大米蛋白胃蛋白酶酶解物体外抗氧化作用的研究

本试验采用正交设计,以羟自由基清除率为评定指标,用胃蛋白酶酶解大米蛋白,旨在确定其酶解物体外抗氧化作用最佳的酶解条件。试验结果表明:当酶解温度为37℃时,影响大米蛋白胃蛋白酶酶解物抗氧化效果的因素大小排序为:pH酶浓度底物浓度酶解时间;最佳酶解条件为:pH1.4、酶浓度5%、底物浓度8%、酶解120min,此条件下酶解物的羟自由基清除率为72.78%,多肽浓度为5.49mg/mL,水解度为15.62%。     

响应面优化枯草杆菌复合酶法提取罗非鱼皮多肽饲料添加剂工艺研究

本试验以罗非鱼鱼皮为原料,经酸碱处理后,加热熬制得到胶原蛋白,再用复合蛋白酶水解制备罗非鱼皮胶原蛋白肽。研究pH、温度和酶添加量对罗非鱼鱼皮酶解消化的影响,并采用响应面法优化枯草杆菌复合酶法提取鱼皮多肽饲料添加剂工艺。结果表明：枯草杆菌复合酶法提取鱼皮多肽饲料添加剂的最佳工艺参数为：酶解pH7.64、温度50.30℃、加酶量1.55%,在此操作条件下,多肽的提取率最高,为14.63%。此提取工艺参数优良,稳定性强,可以为鱼皮多肽饲料添加剂的研发与运用提供理论依据。     

酶解制备柞蚕蛹多肽及柠檬酸改善风味研究

研究柞蚕蛹多肽制备工艺及改善风味,采用中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶6种蛋白酶酶解柞蚕蛹蛋白制备柞蚕蛹多肽,并通过单因素和响应面试验设计优化两种最适酶类酶解工艺,采取灭酶时向酶解液中添加柠檬酸改善柞蚕蛹多肽风味。结果显示:中性蛋白酶和复合蛋白酶制备柞蚕蛹多肽效果较好,二者水解度分别为19.60%和19.97%,多肽含量分别为11.30%和13.50%。最佳制备工艺为:液料比20∶1,反应时间9 h、反应温度52℃、pH 7.0,酶添加量2%(双酶比为1∶1),所制备的酶解液在4℃下透析48 h脱盐,过滤后真空干燥,制得柞蚕蛹多肽粉。试验结果表明:制备柞蚕蛹多肽时可选择中性蛋白酶和复合蛋白酶,此外柠檬酸添加量为0.5%时可改善柞蚕蛹多肽的风味,同时不影响原有的鲜味。     

液体发酵法制备米糠肽工艺条件的研究

以脱脂米糠粕为原料,采用枯草芽孢杆菌发酵生产米糠多肽。通过单因素和正交试验的方法,确定最佳发酵条件。结果表明:发酵温度40℃,发酵时间3 d,接种量12%,米糠粕质量分数8%,各因素对水解度影响的主次顺序为发酵时间接种量米糠粕质量分数发酵温度。优化后,该菌株发酵米糠粕后的多肽溶液水解度为23.16%。     

不同酶水解玉米黄浆蛋白抗氧化功能比较研究

研究不同酶对玉米黄浆蛋白水解度及水解后产物的生物活性影响,通过单酶水解及双酶同步与分步水解,对水解度及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除能力进行比较,研究玉米黄浆蛋白酶解方法与水解物的抗氧化功能的关系,筛选出最佳酶组合。结果表明:单酶水解时,碱性蛋白酶水解玉米黄浆蛋白的水解物清除自由基能力最好,清除DPPH自由基能力达71.38%;双酶分步水解的效果比双酶同步水解效果好,清除DPPH自由基能力最好在pH为7条件下进行,先加中性酶后加碱性酶的DPPH自由基清除能力强于其他加酶方法和加酶组合,清除率高达81.28%。因此选择先加中性蛋白酶再加碱性蛋白酶作为水解玉米黄浆蛋白的最佳工艺。     

绵羊乳酪蛋白血管紧张素转换酶抑制肽的制备与鉴定

以绵羊乳酪蛋白为原料,采用中性蛋白酶水解制备生物活性肽,研究酶解时间对酶解产物水解度和血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制率的影响,利用液相色谱-质谱联用技术对水解产物进行分析和鉴定,筛选具有潜在ACE抑制作用的生物活性肽。结果表明：酶解时间达到300 min时,水解度最高值达9.65%,ACE抑制率为84.55%;当ACE抑制率达到50%时,所需肽段YYQQRP浓度为5～10 μmol/L;利用超高效液相色谱飞行时间质谱仪对酶解后的多肽进行序列分析,     

胰蛋白酶水解蝇蛆蛋白粉的工艺研究

本文研究了中性条件下胰蛋白酶对蝇蛆蛋白的水解,用甲醛滴定法对蛋白质的水解度进行测定,并用水解度表征其反应历程,分析了底物浓度、酶浓度、时间、pH和温度对水解度、水解速度的影响,得出最佳水解工艺条件.利用高效液相色谱对最佳条件下水解液的多肽分子量分布进行分析,结果表明该水解产物多肽分子量多数小于15000D.     

