猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒混合感染的检测及TTV遗传变异分析

为了解我国猪群中猪输血传播病毒(TTV)与猪圆环病毒(PCV)混合感染情况,本研究采用PCR方法对采自14个省280份病料样品进行检测,结果显示,TTV1和TTV2阳性检出率分别为51.8%和28.2%,TTV1与TTV2混合感染率为18.2%;PCV1和PCV2阳性率分别为41.1%和37.5%,PCV1与PCV2混合感染率为19.6%;PCV2阳性样品中TTV1和TTV2混合感染率达75.0%。此外,对2株TTV1基因组进行测序,与GenBank中登录的6个TTV1序列比对,相似性结果为67.3%～95.1%;对4株TTV2基因组测序,与GenBank登录的4条TTV2序列比对,相似性为84.7%～90.4%;将TTV1与TTV2进行序列比对,相似性仅为44.0%。TTV1和TTV2基因高变区分别位于520 nt～2 594 nt和720 nt～2 170 nt;TTV1基因保守区位于1 nt～520 nt和2 595 nt～2 800 nt;而TTV2基因保守区位于1 nt～719 nt和2 171 nt～2 800 nt。以上结果表明,我国猪群中存在TTV与PCV2的混合感染,并且两种病毒混合感染引起...     

免疫刺激商品断奶仔猪复制多系统衰竭综合征(PMWS)

猪圆环病毒2型（PCV2）是引起PMWS的必需病原,与其他病原混合感染或受到外界刺激时表现PMWS临床症状。本试验将16头商品化断奶仔猪（32日龄）随机分为4组（每组4头）,即对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组、PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组,用上海某猪场分离株PCV2-SH、钥匙孔血蓝蛋白（KLH）反复刺激断奶仔猪以复制PMWS。其中对照组、钥匙孔血蓝蛋白刺激组未出现症状;PCV2攻毒组症状较轻,出现增重缓慢,伴有短暂的体温升高;而PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组出现明显的临床症状,2头猪在攻毒后第11天濒临死亡,其中1头在第12天死亡,攻毒猪宰杀后脏器出现明显的病理变化。PCV2攻毒组和PCV2攻毒后钥匙孔血蓝蛋白刺激组于攻毒后第4天出现病毒血症,宰杀后肺脏、淋巴结均检测到PCV2的DNA。以上结果说明,PCV2-SH感染结合免疫刺激可以引起商品化仔猪发生PMWS,为PCV2致病机理和免疫学研究提供了动物发病模型。     

吉林部分地区TTSuVs与PCV2混合感染情况调查及其与PMWS相关性分析

为了解吉林地区猪细环病毒(TTSuVs)与II型猪圆环病毒(PCV2)混合感染情况,分析TTSuVs感染与仔猪多系统衰竭征(PMWS)的相关性。试验通过PCR技术对2019年收集到的吉林部分地区的10家规模化猪场130份血清样本进行检测;并应用本实验已建立的PCV2、TTSuVs实时荧光定量PCR检测方法,对PCV2阳性样品进行病毒载量的分析,区分PMWS病猪与PCV2亚临床感染猪,比较PMWS病猪与PCV2亚临床感染猪中TTSuVs的载量。结果显示:TTSuV1感染率为38.46%;TTSuV2感染率为57.69%;PCV2感染率为46.15%;TTSuV1与TTSuV2的混合感染率为31.54%;TTSuV1与PCV2的混合感染率为32.30%;TTSuV2与PCV2的混合感染率为44.62%;三种病毒的混合感染率为22.30%。且PMWS病猪血清中TTSuV2载量明显高于PCV2亚临床感染猪(P<0.01)。结果表明,TTSuV2载量与PMWS病的发生存在一定程度的相关性。     

金华地区猪圆环病毒病病原流行病学调查

试验从2008年12月至2010年3月期间采集金华地区部分猪场疑似PCV2感染症状病料102份,采用PCR技术,利用所设计合成的一对PCV2型特异性引物,对病料中的PCV2目的片段进行扩增检测,试验结果显示平均阳性率为59.80%;然后对PCV2阳性病料进行混合感染检测,结果显示病料中一定程度地感染了PRV、PRRSV以及PPV,且混合感染比单纯感染占更大比例,其中二重感染以PCV2与PRRSV混合感染最高;三重感染以PCV2、PRRSV和PRV三者感染最高.     

