猪圆环病毒2型(PCV2)感染:临床症状、病理学及实验室诊断

临床症状和病理学特征仍然是怀疑和诊断PCV2感染相关疾病的基石。随着时间推移,对该病毒感染的临床病理认识不断增加。从最初报道的断奶仔猪多系统衰竭综合征,到一些肠道、呼吸道和繁殖紊乱都与PCV2有关。一种免疫复合性疾病,猪皮炎与肾病综合征也与这种病毒感染有关。这些疾病一起被归入猪圆环病毒病(PCVD)或猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)。感染PCV2的猪发展成为PCV2亚临床感染或临床PCVD/PCVAD的具体机制还有待阐明,但是对田间基本样本的基于临床、解剖和组织病变的观察有助于揭示该病毒感染的致病机理。本综述目的是更新现有对于PCV2感染的临床、病理以及它们的诊断方法的认识。此外还提出了统一的PCVD/PCVAD命名方法的提议,并给出了确切的诊断标准。     

猪圆环病毒2型(PCV2)遗传变异与疫苗免疫、发病机理及诊断的关系(续)

<正>上期回顾:上一期主要介绍了PCV2分离株的进化和分类,包括圆环病毒的起源、PCV2的出现和PCV2的分类和系统发生的关系。2分子差异与PCV2的致病性PCV1、PCV2a和PCV2b的基因组大小分别为1 759、1 768和1 767个核苷酸(Tischer等,1986;Meehan等,1998)。PCV1和PCV2在核苷酸水平上序列有70%的相同,PCV2a和PCV2b基因型有95%的相似性。PCV2各基因型主要差异在ORF2,该处核苷酸和氨基酸序列的相似度有90%。有报道指出肽段的不同造成了致病力的差异,导致低致病性的PCV2a被PCV2b取代。序列比较发现ORF2内有一对基序可以区别PCV2a和PCV2b分离株(cheung等,2007)。PCV2b病毒基因组1 486~1 472位序列为TCA/AAC/CCC/CG,PCV2a在1 487~     

猪圆环病毒2型(PCV2)遗传变异与疫苗免疫、发病机理及诊断的关系

猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的发生依赖猪圆环病毒2型(PCV2)的感染,表现为一群复杂的多因子综合征。目前在野外流行的PCV2被分为PCV2a和PCV2b两个亚群。北美和其它国家PCVAD的暴发通常与主要基因型从PCV2a转变为PCV2b有关。因此,有人提出基因型存在致病性和抗原性差异。总体来说,毒力是特定PCV2分离株的特性,与基因型无关。此外,报道证实只有少数抗原差异。就免疫病理学而言,位于衣壳蛋白C端一个保守的诱骗表位为不能鉴定基因型之间的致病力差异提供了解释。最后本文讨论了PCV2的遗传变异对疫苗和诊断方法的影响。     

猪圆环病毒2型(PCV2):遗传变异与疫苗免、发病机理及诊断的关系(续)

<正>上一期主要介绍了PCV2分离株的分子差异与PCV2的致病性,包括猪圆环病毒间致病差异、ORF1和ORF2对致病性的影响、CP内的抗体表位、PCV2基因型间的抗原性差异。3遗传变异在诊断中的作用3.1 PCV1和PCV2的鉴别诊断PCV和PCVAD的标准诊断方法已经广泛综述(Gillesipe等,2009;Opriessing等,2007)。PCV1和PCV2特异性的兼并引物可以用于聚合酶链式反应(PCR)或原位杂交来鉴别PCV1和PCV2(Larochelle等,     

PCV2疫苗和免疫接种的 10年:净化能否成为事实(续1)

在猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)出现后的20多年,它仍然是一种对养猪业有重要经济影响的病原体。PCV2的商用疫苗在2006年首次进入美国市场,在减少感染猪的临床症状和提高产量方面起到了显著的作用。最近的研究表明,PCV2在猪场猪群中的流行性和败血症发生率有所下降。然而,新变异毒株的出现又使PCV2的流行性上升。本文将评论PCV2疫苗领域最新热点的话题,包括比较商用疫苗的免疫效果、现有疫苗对新型毒株的免疫效力、自然感染和接种疫苗在免疫力上的差异、目前PCV2疫苗研究模型的局限性以及新颖试验疫苗的研究新进展。讨论也是在未来PCV2可得到净化的前提下进行的。     

猪圆环病毒2型的流行病学和传播特点

近十年来猪圆环病毒2型（PCV2）普遍在猪群中流行,90年代以后感染圆环病毒2型导致的临床疾病给世界猪业生产造成了巨大的损失。PCV2包括几个基冈型。从流行病学数据可以看出,全球PCV2基因型从PCV2a转移到PCV2b,PCV2b可引起更严重的疾病。此外,流行病学研究分析指出PCV2感染动力学的改进与感染PCV2后临床症状的增加有很强的关联。     

两种猪圆环病毒2型疫苗临床免疫效果的比较

选取国内商业PCV2疫苗A和B,在一个大型猪场进行小型田间试验.将36头母猪随机平均分成3组,每组母猪所产仔猪在14日龄分别接种疫苗A(A组)、 疫苗B(B组)、 生理盐水(C组,对照).采集免疫后不同时间的仔猪血清,检测PCV2抗体,比较各组的发病率、 死亡率与增重.结果显示,接种疫苗组与对照组的仔猪发病率与死亡率都低、 且无差异;但接种PCV2疫苗的两组都显著(P<0.05)提高了增重,并改善了血清中PCV2抗体变化趋势.另外,A组的临床数据稍优于B组.检测结果表明,仔猪免疫PCV2疫苗的临床效果明显优于未免疫组,PCV2疫苗A的临床免疫效果稍好于疫苗B,为试验猪场今后进行PCV2疫苗免疫提供了实验依据.     

广西猪圆环病毒2型及3型的流行病学初步调查

为了解广西近年来猪圆环病毒2型(PCV2)、圆环病毒3型(PCV3)的感染现状,本研究采集2020年-2022年来自广西养殖场、生猪屠宰场及无害化处理点的样品,采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果表明,1408份样品中,有731份PCV2阳性样品,阳性率为51.92%,471份PCV3阳性样品,阳性率为33.45%,有353份样品PCV2、PCV3均阳性,混合感染率25.07%。PCV2、PCV3普遍分布在广西14个地市,各地市感染程度存在较大差异。养殖场、屠宰场及无害化处理点PCV2、PCV3风险较高,风险由低到高依次是养殖场、屠宰场及无害化处理点。从不同类型样品携带病毒的情况来看,淋巴结和脾脏最高,脐带次之,精液未检测出阳性。这些结果可为我区PCV2、PCV3的流行情况分析、采样监测及防控提供依据。     

免疫刺激商品断奶仔猪复制多系统衰竭综合征(PMWS)

猪圆环病毒2型（PCV2）是引起PMWS的必需病原,与其他病原混合感染或受到外界刺激时表现PMWS临床症状。本试验将16头商品化断奶仔猪（32日龄）随机分为4组（每组4头）,即对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组、PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组,用上海某猪场分离株PCV2-SH、钥匙孔血蓝蛋白（KLH）反复刺激断奶仔猪以复制PMWS。其中对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组未出现症状;PCV2攻毒组症状较轻,出现增重缓慢,伴有短暂的体温升高;而PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组出现明显的临床症状,2头猪在攻毒后第11天濒临死亡,其中1头在第12天死亡,攻毒猪宰杀后脏器出现明显的病理变化。PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组于攻毒后第4天出现病毒血症,宰杀后肺脏、淋巴结均检测到PCV2的DNA。以上结果说明,PCV2-SH感染结合免疫刺激可以引起商品化仔猪发生PMWS,为PCV2致病机理和免疫学研究提供了动物发病模型。     

猪圆环病毒病(PCVD)的防制(下)