固态发酵生产豆粕多肽饲料的温度分段调控研究

试验研究温度分段控制对豆粕固态发酵生产豆粕多肽饲料的影响。选用普通饲料豆粕为原料,米曲霉作为发酵菌种,在对菌株生长性质和蛋白酶学性质研究的基础上,以豆粕蛋白水解度为测定指标,对影响菌株发酵豆粕制备大豆肽的温度因素进行了分段研究,并运用混料设计法对不同温度的不同时间段进行了优化预测及验证。结果表明:在用米曲霉固态发酵豆粕的过程中,通过温度分段控制,可以达到生产多肽饲料的目的(豆粕蛋白水解度10%以上),并得到了最优发酵条件:0～33.5 h、26℃;33.5～50 h、23℃;50～65 h、45℃,在此条件下,豆粕蛋白的水解度为19.5%。温度分段控制对固态发酵生产豆粕多肽饲料影响明显,可大幅度提高豆粕蛋白的水解度(比原有工艺提高了140%)。     

蝇蛆生物活性肽的生产工艺研究

以蝇蛆为试验材料,设酶解温度、复合酶量、酶配比、酶解时间和Ph值5个因素,每个因素4个水平进行L16(45)正交试验设计,以水解度作为评价指标,筛选脱脂蝇蛆粉的最佳酶解条件.结果表明:脱脂蝇蛆粉的最优酶解条件为A183C3D4E3,即温度(A)45℃,酶量(B)8000U/g,风味酶:木瓜酶:胃蛋白酶:胰蛋白酶的配比(C)是35%:50%:5%:10%,酶水解时间(D)为7 h,Ph(E)为7.5.脱脂蝇蛆粉溶液水解度的最大影响因素为酶解温度.     

鸭血球短肽的优化制备及其特性研究

本试验旨在筛选水解效率高且脱色效果好的商业蛋白酶,建立血球短肽的优化工艺,比较其在酶解前后营养特性的变化,研究其功能特性与体外抗氧化能力,以研发功能性血球短肽产品,为家禽血液资源高值化的转化利用与深度挖掘提供理论依据与技术借鉴。比较酶种类、酶浓度、温度、p H、水解时间等因素对蛋白酶水解度(DH)、脱色程度、水解物产量的影响,采用正交试验设计优化血球短肽的最佳工艺,对血球短肽进行营养价值、功能特性及抗氧化性能评价。确定酸性蛋白酶为最佳水解酶,其水解鸭血球蛋白制备短肽的最优工艺参数为:酶用量6 000 U/g,温度50℃,p H 3.5,水解时间7.0 h。在此条件下,水解度为(25.10±0.65)%,水解物产量为(60.09±1.77)%。通过高效液相色谱分析水解产物分子质量分布。结果表明,酶解对血球蛋白有明显的降解作用,酶解产物主要以3 ku以下的短肽为主,其中1 ku以下占大部分(62.82%)。血球短肽粉呈乳白色,氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量丰富(53.31%),鸭血球蛋白酶解后的溶解性大大提高(60%),且具有良好的乳化稳定性。血球短肽清除自由基能力较强,随血球蛋白浓度的提升,清除1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH·)与超氧阴离子能力随之愈强,还原力也逐渐增加。由此可见,酸性蛋白酶可有效水解鸭血球蛋白获得氨基酸含量丰富、溶解性好且具有抗氧化活性的乳白色血球短肽,可以作为功能性原料应用于食品与饲料中。     

响应曲面法优化梅花鹿鹿角盘胶原蛋白提取工艺

以梅花鹿鹿角盘为原料,运用响应曲面法优化鹿角盘胶原蛋白提取工艺。以胶原蛋白提取率为指标,在单因素的基础上,选取p H值、加酶量、酶解温度、酶解时间4个因素进行4因素4水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响,得出鹿角盘胶原蛋白的最佳提取工艺,根据实际情况修正为p H 1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间4 h。在此条件下,鹿角盘胶原蛋白提取率可达到80.10%。     

