种公牛精液冷冻保存的研究进展

本文分析从精子的生理特性,冷冻保存的原理,不同稀释液对精子冷冻效果的影响,抗氧化剂在种公牛精液冷冻保存中的应用进展,不同保存环境对解冻后精液品质的影响等方面综述了公牛精液冷冻,保存解冻的研究进展。     

影响猪冻精质量因素的研究进展

精液冷冻保存作为精液长期保存的最佳方法,具有保存时间长、生产成本低等优点,但由于猪精子较其他物种更容易受到低温的损伤,导致猪精液冷冻后精子活力低、受精率低,从而限制了冻精在养猪生产中的广泛使用。为优化猪精液冷冻-解冻方法,提高猪冻精质量,本文基于猪精液冷冻保存的损伤机理,从冷冻前处理、精液稀释液、冷冻和解冻程序等方面对影响猪精液冷冻质量的因素进行了详细阐述和总结。     

金华猪精液冷冻保存技术研究

本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。     

提高早胜公牛冷冻精液品质的因素分析

为提高早胜牛冷冻精液的品质,研究了稀释液中添加不同浓度的海藻糖,解冻温度、解冻时间和生产中常见的解冻后保存运输方法等对精液品质的影响。结果表明:在果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油稀释液中,分别添加不同浓度的海藻糖(0.000、0.025、0.050、0.075和0.100 mol/L)对早胜牛精液进行稀释,各试验组均对冻精的精子活率、畸形率、顶体质膜完整率和精子存活时间产生不同程度的改善,其中,以0.050 mol/L的效果最好(P<0.01)。75℃快速解冻精子品质显著高于另外两种解冻方法(38℃、12℃解冻)(P<0.05),但仅适用于短时间保存。而38℃解冻后保存于0～5℃下的精液品质符合国家输精标准的时间较长。     

3种稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响

旨在评价不同种类稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响。配制柠檬酸-Tris（1号）、磷酸盐（2号）和OviXcell（3号）3种稀释液,采集8只乐至黑山羊新鲜精液,采用上述稀释液进行冷冻保存;测定并比较添加不同稀释液冷冻保存的山羊精液在采集后、平衡后以及解冻后的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率。结果表明：在3种稀释液中,添加OviXcell稀释液（3号）的精液其解冻后精子活力和顶体完整率均最高,精子畸形率最低。提示OviXcell稀释液更适用于乐至黑山羊精液的体外冷冻保存。     

不同稀释剂对梅山猪精液冷冻保存效果的研究

为了探讨稀释剂对梅山猪精液冷冻保存效果的影响,本文选用3种不同的常温稀释液进行常温保存试验,结果发现配方Androhep(A)、Schonow(B)优于葡-柠-EDTA(C)。选用常温配方A、B与3种冷冻稀释液进行配伍组合试验,应用液氮熏蒸法制成试管冻精,结果表明:1A稀释液组合在精子活力和顶体完整率均优于其他组合,解冻后精子活率最高达0.55;不同时间点保存效果检测结果显示,解冻后精子活力和顶体完整率指标稳定。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

海带多糖对猪精液冷冻效果影响的研究

为了寻找一种可较好地保护精子的天然抗冻剂,通过在猪精液的冷冻基础液中添加不同浓度的海带多糖,研究冷冻后猪精子的活率及线粒体活性、精子质膜和顶体的完整性等各项参数指标,探讨不同浓度的海带多糖对猪精液冷冻保存效果。     

猪精液超低温冷冻保存研究进展

猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。     

冷冻保存对猪精液品质的影响

<正>近年来,随着养殖业的发展和人们对食品质量的要求不断提高,猪精子的保存和运输成为养殖业界关注的焦点之一。冷冻保存作为一种常用的精子保存方法,被广泛应用于猪精液的收集、保存和运输过程中。然而,冷冻保存对猪精子品质的影响一直是一个备受争议的话题。因此,了解冷冻保存对猪精子品质的影响,对优化猪精液的保存和使用具有重要意义。本文旨在通过综述目前已有的研究成果,探讨冷冻保存对猪精子品质的影响,进一步分析影响因素以及可能的改善策略。     

不同解冻程序对荣昌猪冷冻精液解冻效果的影响

为优化猪冷冻精液解冻程序,本研究使用3种解冻液(M、J和C)对荣昌猪冷冻精液进行解冻,检测冷冻精液在不同解冻温度(32、37、42、47、52℃)和不同解冻时间(10 s或20 s)解冻后的精子活率、精子活力、快速前进运动精子数和慢速前进运动精子数,并使用因子分析法评估不同解冻液最佳解冻程序。结果显示:解冻液M在保存指标和持续指标方面较优;解冻液J在即时指标和持续指标方面较优;解冻液C在持续指标方面较优。综合分析表明,解冻液M和解冻液J的最佳解冻程序为42℃水浴解冻20 s,解冻液C的最佳解冻程序为32℃水浴解冻20 s。     