<正>(上接本刊2010年第13期第15页)第四部分PCV2与其他病原在混合感染型猪病中的相互作用1PCV2与PRRSV混合感染导致PCV2复制增强,易发生增生性坏死性肺炎     

PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用

本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）和猪圆环病毒3型（PCV3）的双重纳米PCR（nano-dPCR）方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。     

PCV2疫苗和免疫接种的10年:净化能否成为事实

在猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)出现后的20多年,它仍然是一种对养猪业有重要经济影响的猪病。PCV2的商用疫苗在2006年首次进入美国市场,在减少感染猪的临床症状和提高产量方面起到了显著的作用。最近的研究表明,PCV2在猪场猪群中的流行性和败血症发生率有所下降。然而,新变异毒株的出现又使PCV2的流行性上升。本文将评论PCV2疫苗领域最新热点的话题,包括比较商用疫苗的免疫效果、现有疫苗对新型毒株的免疫效力、自然感染和接种疫苗在免疫力上的差异、目前PCV2疫苗研究模型的局限性以及新型试验疫苗的研究新进展。讨论也是在未来PCV2可得到净化的前提下进行的。     

猪圆环病毒2型致病机理及防控措施研究的回顾和展望

PCV2一直困扰着养猪生产,到目前为止,国内外学者已对PCV2的分子生物学、流行病学,以及PCV2感染猪的症状和病理变化、感染途径、疫苗研制、防控措施等方面做了大量研究,对PCV2获得越来越深刻的认识。但对PCV2在机体内的分布,感染途径,以及PCV2是否直接致病等问题,仍然没有完全搞清楚,或存在很大争议。本文通过研究相关文献,结合自己处理PCV2的临床体会,认为胃溃疡是PCV2感染猪的一致性病变;PMWS、PDNS和胃溃疡,是PCV2在应激条件下直接造成的症状;并根据自家组织苗比纯培养灭活苗免疫效果更好的这一现象,对PCV2的免疫机理,提出了一个新假说。     

2型猪圆环病毒研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是一种基因组较小,但有较高进化速率的DNA病毒,其是影响养猪业经济发展的重要病原体。到目前为止,PCV2具有5种基因型-PCV2a到PCV2e,但对PCV2流行株的基因序列的检测发现,PCV2的基因型仍在持续的发展。自2012年以来,PCV2d基因型的圆环病毒在北美取代了以前主导的PCV2b基因型感染,同时在中国和韩国也有了类似的趋势。圆环病毒的新兴基因型,其毒力存在增强的可能性,基于PCV2a基因型制备的疫苗,是否对PCV2d基因型圆环病毒的感染具有保护作用,已引起各国学者的重视。本文通过对PCV2的生物学特性、抗体变异情况以及其基因进化情况进行综合的分析总结,从而为PCV2疫苗的开发与研制奠定理论基础。     

RT-PCR法对福州周边猪PCV2流行情况调查

2009年7月至12月,收集福州周边猪场送检的71份病料,采用荧光定量RT-PCR法进行PCV2检测。结果表明,7～9月份送检病料的PCV2阳性率为34.37%,而10～12月份送检病料的PCV2阳性率高达94.87%,从检测的结果来看,冬天寒冷季节PCV2感染率明显高于夏季。     

猪圆环病毒3型与猪圆环病毒2型二重PCR检测方法的建立

为建立同时检测PCV3和PCV2的二重PCR方法,分别以PCV3和PCV2基因组的保守区域设计2对特异性引物,片段大小分别为649,295 bp。将反应条件进行优化,构建PCV3和PCV2的二重PCR检测方法。检测结果表明该方法能特异性扩增PCV3和PCV2,且无法扩增其他猪常见病毒;PCV3和PCV2的最低检出限分别为508,412 copies/μL。临床样品检测结果显示,PCV3和PCV2阳性率分别为2.1%(3/145),62.1%(90/145),PCR产物经测序证实为PCV3。本研究建立的二重PCR方法具有速度快、特异性强和灵敏度等优点,可以用于PCV3和PCV2的检测和流行病学调查。     