Optimization of Fermentation Conditions for Corn Gluten Meal by Mixed Strains

The objective of this experimentation was to optimizate the fermentation conditions for corn gluten meal by four different bacterial strains (Aspergillus niger,Lactobacillus,yeast and Bacillus licheniformis) through the acclimatization test of strains for hydrolysis corn gluten meal,orthogonal experimental of strains proportion determination and fermentation condition (temperature,time,moisture content and initial pH) and taking the peptides yield rate as an index.And then the crude protein,yield of peptides,total sugar,reducing sugar and amino acid constitute of corn gluten meal fermented at the optimal condition were determined. The results showed that the inoculation proportion of Bacillus licheniformis,Lactobacillus,yeast and Aspergillus niger were 4%,4%,6% and 6%,respectively. The optimal conditions for fermentation was that the fermentation temperature,fermentation time,moisture content and initial pH were 35℃,84 h,45% and 6,respectively,and the peptides yield rate was 44.03%.During fermentation,the crude protein content and peptides yield were increased.At the end of the fermentation,the content of crude protein,peptides yield rate,reducing sugar,total essential amino acid and total amino acid and were increased by 15.17%,205%,850%,12.58% and 12.37%,respectively.     

复合菌发酵玉米蛋白粉的条件优化

试验旨在研究复合菌（黑曲霉、乳酸菌、酵母菌和地衣芽孢杆菌）发酵玉米蛋白粉的优化条件。通过各菌种玉米蛋白粉水解驯化试验、菌种混合比例及发酵条件（温度、时间、含水量及初始pH）的正交试验,以玉米蛋白粉多肽得率为指标,确定发酵玉米蛋白粉的最优发酵条件。并在此条件下,测定发酵液中粗蛋白质、总糖、还原糖、氨基酸含量以及多肽得率。结果显示,正交试验优化的最佳接种比例为地衣芽孢杆菌4%、乳酸菌4%、酵母菌6%、黑曲霉6%,最佳发酵条件为发酵温度35℃、发酵时间84 h、含水量45%、初始pH为6,在此条件下多肽得率为44.03%。在发酵过程中,粗蛋白质含量和多肽得率呈上升趋势,发酵终止时,粗蛋白质含量提高了15.17%,多肽得率提高了205%,还原糖含量提高了850%,总必需氨基酸和总氨基酸含量分别增加了12.58%和12.37%。本试验结果可为扩大玉米蛋白粉的应用提供科学依据。     

组合酶水解羽绒加工副产物工艺参数的优化

本研究旨在对来源于地衣芽孢杆菌CP-16的重组角蛋白酶和二硫键还原酶协同酶解羽绒加工副产品最佳工艺条件进行探讨。试验探讨角蛋白酶与二硫键还原酶组合水解羽毛角蛋白的适宜比例，并研究蒸汽压力处理时间、酶解时间、组合酶添加水平和水分含量等单一因素对酶解效率的影响，再利用L9（3⁴）正交试验进一步优化处理工艺条件。结果显示，当角蛋白酶与二硫键还原酶的酶活比例为80：1，角蛋白酶终浓度为90 U/mL时，组合酶酶解羽绒加工副产品效率最佳；经压力处理2 h更有利于提高酶解效率；水解60 h酶解率最高，但与48 h差异不显著（P>0.05）；总反应体系中缓冲液为5.5 mL时酶解效率显著高于对照组（P<0.05），但与4.5 mL组差异不显著（P>0.05）。正交试验优化酶解羽绒加工副产品条件发现，影响组合酶酶解效率的因素由大到小依次为压力处理时间、酶解时间、酶剂量；酶解羽绒加工副产品最适条件为：角蛋白酶与二硫键还原酶活性比例为80：1，121℃高压处理2 h，角蛋白酶终浓度为90 U/mL，50℃酶解48 h，此时1 g羽绒加工副产品产生的上清液可溶性蛋白含量为352.72 mg，比对照组提高640.26%。综上，利用多种处理工艺相结合更有利于提高组合酶水解羽绒加工副产品的效率。本试验结果可为羽绒加工副产品资源开发利用提供理论指导。     

Optimization of Process Parameters of Hydrolyzed By-product of Combined Enzyme Down Processing

