禽网状内皮组织增殖病毒的血清学调查—酶联免疫吸附试验

在江苏省4个鸡场(或试验鸡群),应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对禽网状内皮组织增殖病毒(REV)的血清学进行了调查,在被检的249份血清样本中,REV抗体阳性117份,阳性率达47%。4个鸡场中,只一个鸡场未查到REV抗体。     

传染性法氏囊病血清Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗体的鉴别

病毒中和(VN)试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)和琼脂凝胶扩散(AGP)试验分別用来测定经传染性法氏囊病(IBD)Ⅰ型或/和Ⅱ型病毒的活毒或/灭活油乳剂苗免疫的鸡的血清抗体。结果表明,ELISA不能区分IBDⅠ型和Ⅱ型病毒的抗体,而VN试验则能鉴別两者。在AGP试验中、血清Ⅰ型病毒免疫后所获得的血清均与Ⅰ型和Ⅱ型的病毒产生沉淀线,但用血清Ⅱ型病毒     

酶联免疫吸附试验(ELISA)与补体结合试验(CFT)诊断牛亚临床型副结核病的比较与评估

本文对ELISA与标准CFT诊断牛亚临床型副结核病进行了比较和评估。在ELISA试验中,对用草分枝杆菌(MycobacteriumPhlei)和高岭土(Kaolin)上清液预吸收过的牛血清对副结核分枝杆菌粗制抗原(Crude pro-toplasmic antigen简称CP抗原)的抗体活性进行了分析。ELISA抗体滴度用ELISA抗体指数(EAI)表示,EAI=(At-An)/(Ap-An)。At、Ap、An分别表示1∶200未知待检血清,1∶400阳性对照血清和1∶200阴性对照血清吸收值。确定EAI≥0．6为ELISA抗     

抗独特型抗体检测H9亚型禽流感血清抗体

为了探讨用抗独特型抗体替代病毒或病毒亚单位检测H9亚型禽流感血清抗体的可行性,本试验分别用全病毒抗原和抗独特型抗体(Ab2)作检测原,通过琼脂免疫扩散试验(AGP)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了鸡的血清样品。在AGP试验中,分别用Ab2和禽流感病毒(AIV)对10份血清样品检测的符合率为70%。在间接ELISA试验中,Ab2和AIV抗原对10份血清样品检测的符合率为90%。用Ab2间接ELISA试验检测出的血清阳性率(8/10)高于血凝抑制试验(6/10)和AGP试验(5/10)。结果表明,在一定的情况下Ab2可以用来代替具有污染环境风险的病毒抗原来检测抗病毒抗体。     

酶连接免疫吸收化验与其他试验对布氏菌病的比较。使用血清得自实验性感染小母牛

24头未接种小母牛在攻毒之前和用流产布氏菌2308号菌株结膜囊攻毒之后12-102天之间11次采集血清样品,抗体滴度用酶连接免疫吸收化验(ELISA),标准试管凝集(STA),2-巯基乙醇凝集(ME),微量补体结合试验(MCF)和自动补体结合(ACF)作测定。ELISA与其他试验之间符合的是:100％(STA),75.7％(ME),97.8％(MCF)和95.2％(ACF),攻毒以后12天在小母牛中的抗体检出为ELISA18.2％,STA11.1％,ME无,MCF33.3％,ACF44.4％,在25天时ELISA与其他试验(除ME外)在全部感染的小母牛中均检出了抗体,全部小母牛在     

用于检测牛乳及血清中流产布鲁氏菌抗体的ELISA试验

本文对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牛乳中流产布鲁氏茵抗体一法进行了评价。从血清学阳性或阴性的奶牛采取乳样,测定其吸收值的分布,据此可将牛乳区别为 ELISA 阳性或阴性。在22头乳样和血清样品 ELISA 为阳性的奶牛中,有10头(45%)的乳样分离到流产布鲁氏茵。认为 ELISA 试验是检测牛乳中流产布鲁氏茵抗体的一个较为适用的方法     

DOT—ELISA检测猪瘟免疫抗体的研究

本文成功地建立了Dot—ELISA(斑点酶联免疫吸附试验)检测猪瘟免疫抗体,经猪丹毒、猪巴氏杆菌高免血清对照及猪瘟强毒攻毒试验证实;Dot—ELISA检测猪瘟免疫抗体是特异的。Dot—ELISA、ELISA和兔体中和三种方法比较,Dot—ELISA法具有简便、快速、敏感性高,特异性强。用Dot—ELISA法检测115头免疫猪血清抗体,免疫抗体在效价1:2—1:128之间,1:32—1:64以上滴度占95％。猪瘟攻毒试验结果:免疫猪的猪瘟免疫抗体保持在1:32以上,均能抗过猪瘟强毒的攻击。     