抗氧化剂在猪精液冷冻保存技术中的应用

近年来,在猪精液冷冻保存技术中应用抗氧化剂以提高冷冻精液质量的研究受到了广泛关注。国内外相继报道,添加甲基黄嘌呤、丁羟甲苯、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和过氧化物酶、维生素E及褪黑素等抗氧化剂可以有效改善冷冻保存猪精液的精子运动学参数,保护精子质膜、顶体和DNA完整性,提高冷冻-解冻后精子的受精能力。为了更好地了解抗氧化剂的抗精子冷冻损伤的作用机制、客观地评价不同抗氧化剂的应用效果及展望其在猪精液冷冻保存技术中的应用前景特综述如下。     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

绵羊冻融精子过氧化氢酶活性变化的研究

为了研究冷冻保存对绵羊精液过氧化氢酶(CAT)活性的影响,从而提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用CAT比色法对冷冻保存前后绵羊精子和精清中CAT活性进行了研究。结果表明:与冷冻前相比,冷冻保存后绵羊精子中CAT活性极显著降低(P0.01);精清中CAT活性极显著升高(P0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子和精清中CAT的活性造成了很大影响;冷冻后精子活率与精子CAT活性呈显著正相关(r=0.887,P0.05),冷冻前精子活率与精子CAT活性呈极显著正相关(r=0.987,P0.01)。说明绵羊精子中CAT的活性与精子活率密切相关,可作为绵羊精液品质评价的参考指标。     

冷冻保存对绵羊精子谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响,提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用5,5-二硫二硝基苯甲酸(DTNB)比色法对冷冻保存前后绵羊精液、精子和精清中GSH-Px活性进行研究。结果表明:冷冻保存后绵羊精液GSH-Px活性[(6.25±2.80)U/mL]与冷冻前[(9.48±2.37)U/mL]相比极显著降低(P0.01),冷冻保存后绵羊精子GSH-Px活性[(4.84±1.92)U/mL]与冷冻前[(7.58±2.67)U/mL)]相比显著降低(P0.05),说明冷冻保存对绵羊精液和精子GSH-Px活性造成了严重损伤。冷冻前后精子活率与精子中的GSH-Px活性均呈极显著正相关(P0.01),GSH-Px活性与精子活率关系密切,可作为绵羊精液品质评价的新指标。     

菟丝子提取物对猪精子冷冻效果的影响

在猪精液冷冻液中添加不同浓度的菟丝子提取物,研究冻后精子的形态正常率、质膜完整率、SOD活性及MDA含量,探讨菟丝子提取物对猪精液冷冻保存效果。结果表明,冷冻-解冻后,猪精子形态正常率、质膜完整率和SOD活性均显著降低,MDA含量显著高于对照组(P<0.05)。各冷冻组相比,菟丝子中剂量组精子形态正常率、膜完整率和SOD活性均高于其他冷冻组,MDA含量低于各冷冻组,但各指标仅表示与菟丝子低剂量组存在显著差异(P<0.05)。试验表明,适量的菟丝子提取物可对抗冷冻造成的膜损伤,提高精子SOD活性,降低MDA含量。     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

冷冻保护剂对家畜精液冷冻保存的研究进展

家畜精液冷冻保存可以实现在不同时间、不同地点的人工授精,能有效提高优良种公畜的利用率,扩大其基因传播范围,同时也是家畜遗传资源易位保存的主要方法之一。在精液冷冻保存过程中,选择合适的稀释液成分对解冻后精子品质的影响十分重要。精子对低温非常敏感,在稀释液中加入冷冻保护剂可有效提升精子解冻后活力。文章综述了近几年渗透性冷冻保护剂(甘油、乙二醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜)和非渗透性冷冻保护剂(卵黄、大豆卵磷脂、蔗糖、脱脂乳)在猪、牛、羊、鸡、兔以及骆驼上的应用与研究,旨在为进一步深入研究家畜精子冻融损伤机制提供理论依据。     

保存温度和不同种类稀释液对猪精液品质的影响

猪精液在室温保存时,含庆大霉素的稀释液保存效果优于含青、链霉素的稀释液,两种稀释液在保存72h时,精子活率、顶体完整率、GOT和LDH活性以及存活指数差异极显著(P<0.01).低温保存时,含蜂蜜和卵黄的稀释液对防精子冷刺激、维持精子活率的效果比含葡萄糖、奶粉的稀释液理想.在冷冻保存条件下,以含2%甘油的稀释液保存效果最佳.液态保存(室温、低温)的猪精液,LDH活性随精子活率下降而下降;pH值则都呈先上升后下降的变化趋势.室温保存主要是引起精子顶体脊膨大和保存后期的顶体前端膨大;低温保存主要引起顶体前部膨大和保存后期的少数顶体脱落;冷冻保存主要是造成顶体的膨大程度加大和顶体脱落.3种保存条件都造成精子线粒体透性增强.液态保存和冷冻保存精液的精清GOT活性与顶体完整率无显著相关性(P>0.05).     

我国猪精液冷冻技术研究现状

我国于1974年开始研究猪精液冷冻保存技术,内容主要有:冷冻精液稀释液、平衡时间、冷冻时间、冻后精子活率及输入有效精子数等项目。结果解冻后活率在30～60％之间。1975～1983年共输精21859头母猪,情期受胎率达56.25％(33.30～74.78),窝产仔为8.18头。试验证明我国猪冷冻精液的保存技术有所进展。