上海地区发病猪群猪圆环病毒2型阳性样本中其他病原混合感染状况调查

本研究对2009年至2011年上海地区发病猪群内脏样本进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus,PCV2)检测,对PCV2阳性样本进行2a/2b分型检测,并对PCV2阳性样本进行其他病原混合感染状况调查。上海地区发病猪群PCV2阳性率平均为54.34%,以PCV2b单纯感染为主。在PCV2阳性样品中,其他病毒混合感染率平均达到60.2%,细菌混合感染率达到61.22%,病毒与细菌同时混合感染率为41.84%,平均混合感染率达到53.06%。研究表明,上海地区发病猪群PCV2阳性样本与其他病原混合感染比例较高,病毒主要以PRRSV为主,细菌主要以大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌及副猪嗜血杆菌为主;混合感染是导致猪群死亡的重要因素,也是当今上海地区猪群疫病的感染现状及发病模式。     

猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪 狂犬病病毒混合感染的检测分析

本研究采用RT-PCR方法对2010年12月至2011年11月采集于豫西地区的170份疑似PRRSV感染猪病料进行病原检测,得到102份高致病性PRRSV阳性样本,在此基础上应用PCR方法检测PCV2和PRV的感染情况,并计算混合感染率。试验结果显示,豫西地区PRRS发病猪主要疫病的总混合感染率为58.52%,二重混合感染率为39.21%,三重混合感染率为19.61%,其中PRRSV/PCV2型二重混合感染最严重,混合感染率达33.33%;春夏和秋冬总混合感染率分别为48.57%、81.25%,而且不管是二重还是三重混合感染,秋冬均比春夏更严重,尤其是PRRSV/PCV2/PRV型三重混合感染,秋冬与春夏季节的混合感染率相差较大,分别为37.50%、11.43%;PRRS发病猪从哺乳期到育肥期都有混合感染,混合感染率分别为42.10%、50.00%、100.00%,混合感染程度逐渐加重,主要集中在育肥期;不同发病时期的最高混合感染型也有所不同,其中哺乳期最高混合感染型为PRRSV/PCV2,混合感染率为42.10%,保育期最高混合感染型为PRRSV/PCV2、PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率均为22.73%,育肥期最高混合感染型为PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率为50.00%。本研究反映了豫西地区PRRS发病猪群与猪圆环2型及猪伪狂犬病的混合感染情况和规律,为该地区PRRS及其混合感染的临床诊治和区域性防控工作的进行提供了理论依据和指导。     

猪圆环病毒病(PCVD)的防制(上)

<正>第一部分猪圆环病毒病(PCVD)简介猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Disease,PCVD。也称作Porcine Circovirus Associated Disease,PCVAD)是由猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起的猪传染性疾病,是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后发现     

PCV2和PRV混合感染对仔猪血清白细胞介素和IFN-γ水平的影响

研究PCV2和PRV混合感染对仔猪血清白细胞介素及IFN-γ水平的影响。将34头仔猪分为PRV单感染组(Ⅰ组)、PCV2单感染组(Ⅱ组)、PCV2和PRV混合感染组(Ⅲ组)及对照组,Ⅰ组颈部肌内注射PRV 2 mL,Ⅱ组颈部肌内注射PRV2 2 mL,Ⅲ组颈部肌内注射PRV、PRV2各1 mL,对照组颈部肌内注射生理盐水2 mL。分别在实验第0、3、7、14、21、35天空腹前腔静脉采血、分离血清,用ELISA方法检测仔猪血清中IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ含量。结果显示,混合感染组猪第8~14天发生死亡,IL-4、IL-10水平均呈上升趋势;IL-6水平呈先下降、后上升、再下降的趋势,第3天达到最低值;IFN-γ水平呈先下降、后上升的趋势,第3天达到最低值。PCV2和PRV混合感染对仔猪免疫系统的影响及PCV2引起的免疫抑制机制对该病的防治提供了科学依据。     

四川省PPV与PCV2的病原流行病学调查

从四川省21个规模化猪场采集样品273份,利用PCR方法检测并分析了猪细小病毒和猪圆环病毒的感染及混合感染情况,结果共检出PPV病原阳性样品47份（占17．22％）;PPV阳性猪场8个（占38．1％）;种猪的感染率较高,仔猪感染率相对较低;检出PCV2病原阳性样品143份（占52．38％）,PCV2阳性猪场18个（占85．7％）;PCV2感染随猪年龄的增长而升高;检出PPV和PCV2混合感染样品29份（占10．62％）;同时存在PPV和PCV2的猪场6个（占28．7％）,混合感染主要集中在母猪和保育仔猪阶段。仅有3个猪场未检出PPV和PCV2病原,占14．3％。该结果说明PPV与PCV2及其混合感染在四川省流行广泛,对养殖业构成了较严重的危害。     