PCV2a/2b灭活疫苗与PCV2b亚单位疫苗免疫效力比较试验

比较猪圆环病毒(PCV)2a、PCV2b基因型全病毒灭活疫苗和PCV2b亚单位疫苗对PCV2b基因型强毒株免疫攻毒保护效力。取3种类型PCV2疫苗,分2次免疫PCV2抗原和特异性抗体阴性的BALB/c小鼠和14日龄仔猪,间隔21d,分别于免疫后14、21和35 d进行PCV2特异性ELISA抗体测定。使用临床分离鉴定的PCV2b基因型强毒株进行攻毒,通过攻毒前后临床观察、体温变化、平均相对日增重及PCV2核酸载量检测等对疫苗免疫效果进行评价。结果:不同类型PCV2疫苗免疫BALB/c小鼠后14 d能检测到PCV2特异性抗体,在35 d时抗体水平持续升高,其中PCV2b亚单位疫苗产生抗体水平高于全病毒灭活疫苗;不同类型疫苗均能刺激仔猪产生较好的免疫应答,其中PCV2b亚单位疫苗刺激机体免疫应答强于灭活疫苗;仔猪免疫攻毒试验表明,3种类型疫苗均可刺激机体产生抵御PCV2强毒攻击的特异性免疫应答,免疫组体温变化、相对日增重及PCV2核酸载量检测均与攻毒对照组间存在显著性差异,3种类型疫苗之间差异不显著。试验表明:3种类型PCV2疫苗免疫小鼠和仔猪后均能诱导产生抵御PCV2b基因型强毒攻击的特异性免疫应答反应,有效抵抗PCV2感染和提高猪的生长性能。     

陕西7个地区猪2型圆环病毒(PCV2)感染的血清学调查

为明确陕西省PCV 2感染的发生情况,以便控制PMW S的流行,本试验用间接EL ISA方法对陕西省7个不同地区多个猪场不同日龄的猪群进行了PCV 2感染的血清学调查。报告如下。1材料与方法1.1材料被检血清样品共476份,采自陕西省榆林、宝鸡、西安、渭南、汉中、商洛、安康等7个不同地区     

PCV2b Cap蛋白重组杆状病毒的构建及鉴定

猪圆环病毒(PCV)能够引起多种综合征和疾病,给养猪业造成了较大的经济损失。PCV2毒株在2003年后以PCV2b取代PCV2a成为临床感染的猪群中最为流行的基因型。PCV基因组为单股负链环状DNA,其中ORF2编码病毒核衣壳蛋白Cap蛋白,Cap蛋白是主要的免疫原性蛋白。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将PCV2b的Cap蛋白基因克隆到杆状病毒载体中,通过制备杆粒、转染sf9细胞,获得表达PCV2b Cap蛋白的重组杆状病毒毒株,从IFA、SDS-PAGE及Western-blotting分析结果可以看出,该重组杆状病毒毒株成功表达了PCV2b Cap蛋白,为制备PCV2b Cap蛋白亚单位疫苗打下基础。     

广西3株牛源PCV2全基因组克隆与序列分析

为研究广西地区牛源PCV2流行毒株基因组特性和遗传进化情况,运用PCR技术对广西地区采集的210份牛血清进行检测,结果其中35份样品为PCV2阳性。将3份阳性样品进行全基因组克隆与序列分析,分别命名为PCV2/GX-B2(1 769 nt)、PCV2/GX-B131(1 768 nt)、PCV2/GX-B132(1 767 nt)。同源性显示与猪DK1980PMWS-free株同源性最低(94%),与牛源的Buffalo2株同源性最高(98.6%)。遗传进化分析,3株牛源PCV2毒株均属于PCV2d基因型。本研究报道了PCV2在我国广西地区牛群中的感染情况,并发现广西地区牛群中PCV2的主要流行基因亚型为PCV2d。