在兽医产科中的应用作了较详细的论述。在测定动物体液中的激素方面,以非均相ELISA应用最广。在ELISA测定系统中,用聚苯乙烯微量滴定板作为固相,分离方法比较简便;应用单克隆抗体比多克隆抗体优越;所用的酶是HRP,HRP的最佳底物是TMB。用ELISA测定生殖激素,可进行早期妊娠诊断、监定发情、排卵、预测分娩时间,监控母畜产后卵巢机能、诊断生殖系统疾病等。ELISA可以代替RIA作为兽医基础研究和临床诊断的工具。     

应用HRP—SPA间接免疫酶染色观察实验性牛弓形体病主要脏器中虫体的分布

自从1966年Avrameas创建免疫酶技术检测体液中的可溶性抗原和抗体成分以来,免疫酶技术被广泛应用。1976年Voller首先应用ELISA检测弓形体抗体,此后,林继煌等应用酶标抗体直接染色法检查猪和兔     

浅析实验室常规ELISA检测

ELISA即酶联免疫吸附试验,ELISA是一种敏感性高、重复性好的固相酶联免疫测定广泛用于各种抗原抗体的检测,本文介绍了实验室常规ELISA试验的基本原理、操作要领及注意事项,供基层畜牧兽医站工作人员参考.     

基于ELISA技术检测流感病毒的研究进展

流行性感冒是流感病毒引起的传染性强、传播速度快的呼吸道感染疾病。酶联免疫吸附检测(ELISA)技术灵敏度高、特异性强、操作简单等优点,受到人医、兽医、食品、化学等领域科研工作者的青睐;为了更快发现和了解流感的踪迹,科研工作者建立了不同的ELISA技术用于检测流感病毒。文章综述国内外检测流感病毒的ELISA技术研究进展,指出了ELISA技术在实践应用中存在的部分问题,为ELISA检测流感病毒方法的建立提供参考,并对该技术的应用前景进行了展望。     

兽医实验室酶联免疫吸附试验操作要点

酶联免疫吸附试验(ELISA)是兽医实验室常用检测方法,具有灵敏度高、特异性强以及操作简便等特点。为了刚好地使用ELISA方法进行疫情检测以及疫病诊断,本文总结了常见ELISA试验各个操作步骤的注意事项,为广大实验员提供获得更准确有效的实验结果提供参考。     

大豆胰蛋白酶抑制因子酶联免疫吸附测定方法的研究

本研究以纯化的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子（KTI）为抗原，对兔子进行35天免疫得到了兔抗KTI血清。分别用辣根过氧化物酶（HRP）标记纯化的抗原与抗体，制备了标记适度的酶标抗原与酶标抗体。建立了3种检测KTI含量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，即酶标抗原竞争、酶标抗体直接抑制和问接抑制法。结果表明，抑制率在20％～70％范围之内，3种方法得到的标准曲线均呈现良好的线性关系（r＞0．96），且检测下限均低于20ng／ml。根据得到的标准曲线，用酶标抗原竞争ELISA法测定了不同温度热处理的KTI中剩余活性部分的含量。结果表明，ELISA法与酶化学分析法的测定结果高度相关（r＝0．99），同时样品添加的回收率试验误差小于10％。酶标抗原竞争法还被用来测定了不同温度热处理的大豆和熟豆粕、全价饲料等几种大豆产品中KTI的含量。以上结果说明，用ELISA法检测生大豆和不同热加工形式的大豆产品中的剩余KTI含量是可行的。     

斑点—酶联免疫吸附试验在兽医寄生虫病诊断中的应用

近年来,许多人致力于研究快速、简便和经济的免疫学诊断技术。Engvall 等1972年建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。然而,这种技术同样有许多缺点,如需专门的 ELISA 反应板、洗涤器以及光度计;孔与孔之间的差异造成所谓的“边缘效应”。Hawkers 等1982年根据硝酸纤维素膜     

ELISA技术在犬病毒与抗体检测中的应用

<正>ELISA即酶联免疫吸附测定,是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性、特异性较高的试验技术。比较常用的ELISA方法有双抗体夹心法和间接法。     

酶联免疫吸附试验中常见问题的产生原因及解决办法

用酶标记物进行免疫学检测的方法称为酶联免疫吸附试验(ELISA)。该技术诞生于20世纪70年代初,可进行定性或定量分析,主要有间接ELISA、阻断ELISA、双抗体夹心ELISA三种方法。目前该技术在猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪链球菌病、猪圆环病毒病、猪传染     

基于卵黄抗体的副溶血弧菌间接ELISA快速检测方法的建立

本文主要研究了以水产致病性哈氏弧菌为抗原,免疫SPF蛋鸡,制备特异性卵黄抗体,从抗体的提取、纯化等方面进行了进一步的优化研究;建立基于Ig Y的快速、准确、定量的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原菌浓度的技术;建立基于Ig Y的间接ELISA测定抗原浓度的技术方法,确定抗原包被浓度、一抗Ig Y和酶标二抗最适稀释倍数,抗原包被条件的选择,底物的最佳反应时间等间接ELISA的实验条件。建立了基于Ig Y的间接ELISA测定哈氏弧菌的方法,试验的最佳反应条件为:抗原最适工作浓度浓度为1×108cfu/ml,包被4℃过夜;一抗Ig Y稀释度分别为1:28;购买的兔抗鸡Ig Y-HRP酶标抗体作1:20000稀释;选择底物的最佳反应时间为20min。     

ELISA操作要求及质量控制

酶联免疫吸附试验（ELISA）是医学检验的免疫学检验方法之一,已广泛应用于对病原微生物的免疫学检查试验中。用ELISA法检测是目前最常用的实验室检验方法之一。与任何实验室检查方法一样,ELISA存在少量的假性结果（假阳性、假阴性）,对临床诊断和治疗会有一定影响。目前,ELISA已经普遍使用洗板机、全自动酶标分析仪,使试验数据的准确性和真实性都有明显提高。但试验设备的自动化并不代表试验数据100％可靠,还要求试验人员具备扎实的专业知识和熟练的试验操作技术,并且要对实验室的内外环境进行适时监控,从试验软件、仪器设备、操作程序、人员素质及环境监控等方面确保试验结果的准确性和可靠性。     

ABC-ELISA检测桑蚕浓核病毒(DNV)简报

生物素——亲和素系统(Biotin-AvidinSystetem.BAS)最近几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度、特异性和稳定性,在免疫化学等领域得到广泛应用。BAS与酶联免疫吸附试验(ELISA)相结合的ABC-ELISA法可提高普通ELISA的敏感性,能同放射免疫