猪圆环病毒2型与猪TTV混合感染的流行病学调查

根据GenBank_h发表的猪圆环病毒2型（Porcinecircovirustype2,PCV2）基因组序列和TTV（Torquetenovirus）1、2型的UTR序列设计合成引物,建立了分别用于检测PCV2和TTV1、TTV2的PCR及巢式PCR方法。应用建立的PCR方法对送检的广东、福建和江西等7个省份258份血液和组织样品进行了PCV2、TTV1和TTV2的检测,确定猪群中PCV2与TTV1和／或TTV2混合感染情况。结果表明,94份样品表现为PCV2和TTV1的混合感染,占样品总数的36．4％;193份样品表现为PCV2和TTV2的混合感染,占74．8％;另外,还有一些样品为三重感染,占34．5％。由此可以看出,猪群中PCV2和／或TTV1和／或TTV2的混合感染很普遍。     

猪圆环病毒2型感染的检测与流行病学调查

根据GenBank上发表的PCV2 ORF2和PRRSV ORF7序列设计合成引物,建立分别用于检测PCV2和PRRSV的PCR和RT-PCR方法,并对2003年9月至2005年5月采自189个可疑发病猪场的389份病料进行了PCV2和PRRSV的检测。结果显示,来自33个猪场的35份样品为PCV2阳性,猪场PCV2阳性率为17.1%;PCV2与PRRSV混合感染率为5.1%,PCV2阳性猪场中PRRSV感染率为57.6%。流行病学统计结果表明,安徽省猪场PCV2阳性率最高;安徽省和广西省猪场PCV2和PRRSV的混合感染最严重;春夏季节PCV2阳性率明显高于秋冬;消瘦、被毛粗乱是PCV2感染的主要特征;淋巴结水肿或出血,肾脏肿大、出血或呈灰白色以及脾脏病变是PCV2感染的主要病理变化;仔猪7～8周龄发病率最高。     

猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒混合感染对仔猪血液生理生化指标的影响

为了解猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒混合感染对仔猪血液生理生化指标的影响,本实验将34头仔猪分为第I组(PRV单感染组)、第Ⅱ组(PCV2单感染组)、第Ⅱ组(PCV2和PRV混合感染组)及对照组。分别在实验0、3、7、14、21、35天空腹前腔静脉采血分离血清,检测血清中IgG和血液生理指标。结果表明混合感染组IgG和对照组差异不显著,红细胞和血红蛋白和对照组比较在第14天差异显著,白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞各时间段均显著低于对照组。该研究从血液学方面解释了PCV2和PRV混合感染的发病机制。     

猪圆环病毒2型(PCV2)感染:临床症状、病理学及实验室诊断(续完)

上期回顾:上一期我们主要介绍了PCV2感染相关的临床特征,包括PCV2亚临床感染和PCV2临床感染等。     

河南地区猪圆环病毒2型感染的血清流行病学调查

为初步了解河南地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染情况,应用ELISA方法对河南12个地区的226份血样进行PCV2抗体检测,结果抗体阳性率为53.10%。其中母猪抗体阳性率为70.37%,公猪抗体阳性率为40.00%,育肥猪抗体阳性率为50.00%,仔猪抗体阳性率为46.67%。并对猪圆环病毒2型与其他病原混合感染情况做了调查,结果表明:与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的比例为26.67%;与猪瘟病毒(CSFV)混合感染的比例为35.83%;与猪伪狂犬病毒(PRV)混合感染的比例为16.67%;与猪传染性胸膜肺炎(APP)混合感染的比例为61.67%。调查分析初步表明:PCV2感染在河南地区普遍存在,并极易与其他病原混合感染。     