The aim of this study was to explore the optimal technological conditions for the synergistic enzymatic hydrolysis of feather processing by-products by recombinant keratinase and disulfide bond reductase from Bacillus licheniformis CP-16.Firstly,the appropriate proportion of keratinase and disulfide bond reductase was explored in this experiment.Secondly,the factors affecting the treatment of combined enzymes were studied,including steam pressure treatment time,enzymatic hydrolysis time,combined enzyme addition level and water content.Finally,L9(3⁴) orthogonal test was used to further optimize the processing conditions.The results were as follows:When the enzyme activity ratio of keratinase and disulfide bond reductase was 80：1 and the final concentration of keratinase was 90 U/mL,the combined enzyme had the best efficiency in feather hydrolysis.Pressure treatment of feather keratin for 2 h was more conducive to hydrolysis of feathers processing by-products by combined enzymes.Feather hydrolysis rate was the highest at 60 h hydrolysis,but it was not significantly different from that at 48 h (P>0.05).The efficiency of feather enzymatic hydrolysis in the total reaction system with 5.5 mL buffer was significantly higher than control group(P<0.05),but the difference was not significant compare to the group with 4.5 mL buffer (P>0.05).The results of orthogonal test showed that,the factors affecting the hydrolysis efficiency were pressure treatment time,enzymolysis time and enzyme dosage from large to small.The optimal conditions for feather enzymatic hydrolysis were:The ratio of keratinase to disulphide bond reductase was 80：1,121 ℃ for 2 h,the final concentration of keratinase was 90 U/mL,and the enzymatic hydrolysis was conducted at 50 ℃ for 48 h.At this condition,the soluble protein content of supernatant produced of each gram feather was 352.72 mg,which was 640.26% higher than that of the control group.In conclusion,the combination of multiple treatment processes was more conducive to improving the efficiency of hydrolysis of feathers processing by-products by combined enzymes.The study could provide guidance for the development and utilization of feather resources.     

犬类诱食剂中酶解反应与美拉德反应最佳条件优化研究

试验旨在开发一款适用于干犬粮的诱食剂,研究犬类诱食剂中酶解反应与美拉德反应的最佳条件.试验选用鸡胸肉、鸡心、鸡肝为主要原料,采用木瓜蛋白酶进行水解,在酶解液中添加木糖和L-半胱氨酸,利用美拉德反应产物制备适合犬类的诱食剂.采用单因素和正交试验,以水解度为考核指标,研究水解反应过程;通过感官评价及动物试验探索最佳美拉德反...     

鱿鱼皮胶原蛋白提取前处理的条件优化

试验测定了鱿鱼皮的基本组成成分,探索了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白时前处理的最佳条件。选定了4个因素3,个水平,采用L9(34)正交试验确定了最佳条件。结果表明4,个因素NaOH浓度,NaOH作用时间、异丙醇浓度、活性炭浓度的最佳选择分别为0.15 mol/l、6 h、12%、0.8%,此时提取的胶原蛋白含量为11.08%,提取率为93.6%。     

组合微生物利用发酵秸秆产乳酸效果的研究

为了更好的利用玉米芯、玉米秸秆等农业废弃物,提高其综合利用率,减少传统化学方法及秸秆焚烧过程造成的环境污染,试验采用里氏木霉与鸡腿菇混合发酵产粗酶液降解秸秆等废弃物,再利用米根霉将废弃物转化为乳酸。此试验中以商品纤维素酶处理的玉米芯及秸秆为对照进行乳酸发酵试验。鸡腿菇与里氏木霉按5∶2的接种比例,接种时间间隔为12h,在26℃,150r/min培养3d,此时漆酶酶活比鸡腿菇单独发酵酶活提高106%。用以上两菌混合发酵3d的粗酶液在50℃,pH5.0,120r/min下酶解原材料84h,酶解得率为55.2%,米根霉再转化酶水解液产乳酸量为3.69g/L,糖酸转化率为67.40%。     

甘薯膳食纤维提取工艺的研究

试验模拟甘薯淀粉提取过程获得甘薯渣,通过单因素与正交试验研究了各种酶添加量对膳食纤维提取率的影响,确定糖化酶为主要酶,并且通过正交试验确定了糖化酶酶解条件(温度、时间、pH值)的最优组合。试验结果表明,各种酶的最适添加量分别为:α-淀粉酶1.4mL/g、胰蛋白酶0.5mL/g、糖化酶为5.0mL/g,其中,糖化酶是影响提取率的主要酶。糖化酶酶解的最佳工艺条件为:温度60℃,时间40min,pH值4.5。在最优工艺条件下制备甘薯渣膳食纤维产品,对产品进行分析表明,总膳食纤维提取率为81.6%,其中可溶性膳食纤维提取率可达25.7%,甘薯渣膳食纤维的膨胀力和持水力分别达到3.42mL/g和665%。