多种鸡病血清抗体效价联合测定法的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)做为一种简便、快速、灵敏、特异的诊断方法在兽医界已得到广泛的应用。在此基础上,一些学者又建立了P/N—ET和OD-ET法,这种方法的特点在于将免疫学和统计学有机地结合起来,对血清抗体效价进行测定时,只要将血清样品做一个稀释度进行ELISA,测出结果(P/N或OD值)后代入已建立的标准直线     

不同处理的血清对ELISA检测结果的相关性研究

采用三种不同方法把被检血清处理后,用于间接ELISA检测乙型五号病病毒抗体的相关性研究。A是未处理的血清直接进行ELISA测定,B是将血清在56℃下灭活30min后进行ELISA测定,C是将血清用25%的高岭土处理后进行ELISA测定。结果表明,三种不同处理方法的血清ELISA所测得的结果相关系数分别为г_(A-B)=0.724、г_(A-C)=0.774,г_(B-C)=0.686,同时,对这三种方法检测结果进行了t检验。发现A、B之间无显著性差异(P>0.05)而A与C、B与C之间存在显著性差异(P<0.05)。     

应用HRP—SPA—ELISA检测猪瘟病毒抗体的试验研究

应用猪瘟兔化弱毒PEG沉淀抗原、HRP—SPA建立了HRP—SPA—ELISA检测猪瘟病毒抗体的方法。通过对5份阴性血清和32头仔猪注苗前及注苗后不同时期256份系列血清的检测以及阻断试验,证明本法具有较高的敏感性和特异性。猪瘟抗体ELISA效价与兔体中和试验效价比较,二者呈显著的正相关(r=0.8072)。对32头仔猪系列血清的检测结果表明,免疫母猪(配种前45d左右注苗)所生的30～40日龄未注苗仔猪的母源抗体水平不很高,有1/3在阴性范围内,注苗后15d,ELISA抗体开始上升,90d达峰值;90～120d大部分猪的抗体水平迅速下跌到略高于60d时的抗体水平上,保持稳定约2个月左右,但也有一少部分猪90d后抗体水平下跌缓慢,一直保持相当高的水平。     

应用荧光偏振检测方法对出口牛进行布氏杆菌病检测

荧光偏振试验(FPA)是一种新的试验方法。本文应用荧光偏振检测方法对出口哈萨克斯坦的321份牛进行布氏杆菌病检测,结果有25份牛血清样品检测为抗体阳性。同时对321份血清进行虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)、补体结合试验(CFT)、间接ELISA试验(I-ELISA)、竞争ELISA试验(C-ELISA)等比对试验,结果是FPA从敏感性和特异性上都优于或等于目前主要采用的RBPT、SAT、CFT、ELISA检测方法。FPA方法简便、快速、通量大,不需洗板,可在15分钟内完成92份样品的布氏杆菌病检测,极适合于大批量牛布氏杆菌病的检疫、筛查和疫病监控。     

ELISA诊断牛锥虫病最佳稀释标准的探讨

酶联免疫吸附试验 (ELISA)是一种适用于大规模血清学诊断的免疫新技术。在普查牛锥虫病中 ,初步探讨出实验材料最佳稀释浓度标准。抗原为 10～ 2 0mg/mL ,血清抗体为 1∶2 0 0～ 5 0 0之间 ,酶标记物为 1∶460 ,在加被检血清之前 ,先加 0 .5 %牛血清白蛋白 (BSA) 0 .4mL孵育、洗涤可阻止非特异性蛋白质的竞争性吸附 ,并达到满意的检出效果     

牛血清白蛋白制品中杂蛋白对牛血清ELISA的影响

本试验对8种不同厂家生产的牛血清白蛋白(BSA)产品进行电泳试验和ELISA试验，判断BSA产品中杂质蛋白对ELISA检验，尤其是牛血清ELISA是否有影响。试验结果表明，(BSA)中含有杂质蛋白时，尤其是γ-球蛋白，会严重干扰牛血清ELISA结果。因此，布进行牛血清ELISA时，必须慎重选择BSA制品，以使ELISA检验结果更为准确。     

单克隆抗体捕捉ELISA法检测法氏囊病毒抗体

本文建立了单克隆抗体捕捉ELISA法(mAb-ELISA)来检测鸡血清中传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体,并与常规ELISA进行了比较。用上述两种ELISA法和血清中和试验(SN)检测鸡血清,发现SN与mAb-ELISA之间相关率为100％(49/49),而SN与常规ELISA之间的相关率为81.6％(40/49)。在 mAb-ELISA中,所有SN抗体阴性血清的光密度值都很低(<0.05),其光密度值与SN的滴度密切相关。而在常规ELISA中,SN抗体阴性血清出现不同的光密度值,其范围为0.06—0.32。因此,对于IBD阴性鸡血清来说,mAb-ELISA比常规ELISA非特异性反应更低。     