断乳仔猪多系统衰竭综合征病原检测与分析

应用PCR技术,结合,临床观察、病理解剖对福建省不同地区断乳多系统衰竭综合征（PMws）发病猪群采集的病料进行多重病原检测与分离。结果表明50份病料中猪圆环病毒2型（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）阳性率分别为40％、26％、4％、0,不同地区各病原检出率差别不大。病毒性混合感染以PCV2和PRRSV为主,感染率为22％;PCV2与CFSV混合感染率为4％;PRRSV与CFSV混合感染率为4％;PCV2、CFSV、PRRSV三种病原混合感染率为4％。研究结果表明福建大部分地区猪群PMWS的发生是PCV2、PRRSV、CSFV等多种病原混合感染的结果,其主要病原为PCV2,该病的发生没有明显地域性。     

猪圆环病毒2型(PCV2-SX株)灭活疫苗免疫效果研究

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,该病毒可以协同其他因素增强疾病感染的危害。感染PCV2后可引起猪只消瘦、生长缓慢、饲料利用率低,抑制免疫系统,使机体免疫防御力降低,常常发生多疾病混合感     

猪瘟与猪圆环病毒混合感染的实验室检测

研究利用前期建立的猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法、猪圆环病毒多重PCR检测方法,对2019年3～10月采自湖北省内15家养猪场的480份组织样品分别进行CSFV、PCV病原学检测。结果显示,CSFV、PCV1、PCV2或PCV3单一感染的样品阳性率分别为0.83%、0.42%、2.71%和1.04%;双重感染中CSFV+PCV1阳性率为0.21%,CSFV+PCV2阳性率为1.67%,CSFV+PCV3阳性率为0.83%,PCV1+PCV2阳性率为8.33%,PCV2+PCV3阳性率为19.38%,PCV3+PCV1阳性率为2.92%;多重感染中CSFV+PCV1+PCV2阳性率为0.21%,CSFV+PCV2+PCV3阳性率为0.63%,CSFV+PCV1+PCV3阳性率为0.00%,PCV1+PCV2+PCV3阳性率1.88%,CSFV+PCV1+PCV2+PCV3阳性率为0.83%。表明湖北省内CSFV、PCV流行较广,且多以混合感染方式流行,其中以PCV2+PCV3阳性率最高,达19.38%。兽医工作者今后应重点关注不同病原间的混合感染。     

猪瘟与猪圆环病毒2型混合感染检测方法的建立与初步应用

根据GenBank上发表的猪瘟（classical swine fever virus,CSFV）和猪圆环病毒2型（porcine circovirus type2,PCV2）的核苷酸序列,应用NCBI/Primer-Blast设计合成分别针对CSFV和PCV2的1对特异性引物,建立了分别用于检测CSFV和PCV2的RT-PCR和PCR方法,并对2008年4月～8月采自昆明8个可疑发病猪场的19份病料进行了CSFV和PCV2检测。结果显示,来自3个猪场的4份检测样品为CSFV阳性,猪场的CSFV阳性率为21.05%;来自2个猪场的2份检测样品为PCV2阳性,猪场的PCV2阳性率为10.53%。CSFV和PCV2混合感染率为10.53%。表明所建立的CSFV和PCV2混合感染检测方法具有特异性,可用于CSFV和PCV2混合感染的辅助诊断和流行病学调查,同时也为CSFV和PCV2混合感染的防制提供科学的依据。     

猪圆环病毒病快速检测的应用研究与流行病学调查

本研究对2012年4月至2013年3月上海市浦东新区5个规模化养殖场进行了猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）2型（PCV2）针对性的调查,并对PCV2疑似病例进行病原和其他病原混合感染状况调查.浦东地区发病猪群PCV2阳性率平均为31.5％.研究表明,浦东地区PCV2与猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV）的混合感染率为34.8％,混合感染是导致猪群死亡的重要因素,也是当今浦东地区猪群疫病的感染现状及发病模式.     

PCV2相关疾病(PCVDs):风险因素分析

1 PCV2感染动力学的重要性:猪感染PCV2时的年龄是决定因素 累积的证据表明,猪场内PCV2感染动力学在很大程度上与PCVD发病的机率有关.在法国(2000 ～ 2001年)和西班牙(2002 ～ 2003年)进行的第一个病例对照研究表明,PCVD发病猪场内12～ 13周龄猪群的PCV2血清阳性率要高于非发病猪场的猪群.这证实了PCVD发病猪场的PCV2感染的平均发生时间较早.在PCVD发病猪场进行的更详细研究(纵向队列研究)后,证实了PCV2感染的发生时间越早,猪爆发PCVD的风险越大(图1).