电子计算机处理酶联免疫吸附试验数据快速诊断牛蓝舌病

酶联免疫吸附试验(ELISA)已被广泛地应用于检查人和动物血清中特异性抗体。用间接ELISA诊断牛血清中蓝舌病病毒(BTV)的组特异性抗体已有报道,并认为是一种敏感、实用的方法。如何对ELISA结果作出合理的分析,确     

用酶联免疫吸附试验检测牛传染性鼻气管炎病毒抗体的敏感性和特异性

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体的技术已经得到了发展。我们用ELISA方法检测从无IBR病毒牛群中采集的304份血清,其特异性为100%;检测经鼻内疫苗接种免疫后采集的62份牛血清,其诊断敏感性在免疫后第一个月为27.4%,第六个月为100%,检测标准血清中和抗体滴度≥1:2的303份牛血清,其敏感性为100%;463份随意诊断样品经比较试验证明ELISA检出血清阳性牛(61.6%)比标准血清中和试验(49.9%)要高。因此,我们认为ELISA具有技术上的优越性,可以作为一种常规诊断试验来检测牛血清中IBR病毒抗体。     

基于猪丁型冠状病毒重组S1蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

为了解猪丁型冠状病毒(PDCoV)的流行情况,为PDCoV血清抗体检测提供工具,本研究应用原核表达系统表达部分PDCoV纤突蛋白(S)作为检测抗原,建立了基于PDCoV S1蛋白的间接ELISA抗体检测方法,并用该方法检测了2017年1月至12月自河北地区部分猪场收集的待检血清样品570份。结果显示:本研究建立的PDCoV间接ELISA方法能够特异地检测血清中的PDCoV抗体;与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒及伪狂犬病病毒的抗血清无交叉反应;批内重复变异系数1.9%～5.4%、批间重复变异系数2.3%～5.1%。570份待检血样中105份呈阳性,阳性率为18.4%(105/570),高于之前本实验室检测2016年1月至2016年10月河北地区PDCoV IgG抗体阳性率(11%),提示河北地区PDCoV的感染率呈上升趋势。本研究建立的ELISA方法具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点,可用于临床PDCoV血清抗体的检测。     

牛布鲁氏菌四种血清学检测方法的比较

[目的 ]为在布鲁氏菌病临床检疫中选择可靠的血清学检测方法提供参考。[方法 ]对采集的294份牛血清样品用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和补体结合试验(CFT)进行布鲁氏菌病抗体检测,比较RBT与ELISA,SAT与CFT的符合率及Kappa值,以CFT作为判定标准,比较四种检测方法的敏感性和特异性。[结果 ]RBT与ELISA、SAT与CFT检测方法的符合率高达到95%以上,且Kappa值均大于0.75。以CFT作为判定标准,RBT和ELISA的敏感性较好,但有假阳性;SAT的特异性较好,但有假阴性。综合比较认为ELISA的敏感性和特异性都比较理想。[结论 ]临床工作中使用RBT或ELISA对布鲁氏菌病进行初筛,用CFT进行复核确诊,通过两种或两种以上的血清学检测方法联合诊断,结果较为理想。     

应用单克隆抗体ELISA阻断试验快速检测兔出血症病毒抗体的研究

利用抗兔出血症病毒(RHDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了ELISA阻断试验用以检测血清抗体,并与血凝抑制(HI)和琼脂扩散试验(ID)进行了比较。结果ELISA阻断试验敏感性超过HI,更远胜于ID,具有灵敏、特异、准确等优点,适于大批血清样品的快速检测。     

牛的肝片吸虫感染的酶联免疫吸附试验诊断

本文是关于诊断牛的肝片吸虫感染的酶联免疫吸附法(ELISA)的研究,包括4种抗原制备,即新鲜吸虫抗原(FFA)、死亡吸虫抗原(DFA)、冻干吸虫抗原(LFA)和部分提纯抗原(PPA)的活性价值,以及用 FFA、LFA 进行 ELISA 以诊断实验发生与自然发生的肝片吸虫病牛ELISA 使用 FFA 时,最早可在犊牛感染肝片吸虫后4周检出抗体;用 DFA 时,其活性稍低;用 LFA 时,至感染后9—10周,仍未得出诊断值;用 PPA 时,出现与非感染的对照血清相同的高背景读数,被认为无作进一步使用的足够特异性。长培育期与短培育期的 ELISA 方法能用于诊断研究,两种方法都一样敏感,已知阳性血清的光密度(OD)读数一般为正常对照血清的2.5倍。这些方法的重复性极好,在重复试验中,以同样试剂对代表性已知阳性血清和阴性血清进行 ELISA 时,OD 读数仅有轻微变化。